Mavzu: Molekulyar biologiyaning metodlari Reja

G'arbiy blotting
Yilda g'arbiy blotting, deb nomlangan texnikada oqsillar avval ikkita shisha plastinka orasiga qo'yilgan ingichka gelda kattaligi bo'yicha ajratiladi SDS-PAGE. Keyin jeldagi oqsillar a ga o'tkaziladi poliviniliden ftorid (PVDF), nitroselüloz, neylon yoki boshqa qo'llab-quvvatlovchi membrana. Ushbu membranani keyin eritmalar bilan tekshirish mumkin antikorlar. Qiziqish oqsiliga maxsus bog'langan antikorlar keyinchalik turli xil texnikalar, shu jumladan rangli mahsulotlar, ingl. xemilyuminesans, yoki avtoradiografiya. Ko'pincha antikorlar fermentlar bilan belgilanadi. Qachon kimyoviy nurlanish substrat ga ta'sir qiladi ferment bu aniqlashga imkon beradi. Western blotting metodlaridan foydalanish nafaqat aniqlashga, balki miqdoriy tahlilga ham imkon beradi. G'arbiy blotatsiyaning o'xshash usullari jonli tarkibidagi maxsus oqsillarni bevosita bo'yash uchun ishlatilishi mumkin hujayralar yoki to'qima bo'limlar.^[24][25]
Sharqiy blotting
The sharqiy blotting aniqlash uchun texnikadan foydalaniladi tarjimadan keyingi modifikatsiya oqsillar. PVDF yoki nitroselüloz membranasida oqsillar ma'lum substratlar yordamida modifikatsiyaga tekshiriladi.^[26]
Mikroarralar
Media-ni ijro etish
DNK mikroarrayasi bosib chiqarilmoqda

Maqsadni tekshirish uchun gibridlash
A DNK mikroarray kabi mustahkam tayanchga biriktirilgan dog'lar to'plamidir mikroskop slayd bu erda har bir dog'da bir yoki bir nechta bitta zanjirli DNK mavjud oligonukleotid parchalar. Massivlar bitta slaydga juda ko'p miqdordagi juda kichik (diametri 100 mikrometr) dog'larni tushirishga imkon beradi. Har bir dog'da DNK fragmenti molekulasi mavjud bo'lib, u bittasini to'ldiradi DNK ketma-ketligi. Ushbu texnikaning o'zgarishi quyidagilarga imkon beradi gen ekspressioni rivojlanishning ma'lum bir bosqichida organizmning malakaga ega bo'lishi (ifodani profillashtirish). Ushbu texnikada to'qimadagi RNK ajratib olinadi va markalanganga aylanadi bir-birini to'ldiruvchi DNK (cDNA). Keyinchalik bu cDNA massivdagi bo'laklarga gibridlanadi va gibridlanishni vizualizatsiya qilish mumkin. Parchalarni bir xil pozitsiyada bajarish mumkin bo'lganligi sababli, ular sog'lom va saraton to'qimalari kabi ikki xil to'qimalarning gen ekspresiyasini taqqoslash uchun ayniqsa foydalidir. Shuningdek, qanday genlar ifodalanganligini va vaqt o'tishi bilan yoki boshqa omillar ta'sirida bu ifoda qanday o'zgarishini o'lchash mumkin.Mikroelementlarni yasashning turli xil usullari mavjud; eng keng tarqalgan kremniy chiplari, ~ 100 mikrometr diametrli dog'li mikroskopli slaydlar, odatiy massivlar va g'ovakli membranalarda (makroarralar) kattaroq dog'li massivlar. Berilgan qatorda 100 nuqtadan 10000 gacha bo'lgan joyda bo'lishi mumkin. Massivlarni DNKdan tashqari boshqa molekulalar bilan ham tuzish mumkin.^{[27][28][29][30]}