Mavzu: nuklein kislotalarni elektrofarez usulda bo`yash reja

ELEKTROFOREZ USULI HAQIDA MA`LUMOT

Elektroforez usuli Bu usul bo‘yicha oqsillar elektr maydonida har xil harakatlanish tezligiga asoslanib fraksiyalarga bo‘linadi. Filtr qog‘ozida o‘tkaziladigan elektroforez usuli yordamida inson qon zardobidagi oqsillarni
fraksiyaga ajratish mumkin. Qog‘ozda o‘tkaziladigan elektroforezdan tashqari hozirgi vaqtda kraxmal geli, poliakrilamid va sellyulozada oqsillarni elektroforez yordamida fraksiyalarga bo‘lish va ajratish mumkin. Filtr qog‘ozi o‘rniga yuqorida ko‘rsatilgan moddalar elektroforezda ishlatilganda qon zardobi oqsillarini ko‘proq fraksiyalarga ajratish mumkin. Masalan: kraxmal gelida 10 ta, poliakrilamid gelida 18 ta oqsil fraksiyalarini olish mumkin. Elektroforez yordamida ajratilgan oqsilni aniqlash uchun qog‘oz va gellar bromfenol yoki 10 V amid qora bo‘yog‘i bilan va boshqa oqsil bilan rang beruvchi reaktivlar bilan ishlanadi.
Elektroforez - bu nisbatan bir xil elektr maydon doirasidagi jel yoki suyuqlikdagi zarralarning harakatini tavsiflash uchun ishlatiladigan atama. Elektroforezdan zaryad, o'lcham va bog'lanish yaqinligiga qarab molekulalarni ajratish uchun foydalanish mumkin. Texnika asosan DNK, RNK, oqsillar, nuklein kislotalar, plazmidalar va shu makromolekulalarning bo'laklari kabi biomolekulalarni ajratish va tahlil qilish uchun qo'llaniladi. Elektroforez - otalikni aniqlash va sud ekspertizasida bo'lgani kabi, manba DNKni aniqlashda qo'llaniladigan usullardan biridir
Anionlar yoki manfiy zaryadlangan zarrachalarning elektroforezi deyiladi anaforez. Kationlarning yoki musbat zaryadlangan zarralarning elektroforezi deyiladi kataforez
. Elektroforez birinchi marta 1807 yilda Moskva davlat universiteti xodimi Ferdinand Frederik Reuss tomonidan kuzatilgan bo'lib, u doimiy elektr maydoniga duch kelgan suvda loy zarralari ko'chib ketganini payqagan.
Elektroforezda zarrachaning qanchalik tez va qanday yo'nalishda harakatlanishini boshqaradigan ikkita asosiy omil mavjud. Birinchidan, namunadagi to'lov muhim ahamiyatga ega. Salbiy zaryadlangan turlar elektr maydonining ijobiy qutbiga, musbat zaryadlangan turlar esa salbiy uchiga jalb qilinadi. Maydon etarlicha kuchli bo'lsa, neytral tur ionlashtirilishi mumkin. Aks holda, bu ta'sirga moyil emas. Boshqa omil zarracha kattaligi. Kichik ionlar va molekulalar jel yoki suyuqlik orqali kattaroqlariga qaraganda ancha tez harakatlanishi mumkin.
Elektr maydonida zaryadlangan zarracha qarama-qarshi zaryadga tortilsa, molekula qanday harakatlanishiga ta'sir qiluvchi boshqa kuchlar mavjud. Ishqalanish va elektrostatik kechikish kuchi suyuqlik yoki jel orqali zarrachalarning rivojlanishini sekinlashtiradi. Jel elektroforezida, jel matritsasining gözenek hajmini aniqlash uchun jel kontsentratsiyasini nazorat qilish mumkin, bu esa harakatchanlikka ta'sir qiladi. Suyuq tampon ham mavjud bo'lib, u atrof-muhit pH qiymatini boshqaradi.
Suyuqlik yoki jel orqali molekulalarni tortib olganda, vosita qiziydi. Bu molekulalarni denatatsiya qilishi va harakat tezligiga ta'sir qilishi mumkin. Kuchlanish molekulalarni ajratish uchun zarur bo'lgan vaqtni minimallashtirishga, shu bilan birga yaxshi ajratishni va kimyoviy turlarni saqlab turishga harakat qilish uchun boshqariladi. Ba'zida elektroforez issiqlikni qoplash uchun muzlatgichda amalga oshiriladi.