O„zbekiston respublikasi oliy va o„rta maxsus ta‟lim vazirligi qarshi davlat universiteti biotexnologiya kafedrasi

2.2. Oqsil miqdorini aniqlash 

 

Oqsilni biuret reaksiyasi bo‗yicha aniqladik [Gornal, 1949]. Biuret reaktivini 

tayyorlash  uchun  750  mg  mis  sulfat  (CuSO4*5H2O)  va  natriy-kaliy  vinnokisliy 

(NaKC

4

H

4

O

6

  *  4H

2

O)  ni  500  ml  suvda  eritdik.  Oksidlanishni  oldini  olish  uchun 

tayyor  eritmaga  150  ml  10%  li  natriy  gidroksid  (NaON)  va  1  g  kaliy  yodid  (KJ) 

qo‗shdik  va  hajmini  suv  yordamida  1  l  ga  yetkazdik.  Tayyor  eritmani  polietilen 

idishda saqladik.  

Mitoxondriya  suspenziyasidagi  oqsil  miqdorini  aniqlash  uchun  0,1  ml 

suspenziyaga    membranani  buzish  uchun  0,9  ml  2n  KON  va  10  mg  dezoksixolat 

---

 

38 

kislota qo‗shdik. Oqsil to‗liq erigandan so‗ng, 4 ml biuret reaktivi qo‗shildi xona 

haroratida 30 daqiqa davomida qoldirildi. Bir vaqtda kontrol proba (1 ml 2n KON 

+ 10 mg dezoksixolevoy kisloti + 4 ml biuretovogo reaktiva) tayyorlandi.  10 mm 

qalinlikdagi  kyuvetada  540  nm  ko‗rsatkichda  kalorimetrovka  qilindi.  Oqsil 

miqdori  kalibrovka  egri  chizig‗i  bo‗yicha  aniqlandi  (standart  sifatida  ho‗kizning 

sivorotkali albumini ishlatildi).