Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №20
«ПРИГОТОВЛЕНИЕ НАТИВНОГО МАЗКА ИЗ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ, ЕГО ОКРАШИВАНИЕ И МИКРОСКОПИРОВАНИЕ. ПРОСТЕЙШИЕ (ЛЯМБЛИЯ, ТРИХОМОНАДА, КРИПТОСПОРИДИЯ)».
Цель лабораторной работы
- Ознакомить студентов методами диагностики простейших.
Задачи педагога:
- Объяснить важность диагностики инфекционных заболеваний, вызванных простейшими;
- Показать методы диагностики паразитарных инфекционных заболеваний
- Анализировать полученные результаты
Результаты занятий
Студент должен знать:
- информацию об инфекционных заболеваниях человека, вызванных простейшими
- механизм и важность микробиологической диагностики паразитарных заболеваний.
-- анализ полученных результатов
Студент должен уметь:
- брать патологический материал от больных с паразитарными заболеваниями.
- приготовить из них нативный препарат и диагностировать по микроскопии
- анализировать результат и применить их в практической деятельности.


Теоретическая часть.
Методы диагностики паразитарных инвазий. Взятие, хранение и доставка патологического материала в лабораторию.

• 
  Для обнаружения яиц стронгилидов диаррейный материал забирается в течение 1 часов после диареи. Для обнаружения личинок стронгилидов, анкилосмотидов и яиц трихосторнгилидов материал можно собирать в течение 4 часов после диареи
  
• 
  Для обнаружения вегетативных форм дизентерийной амёбы исследуется материал не позднее 20 минут или при сохранении при 0-4С^о в течение 40 минут после сбора диаррейного материала.
  
• 
  При подозрении на Шистосомозу моча забирается между 10:00 и 14:00 часами дня или берётся суточная порция мочи. Лучше собирать мочупосле физической нагрузки (несколько приседаний). Чтобы найти яиц шистосом при легочной форме инвазии мократа обрабатывается 5 % ным раствором гидроксида натрия. Смесь хранится 24 часа, затем ценртифугируется, из осадка готавится мазоки микроскопируют. Если при диагностике кишечного или моче-полового Шистосомозов в материале не обнаруживается возбудитель, то проверяется биоптаты слизистых слоев мочевого пузыря или толстого кишечника. Биоптат до исследования держится 5-10 мин в воде или физ.растворе.
  
• 
  Жидкость, полученный из эхинококкового пузыря, центрифугируют, готовят мазок и микроскопируют для обнаружения его сколексов.
  
• 
  Кровь (2-6 мл) из пальцев или из мочки уха, взятый для исследования на Микрофилярий и обработанный аптикоагулянтом (5%раствор цитрата натирия) центрифугируется. После удаления сыворотки эритроциты из осадка обрабатываются 20% раствором этанола или замораживаются для гемолизирования, готовится мазок, окрашивается и микроскопируют.
  
• 
  Для массовых исследований на амебиаз необходимы стерильные посуды.
  
• 
  Для обнаружения личинок Трихинелл мошки консервируют в концентрированном растворе хлорида натрия.
  
• 
  Для обнаружения живых вегетативных форм простейших (Лямблии) необходимо проводить исследование в течение 5-7 минут после взятия материала, после 5-7 минут вегетативные формы не обнаруживаются. Можно проверять только на цисту.
  
• 
  Ооцисты Криптоспориди хорошо обнаруживаются бактерископией мазков из феклия больного. Для дифференциации ооцист Криптоспориди от других простейших и грибов кандида, необходимо мазок окрасить карболовым фуксином или по Цилю-Нильсону. Ооцисты Криптоспориди окрашиваются в малиновый цвет, округлые 3-5 мм, с видимой оболочкой. Такой вид Ооцисты Криптоспориди отличает их от жировых масс, гранул детрита. Члены микрофлоры окрашиваются в синий цвет.