Oqsillar sinflanishi. Reja

Marker oqsilining eritmasi yaxshi dissotsiyalanishi uchun 1 minut davomida qaynab turgan suv hammomida isitiladi. Har bir naychaga 10-20 mkl dan oqsil eritmasi solinadi va platinali elektrodlar yordamida asbob o’zgarmas tok manbaiga ulanadi. Elektroforez maromi har bir naychaga 2 mA, hammasi 2x4=8 A, yoki gelning 1 sm balandligiga 8V kuchlanishda 2-3 soat davomida boradi. Shunday so’ng, reper bo’yog’i naychadagi PAAG ning oxiriga yetishi bilan tok uziladi, gelshprits yordamida naychadan olinadi va oqsillar 25% TXU, 40% motanol, 10% sirka kislota tutgan aralashmada 30 minut davomida cho’ktiriladi. Tolalarni bo’yash kumassi eritmasida yoki qoraamidda uy haroratida 2 soat davomida (yoki 600С-da 30 minut) olib boriladi, aralashmadagi ortiqcha bo’yoqni izo-propanol-sirka kislota – suv bilan (rangi o’chguncha bir necha marotaba) yuviladi. Oqsillarning joylashishiko’k(binafsha-ko’k) bo’lib chiqadi. Elektroforegrammalar ish jurnaliga chiziladi, har bir oqsilning siljishi mmda o’lchanadi, natijalarni jadvalga yoziladi:

• Marker oqsilining eritmasi yaxshi dissotsiyalanishi uchun 1 minut davomida qaynab turgan suv hammomida isitiladi. Har bir naychaga 10-20 mkl dan oqsil eritmasi solinadi va platinali elektrodlar yordamida asbob o’zgarmas tok manbaiga ulanadi. Elektroforez maromi har bir naychaga 2 mA, hammasi 2x4=8 A, yoki gelning 1 sm balandligiga 8V kuchlanishda 2-3 soat davomida boradi. Shunday so’ng, reper bo’yog’i naychadagi PAAG ning oxiriga yetishi bilan tok uziladi, gelshprits yordamida naychadan olinadi va oqsillar 25% TXU, 40% motanol, 10% sirka kislota tutgan aralashmada 30 minut davomida cho’ktiriladi. Tolalarni bo’yash kumassi eritmasida yoki qoraamidda uy haroratida 2 soat davomida (yoki 600С-da 30 minut) olib boriladi, aralashmadagi ortiqcha bo’yoqni izo-propanol-sirka kislota – suv bilan (rangi o’chguncha bir necha marotaba) yuviladi. Oqsillarning joylashishiko’k(binafsha-ko’k) bo’lib chiqadi. Elektroforegrammalar ish jurnaliga chiziladi, har bir oqsilning siljishi mmda o’lchanadi, natijalarni jadvalga yoziladi:
• Oqsilning siljishi reper bo’yog’iga nisbatan yoki R1 ko’proq bo’lgan oqsilga solishtirib aniqlanadi. Jadvaldagi ma‘lumotlarga qarab 1gM ning R1 ga bog’liqligi grafigi tuziladi va OV ning Mg aniqlanadi.
• Elektroforez ketayotgan paytda OV ning termokoagulyatsiya Т0 sini aniqlashga kirishiladi. Buning uchun uchta eritma tayyorlanadi (5 mg/ml=0,5%). Birinchi – suvda yoki fiziologik eritmada, ikkinchi eritma –2%-li DDS-Na da, uchinchi –8 M mochevinada va tagi kavsharlngan naychaga 0,5 ml dan oqsil eritmasi solib qo’yilish darajasi aniqlanadi, loyqalanish boshlanishi harorati va zich qavat hosil bo’lishi harorati belgilanadi.