a
v
i
r
a
l
o
z
a
a
li
O
r
a
l
s
u
r
i
v
i
h
c
v
o
l
q
a
s
K
N
D
r
a
l
s
u
r
i
v
s
k
o
P
o
n
e
d
A
s
u
r
i
v
r
a
l
s
e
p
r
e
G
r
a
l
s
u
r
i
v
i
s
u
r
i
v
k
a
h
c
e
h
c
n
i
h
C
i
s
u
r
i
v
k
a
h
c
e
h
c
n
i
h
C
)
ð
it
o
r
e
s
4
3
(
i
s
u
r
i
v
o
n
e
d
a
m
a
d
O
i
s
u
r
i
v
s
e
p
r
e
g
y
i
d
d
O
i
s
u
r
i
v
k
a
h
c
e
h
c
v
u
S
i
h
c
v
o
l
q
a
s
K
Í
Ð
r
a
l
s
u
r
i
v
a
n
r
o
k
i
P
r
a
l
s
u
r
i
v
a
g
o
T
r
a
l
s
u
r
i
v
o
s
k
i
m
o
t
p
O
r
a
l
s
u
r
i
v
o
s
k
i
m
a
r
a
P
r
a
l
s
u
r
i
v
o
d
b
a
R
r
a
l
s
u
r
i
v
:i
s
u
r
i
v
ti
l
e
y
i
m
o
il
o
P
i
r
a
l
s
u
r
i
v
O
H
S
E
a
v
i
k
a
s
k
o
K
i
s
u
r
i
v
it
il
a
f
e
s
n
e
a
n
a
K
i
s
u
r
i
v
a
m
ti
s
i
q
i
r
a
S
i
s
u
r
i
v
i
s
a
m
ti
s
i
k
i
g
a
r
r
o
m
e
g
k
s
m
O
i
s
u
r
i
v
p
ð
i
r
G
-
r
a
l
a
q
h
s
o
b
a
v
q
i
m
a
z
i
q
,i
k
p
e
t
,
p
ð
i
r
g
a
r
a
P
i
r
a
l
s
u
r
i
v
g
n
i
n
i
s
u
r
i
v
h
s
i
r
u
t
u
Q
n
a
g
i
d
y
a
m
n
a
l
a
y
i
s
t
a
k
if
i
s
s
a
l
K
r
a
l
s
u
r
i
v
ti
t
a
p
e
G
i
s
u
r
i
v
314
viruslar peplos deb nomlanuvchi qobiqdan iborat. Bu qobiq viruslarni
xojayini hujayrasidan ajralib chiqqanida hosil boladi. Virus kapsidi
xojayini hujayrasining sitoplazmatik membranasi ichki qavatida oralib,
bitta yoki bir nechta super kapsid qobigini hosil qiladi. Bunday
qobiqni faqat ayrim viruslar, masalan, quturish, gerpes, ensefalit virus-
larigina saqlaydi. Bu qobiq fosfoliðidlar saqlaydi va ular efir tasirida
parchalanadi.
Ayrim viruslarning tashqi yogli qavatidan tikanga oxshash
kapsomerlar chiqib turadi (bu tikanlar otmas) va ularni peplomerlar
(masalan, griðp virusi) deyiladi. Nuklein kislotasi nasl belgilarini
uzatuvchi bolib hisoblanadi, kapsid va tashqi qobiq esa himoya
funksiyasini bajaradi. Bundan tashqari, ular virusning hujayra ichiga
kirishiga yordam beradi.
Viruslarning olchami. Viruslar nanometrlarda olchanadi. Ularning
olchami 1520 dan 350400 nm.gacha boradi.
Viruslarning katta-kichikligini olchash usullari: 1) teshiklari malum
bolgan bakteriologik filtrlarda filtrlash usuli; 2) ultrasentrifugalash (yirik
viruslar tez chokadi); 3) elektron mikroskopda suratga olish usuli.
Viruslarning kimyoviy tarkibi. Viruslarda DNK va RNK tuzilishi
va miqdori turlichadir. DNK ning molekular massasi 110
6
dan
1,610
8
gacha, RNK da 210
6
dan 9,010
6
gacha boladi.
Virionlarda oqsillar kam miqdorda bolib, ular 1620 ta amino-
kislotadan tashkil topgan. Kapsid oqsilidan tashqari, nuklein kislotasi
bilan boglanuvchi ichki oqsil ham mavjud. Oqsillar viruslarning
antigenlik xossasini namoyon qiladi. Shuningdek, poliðeptid zanjiri
zich joylashganligi sababli u viruslarni xojayinning hujayra
fermentlaridan himoyalab turadi.
Murakkab virionlarning tashqi qobigida yoglar va uglevodlar
aniqlangan. Yog va uglevod manbai bolib, hujayra qobigi hisoblanadi.
Ayrim viruslar tarkibiga kiruvchi polisaxaridlar eritrotsitlarni aggluti-
natsiyaga uchratish xossasiga egadirlar.
Viruslarning fermentlari. Viruslar ozlarining metabolizmiga (modda
almashinish) ega emas va shuning uchun ham modda almashinuvida
ishtirok etadigan fermentlarga muhtojligi yoq. Lekin ayrim viruslarda
fermentlar borligi aniqlangan bolib, ular viruslarning xojayin
hujayrasiga kirishida yordamlashadi. Masalan, A griðp virusidagi
neraminidaza, hayvon hujayrasi qobigida saqlanadigan neytramin
kislotasini parchalash xossasiga ega. Faglarida hujayra qobigini
parchalovchi lizotsim, fosfataza va boshqa fermentlar aniqlangan.
Virus antigenlarini aniqlash. Virus antigenlarini kasallangan
xojayin hujayrasida immunofluoressensiya usulida aniqlash mumkin.
Bunda viruslar bilan kasallangan xojayin hujayrasiga maxsus immun
315
luminessentlovchi zardob bilan ishlov beriladi. Luminissent mik-
roskop ostida qaralganda hujayraning viruslar toplangan qismida
yoruglik ajralayotgani kuzatiladi. Viruslar turini esa ishlov berilgan
zardobga qarab aniqlanadi.
Viruslarni hujayra bilan ozaro tasiri. Bu jarayon bir necha davrda
kechadi.
I davr. Virus va hujayra retseptorlari hisobiga adsorbsiya jarayoni
boshlanadi. Murakkab virionlarda retseptorlar qobiq yuzasida tikanga
oxshab (griðp virusi), oddiy virionlarda esa kapsid yuzasida joylashgan
boladi.
II davr. Virusni xojayin hujayrasiga kirishi. Bu turli viruslarda turlicha
otadi. Masalan, ayrim faglar ozlarining osimtalari bilan hujayra
qobigini zararlaydi va nuklein kislotasini hujayra ichiga kiritib yuboradi.
Boshqa viruslar xojayin hujayrasiga vakuola yordamida tortilish yoli
bilan kiradi, yani virus kirayotgan joyning hujayra qobigida chuqurcha
hosil boladi. Songra chuqurchaning chetlari birikadi va virus hujayra
ichida qoladi. Bunday tortilish yolini viropeksis deyiladi.
III davr. «Virusni yechintirish» (dezintegratsiya). Nuklein kislotasi
ozini himoya qilib turuvchi oqsil qavatidan (qobiq va kapsid) qutuladi.
Yechinish jarayoni adsorbsiya vaqtida yoki virus hujayra ichiga tushganda
kechishi mumkin.
IV davr. Bu davrda nuklein kislotalarining replikatsiyasi (nusxa
kochirish) va viruslar oqsilining sintezlanishi boshlanadi. Bu davrda
xojayin hujayrasining DNK yoki RNKsi ishtirok etadi.
V davr. Virionni toplash. Bu jarayon viruslarning nuklein kislotasi
atrofida oqsil bolaklarini ozlaricha toplanishi bilan otadi. Oqsillar
sintezi virus nuklein kislotasining sintezidan song bir necha soat yoki
daqiqa oraligida boshlanishi mumkin. Ayrim viruslarda ozlaricha
toplanish sitoplazmada, boshqalarida xojayinning yadro hujayrasida
yuzaga kelishi mumkin. Òashqi qobigi (peplos) doimo sitoplazmada
hosil boladi.
VI davr. Xojayin hujayrasidan virionlar uning qobigi orqali
siqib chiqariladi yoki ular xojayin hujayrasida hosil boladigan teshik
orqali (bu holda xojayin hujayrasi nobud boladi) chiqadi.
Virus va hujayraning ozaro tasir turlari
Birinchi turi samarali infeksiya xojayin hujayrasida virion-
larning yangidan hosil bolishi bilan tavsiflanadi. Ikkinchi turi
abortiv infeksiya nuklein kislotasi replikatsiyasining uzilishi bilan
kechadi. Uchinchi turi xojayin hujayrasida DNK nuklein kislota-
sining yaratilishi bilan tavsiflanadi. Bunda xojayin hujayrasi va virusning
316
birgalikda yashash shakli (virogeniya) yuzaga keladi. Bunday holda
virus va hujayra DNK replikatsiyasining sinxronligi taminlanadi. Faglarda
esa bu jarayon lizogeniya deb yuritiladi.
Mikroskopik tekshirish. Ayrim virusli infeksiyalarda organizm hujayra
sitoplazmasi yoki yadrosida maxsus hujayra ichidagi tanachalar, yani
kiritmalar (quturishda BabeshNegri, chechakda Gvarniyer tanacha-
lari) kuzatiladi va bu hol diagnostikada katta ahamiyatga ega. Virus
bolaklari va tanacha kiritmalarni suniy ravishda, maxsus usullarda
ishlov berish yordamida kattalashtirib mikroskop immersion sistemasida
organiladi. Mayda virionlar esa elektron mikroskop ostida kuzatiladi.
Hujayra ichidagi kiritmalar haqida turlicha nuqtayi nazarlar mavjud.
Ayrim olimlar ularni viruslarning toplanishi natijasi desalar, boshqalari
virusni hujayra ichiga kirishi natijasida hosil bolgan reaksiya natijasidir,
deb hisoblaydilar.
Viruslarning chidamliligi. Kopgina viruslar yuqori harorat tasirida
parchalanadi. Lekin, ayrim viruslar, masalan, gepatit virusi yuqori
haroratga chidamlidir.
Past haroratga viruslar sezuvchan emas. Quyoshning ultrabinafsha
nurlari viruslarga parchalovchi tasir korsatadi. Quyoshning tarqoq
nurlari esa ularga kamroq tasir korsatadi. Viruslar glitseringa chidamli
bolib, bu ularni glitserinda uzoq vaqt saqlanishiga imkon yaratadi. Ular
antibiotikka chidamli (viruslarni kultivatsiya qilishda ularni qoshimcha
mikrofloradan ozod qilish uchun antibiotiklar bilan ishlov beriladi).
Ishqor, kislota va dezinfeksiyalovchi moddalar viruslarga halokatli
tasir korsatadi. Lekin ayrim viruslar formalin tasirida parchalansa
ham immunogenlik xossasini saqlab qoladi. Bu vaziyat vaksinalar olishda
formalindan foydalanishga imkon beradi (quturishga qarshi vaksina).
Patogenligi. Ayrim viruslarga sezuvchan hayvonlar katta doirani
tashkil etadi. Masalan, quturish virusiga kop hayvonlar sezuvchan
boladi. Ayrim viruslar esa faqat bitta tur hayvonni zararlaydi. Masalan,
it toun virusi faqat itlarni zararlaydi. Shunday viruslar borki, hayvonlar
ularga umuman sezuvchan emas (masalan, qizamiq virusi).
Viruslarning tashqi muhitga chiqishi va tarqalishi
Bemor organizmidan poliomiyelit virusi va boshqa enteroviruslar
najas bilan, quturish virusi solak bilan, griðp virusi va boshqalar
nafas shilliq pardalari orqali tashqariga chiqadi. Viruslar havo-tomchi
(griðp, chechak), alimentar (gepatit, poliomiyelit), bilvosita kontakt
(quturish), transmissiv (ensefalit) yollar bilan tarqaladi.
Viruslarni undirish usullari. Viruslar faqat toqimalarda osadi.
Ular tovuq embrionida, kultura toqimalarida, sezuvchan hayvon
organizmida, bogimoyoqlilar organizmida ostiriladi.
317
Viruslarni organishning dastlabki davrida olimlar hayvonlarga
yuqtirib kuzatishgan. Lekin bu usul juda murakkab bolib, kopgina
viruslarga esa hayvonlar sezuvchan ham emas edi. Virusologiya
rivojlanishida ularni tovuq embrionida, odam va hayvon kultura
toqimalarida ostirish katta natijalar berdi.
Òovuq embrionini zararlash. Viruslar bilan zararlash uchun 712
kunlik tovuq embrioni olinadi va u 37°C li termostatda qoldiriladi.
Havodagi namlik yetarli bolishi uchun esa termostatga idishda suv
quyiladi.
Òovuq embrionining tajribaga yaroqliligi embrionning harakat-
lanishi va xorion-allantois qobigidagi qon tomirlarining korinishiga
qarab aniqlanadi. Buning uchun ovoskopdan foydalaniladi.
Òovuq embrionining quyidagi qatlamlariga zararli materiallar
yuboriladi:
1) xorion allantois qobigiga;
2) allantois boshligiga;
3) amniotik boshligiga;
4) sariqlik qopchasiga.
Òovuq embrionini zararlash bokslarda, steril sharoitda, steril
asboblar yordamida olib boriladi. Ishni boshlashdan avval tovuq
embrioni ikki marta spirtga namlangan paxta bilan artib yuborilishi
lozim.
Xorionallantois qobigini zararlash. Òuxum spirt bilan zararsiz-
lantirilgandan song uning tomtoq qismini postlogi, songra postloq
ostidagi parda olinadi va shunda xorionallantois qobigi korinadi.
Zararli materialdan steril shpris yoki piðetka yordamida 0,10,2 ml
olib, xorionallantois qobigiga yuboriladi. Song tuxum postlogi
yana yopilib, ustidan eritilgan parafin quyiladi.
Òuxumning boshqa butun joyiga unga qanday zararli material
yuborilganligi oddiy qalamda yoziladi.
Amniotik boshligini zararlash. Òuxum ovoskopga qoyilib, uning
yon tomonidan qon tomirlari kam bolgan xorionallantois qavati
qatlam bilan belgilab olinadi. Òuxum gorizontal holatda zararsiz-
lantiriladi. Maxsus steril nayza bilan uning posti 23 mm chuqurlikda
teshiladi va shu teshik orqali steril shpris yordamida zararli material
amniotik boshligiga yuboriladi. Yuborilayotgan suyuqlik toshib
ketmasligi uchun tuxumni havo qopi tomonidan teshib qoyish lozim.
Zararli material yuborilgandan song har ikki teshik parafin bilan
bekitiladi.
Allantois boshligiga yuborish. Zararlash qorongilashtirilgan
boksda olib boriladi. Òuxumning havo qatlami belgilab olinadi va
zararsizlantiriladi. Songra uning postidan boshliq ochib, steril shprisda
318
zararli material embrion tomon harakatlantiriladi. Agarda igna allan-
tois boshligiga yetgan bolsa, embrion soyasi oz joyini ozgartiradi.
Zararli material yuborilgandan song teshik parafin bilan bekitiladi.
Virusning biologik xossasiga qarab zararlangan tuxumni saqlash
vaqti va harorati belgilanadi. Zararlangan tuxumni har kuni ovoskopga
qoyib, embrionning tirikligi tekshiriladi. Embrion birinchi kuniyoq
nobud bolsa, u zararli material yuborilayotganda shikastlangan, degan
xulosaga kelinadi. Bunday tuxumlar tajribadan chetlashtiriladi.
Embrionning har bir qatlamini organish talab qilinadi. Buning
uchun material malum tartibda toplanadi. Dastlab allantois suyuqligi,
songra amniotik suyuqligi piðetkada sorib olinadi, xorion allantois
qobigi, amniotik qobigi, embrion sariqlik qopchasi va shundan song
xorion allantois qobigi ajratiladi. Xorion allantois qobigidagi ozga-
rishlarning tavsifiga qarab zararlangan embrionda virus borligi
aniqlanadi.
Gemagglutinatsiya aktivligiga ega bolmagan viruslar komplement
boglanish reaksiyasi yordamida aniqlaniladi. Allantois yoki amniotik
suyuqlikda virusni aniqlash uchun gemagglutinatsiya reaksiyasi qoyi-
ladi.
Kultura toqimalarida undirish usuli
Sezgir toqima kulturalarida viruslarni undirish uchun odam va
turli xil hayvonlar toqimalaridan foydalaniladi. Birlamchi triðsinlan-
gan bir qatlamli kulturalar va organizmda qaytadan ishlangan toqi-
malar yuborish amaliyotda keng qollaniladi.
Bir qatlamli kultura toqimalar yassi shisha matraslarda undiriladi.
Suyuq oziqa muhitning toqima suspenziyalari 37°C haroratda malum
gistologik tuzilishga ega bolgan «In vitro» toqima qatlamlari ozga-
rishiga (degeneratsiyaga) qarab viruslarning bor-yoqligi aniqlanadi.
Virus saqlovchi materialni unga mos bolgan malum turdagi zardobni
qoshib, viruslarni neytrallanishiga qarab aniqlash mumkin.
Bu usullar tekshirish natijalarini tezroq olishga yordam beradi va
ancha tejamli hisoblanadi. Agar viruslar sitopatologik ozgarishlar
keltirib chiqarmasa yoki tovuq embrionida osmasa, bunday hollarda
laboratoriya hayvonlarini zararlash usulidan foydalaniladi.
Viruslarni undirish uchun qayta ishlangan toqimalardan
foydalaniladi. Bu toqimalar xavfli osmalardan olinadi. Bir qatlamli
toqimalar odam, tovuq, hayvon embrionlaridan olinadi. Bir qatlamli
toqimalar ularda viruslar undirish usulining oddiyligi va natijani
osongina oqilishi bilan ustun turadi.
319
Òoqimalarning organizmdan tashqarida rivojlanish qobiliyati
ularning differensiyalanish darajasiga bogliq. Kamroq differensiyalangan
toqimalar katta proliferatsiya (toqima elementlarining kopayishi)
qobiliyatiga ega (masalan, biriktiruvchi, epitelial toqimalar).
Birlamchi kultura toqimalarini tayyorlash usulining mohiyati
hujayralararo toqimalarni parchalash va ularni ajratib bir qatlamli
toqimalar hosil qilishdan iborat.
Òoqimalarni ajratish, asosan, ularga proteolitik fermentlardan
triðsinni tasir ettirish yoli bilan olib boriladi. Òriðsin eritmasi hujay-
ralarni bolinib, kopayish xususiyatini saqlab qolgan holda, ularni
ajralishini taminlaydi. Òoqimalar kulturasini ostirish uchun malum
oziqa muhitlar kerak. Oziqa muhitlar tarkibi juda murakkab bolib,
qator ingrediyentlar (aminokislota, glukoza, vitamin, mineral tuzlar,
kofermentlar va b.)ni oz ichiga oladi. Òoqimalar kulturasi aseptik
sharoitda olinadi. Bakterial florani oldirish uchun oziqa muhitlariga
antibiotiklar (1 ml oziqa muhitiga 500 birlik penitsillin va 250 birlik
streptomitsin) qoshiladi. Òayyorlangan toqimalarga 0,25 % li isitilgan
triðsin eritmasi quyiladi va termostatda 37°C ga qoldiriladi. Òoqima
ostirilayotgan davrda kolbani vaqt-vaqti bilan aylantirib turiladi.
Òriðsinlangan toqimalar 5 daqiqa davomida 8001000 aylanma
tezlikda sentrifuga qilinadi.
Òoqimalarni jarohatlamaslik uchun triðsinlash va sentrifugalashni
juda ehtiyotlik bilan olib borish lozim. Sentrifuga qilingandan song
chokma ustidagi suyuqlik tokiladi, chokmasi esa oziqa muhitiga
joylashtiriladi. Bir xil toqima aralashmasi hosil bolishi uchun chokma
bir qavatli steril dokali voronka orqali filtrlanadi. Òoqima aralashmasini
sterillikka tekshirish uchun 0,1 ml.dan olib, ikkita probirkadagi shakarli
shorvaga ekiladi.
Òoqimalar kulturasini yaxshi osishi ekilayotgan toqimalarning
miqdoriga bogliq. Shu sababli triðsinlangandan keyin Goryayev
kamerasidagi toqimalar hisoblanadi. Òoqima aralashmasi bolingan-
dan song 1 ml.da 5000001000000 ta toqima nisbatida oziqa muhitida
suyultiriladi va probirkalarga hamda matraslarga quyiladi. Òoqima
kulturasi bolgan probirkalar termostatda qiyshaytirilgan holda
qoldiriladi.
Ekilgan kulturalar osayotganligini bilish uchun ular har kuni
mikroskopning kichik obyektivida organib turiladi. Normal prolife-
ratsiyalangan hujayralar yorug va bir qatlamli bolib osadi. Agar
hujayralar qorongi, donador va proliferatsiyalangan bolmasa, muhit
ifloslanganligidan (idishlar yaxshi tozalanmagan yoki ingrediyentlar
iflosligidan) dalolat beradi. Bunday kulturalar tajribadan chetlash-
tiriladi.
320
Oziqa muhitlar kultura ekilgandan song 23 kunda almashtirib
turiladi, bu proliferatsiya kuchini yaxshilaydi. Normal, yaxshi prolife-
ratsiyalangan hujayralargina tekshirilayotgan material bilan zararlanadi.
Qayta ishlangan kulturalar xavfli osmalardan olinadi. Hela shtammi
Helena ismli ayolning bachadon boyin rakidan (1950-yil), Her2
shtammi yutqin rakidan olingan. Bu hujayralar laboratoriya sharoitida
ketma-ket ekish yoli bilan ostiriladi. Ularning oziga xosligi shundan
iboratki, hujayralar uzoq vaqt davomida bolinib kopayadi. Hozirgi
vaqtda bu hujayralar minglab (generatsiyadan) avloddan almashib
otgan. Ekish jarayonida ular ayrim morfologik va biokimyoviy
xossalarini yoqotadi, yani mutatsiyaga uchraydi. Shunday bolsa ham,
ular viruslarni oldirish qobiliyatiga egadirlar. Bunday toqima
kulturalaridan butun dunyo laboratoriyalarida foydalaniladi. Òoqima
kulturalarida viruslarning bolinib kopayish muddati ularning oz
xossalariga va toqima turiga bogliqdir.
Viruslarning borligi toqimalarning sitopatologik tasiriga qarab
baholanadi. Mikroskop ostida qaralganda hujayralarda ozgarishlar
kuzatiladi. Virusning xossasi va miqdoriga qarab, toqimaning
sitopatologik tasiri va faoliyati ozgaradi. Ayrim viruslarda sitopatologik
tasiri bir necha kundan keyin (chechak virusida), ayrimlarida 12
haftada (gepatit virusi va b.) korinadi.
Hozirgacha odamni jarohatlovchi yuzlab viruslar aniqlangan.
Virusli infeksiyalarga qarshi kurashish bir necha usullarda olib boriladi.
Emlash eng yaxshi usul hisoblanadi. Emlash yordamida chechak
batamom yoqotilgan. Poliomiyelit kasalligi esa keskin kamaygan. Virusli
infeksiyalarga qarshi kurashda umumiy profilaktika daydi itlarni
yoqotish (quturishda), shaxsiy va umumiy gigiyena qoidalariga rioya
qilish va boshqalar katta ahamiyatga ega.
Lekin bu tadbirlarning hammasi ham virusli kasalliklarni toliq
yoqota olmaydi. Hozirgi vaqtda olimlar hujayrani jarohatlamagan
holda viruslarni yoqotish yollarini izlashmoqda.
Asosiy tekshirish usullari
1. Gemagglutinatsiya reaksiyasi, bevosita gemagglutinatsiya reak-
siyasi, komplement boglanish reaksiyasi.
2. Immunofluoressensiya usuli.
3. Òoqima kulturalarida viruslarni neytrallash reaksiyasi.
4. Gistologik usul kiritmalar (quturishda BabeshNegri kirit-
masi, chechakda Pashshen tanachalari va b.) aniqlanadi.
5. Biologik usul.
321
42-bob.
RNK SAQLOVCHI VIRUSLAR
Griðp qozgatuvchisi
Griðp nafas yolining keng tarqalgan otkir yuqumli kasalligi bolib,
u epidemiologik xarakterga ega va kopgina odamlarni shikastlantiradi.
XX asr boshlarida M.I. Afanasyev va P.B. Vaks kasallik virus
tabiatli ekanligini aytib otishgan. 1903-yili C. Smits, K. Endryus va
P. Leydlou bemorlardan ajratib olingan griðp virusining turini
Do'stlaringiz bilan baham: |