O`zbekiston respublikasi sog`liqni saqlash vazirligi

 
(Gruss-
Xardi (benzonal uchun) )
Biologik ob’ekt nordonlashtirilgan suv (xlorid kislota pH= 2,0-3,0) qo‘shilib, aralashtiriladi.
50gr ammoniy sulfat va 200 ml xloroform va etil spirti aralashmasi qo‘shib, ikki soatga 
qoldiriladi va filtrlanadi. Filtrat ajratgich voronkaga o‘tkazilib, qavat hosil bo‘lguncha 
qoldiriladi. Suvli qatlam tashlab yuboriladi. Organik qatlam ajratib bug‘latiladi. Qoldiqqa issiq 
suv qo‘shib, filtrlanadi va sovutiladi. 
Xloroform bilan 3 qayta ekstraksiyalanadi. Xloroformli eritma pH=7,4 bo‘lgan fosfatli bufer 
bilan yuviladi. Xloroformli qatlamdan benzonal va uning metaboliti fenobarbital, buferli 
qatlamdan esa benzoy kislotasi tekshiriladi.
Barbituratlarni xromatografik tahlil usullari. 
1.
 
YUpqa qatlam xromatografik aniqlash:
 
q
o‘zg‘aluvchi faza xloroform-n.butanol-ammiak 
(70:40:5). Aniqlovchi reaktivlar: 0,02% difenilkarbozonning xloroformli eritmasi va simob 
sulfatni suvli eritmasi purkalganda barbituratlar o‘ziga xos Rf qiymatga ega bo‘lgan ko‘k-
binafsha rangli dog‘ hosil qiladi. Barbituratlarning xususiy reaksiyalari asosan turli reaktivlar 
bilan mikrokristallar hosil qilishi va ularni aniqlashga asoslangan.
Gaz xromatografik tahlili:
Tahlil sharoiti: 
kolonka: 
uzunligi 2 m, ichki diametri 2-4 mm bo‘lgan shisha kolonka ichi 3% SE-30 xromosorb 
G-HP bilan to‘ldirilgan. 
qo‘zg‘aluvchi faza
– vodorod, tezligi 45-50 ml/daq;
Kolonka harorati
- 190-200 
0
C
Injektor harorati
- 220 
0
C 
Detektor harorati
- 220 
0
C 
 
3.YUqori samarali suyuqlik xromatografiyasi:
Tahlil sharoiti: 
kolonka: 
uzunligi 150 mm, ichki diametri 2,6 mm bo‘lgan, sorbent-oktadesil slikagal bilan 
to‘ldirilgan. 
Mobil faza
– 0,1 M fosfat buferi, pH= 3,5- metanol (60:40)

---

62 
Detektor
– UB - 216 nm
Faza harakati -
2 ml/daq
 
Injektor yuboriladigan modda miqdori – 
20 mkl