Method · March 2008 doi: 10. 13140/RG

8. Гексамидин ва унинг метаболити фенобарбитални нжори самарали
суюклик хроматографияси усулида текш ирув шароитлари
ЮССХ текширувни амалга оширишда Agilent Technologies фирмасида ишлаб 
чикарилган “Agilent 1100 series ' русумли юкори самарали суюклик хроматографида 
олиб борилди.
• хроматографик шиша колонка заррачалар йириклиги 3,5 мкм булган Zorbax 
Eclipse XDB С - 18 сорбент билан тулдирилган, ^лчами 150 х 3 мм;
• кузгалувчи фаза; ацетонитрил - сув ( 20 ; 80 )
• кузгалувчи фаза сарфи 0,75 мл/дак;
• детектор УБ-спектрометр;
• текшириш учун намуна х.ажми 20 мкл;
• детекторлаш тулкин узунлиги 258 нм.
• текширув давомийлиги Ю дакика.
Ушбу шароитларда гексамидинни ушланиш вакти 2,64 дакикани, сезгирлиги 
0,25 мкг, фенобарбиталнинг ушланиш вакти эса 7,41 дакикани ва сезгирлиги 0,1 мкг 
ташкил килиши аникланди. Биологик ашё таркибидан ажратиб олинган ва ёт 
моддалардан тозаланган намуна эритмасини ЮССХ усулида текш ируви амалга

---

ош ирилганда ишчи стандарт модданинг ушланиш вакти билан бир хил натижа 
бериши кузатилди.
Гексамидин ва фенобарбиталнинг ЮССХ усулида микдорий аниклаш аник 
концентрацияли стандарт намуна эритмалари асосида тузилган калибрлаш чизмаси 
асосида топилди. Гексамидиннинг калибрлаш чизмасини тузиш учун таркибида
0,0125мкг/мл дан 1,25 мкг/мл гача микдорда гексамидин моддасини саклаган 
стандарт намуна эритмаларидан фойдаланилди. Стандарт эритмалардан 20 мкл 
хажмда хром атоф аф колонкасига юкоридаги шароитларда юборилди ва олинган 
хроматографик ч^ккиларнинг курсаткичлари \исобланди. Натижалар асосида 
гексамидин учун концентрациянинг майдон юзасига богликлик калибрлаш чизмаси 
тузилди. С^нгра фенобарбиталнинг калибрлаш чизмасини 0,005 мкг/мл дан 1,00 
мкг/мл гача микдорда фенобарбитал моддасини саклаган стандарт намуна 
эритмаларидан фойдаланилиб калибрлаш чизмаси тузилди ва текширув амалга 
оширилди. 
Тажрибалар 
натижаси 
асосида 
усулнинг 
гексамидин 
учун 
аниклашларнинг чизикли диапазони 0,25-25 мкг ни, фенобарбитал учун 0,1-20 мкг 
ни ташкил килди.
Биологик ашё таркибидаги гексамидин ва фенобарбитал микдори куйидаги 
формула асосида хисоблаб топилади.
S * А ст* V * 100 * 100
X = ----------------------------------------
SCT- A* VCT* К
S - аникланувчи намунани чукки юзаси;
SCT - стандарт намунани чукки юзаси;
А ст — стандарт намунанинг огирлиги;
А -а н и к л а н у в ч и намунанинг огирлиги;
V ст - стандарт намуна эритмаси х>ажми;
V - аникланувчи намуна эритмаси х,ажми;
К - биологик ашё таркибидан ажралиб чикувчи модда
микдори (гексамидин 47,3%, фенобарбитал 52,1%).
Гексамидин ва унинг метаболити фенобарбитални аниклашда ГХ-МС ва 
ЮССХ усулларида аниклашнинг теки1ирув ш ароитлари ишлаб чикилди хдмда турли 
биологик ашёлар таркибидан ажратиб олинган гексамидин ва унинг метаболити 
фенобарбитални аниклаш мумкинлиги урганилди.
Шу билан бир каторда фенобарбитал билан хдм захдрланиш х.олатлари 
кузатилганда ю корида келтирилган шароитларда уни биологик ашёлардан ажратиб 
олиб, сунгра ГХ-МС ва ЮССХ усулларида текширувни амалга ошириш мумкин.
Узбекистан Республикаси ССВ 
суд - тиббий экспертиза Бош 
бюроси бошлиги, профессор

---