Лабораторные работы по предмету микробиология, вирусология и иммунология

Рисунок 6. Методы окрашивания: а)простой, b)дифференциальный, с)специальный
Изучение морфологических свойств микроорганизмов.
Приготовление препаратов и изуение его с помощью микроскопа.
Этапы приготовления мазка
1. Приготовление мазка.
2. Высушивание
3. Фиксация
4. Окраска
5. Микроскопия.
Порядок работы.
Техника взятия материала для проверки. Взять бактериологическую петлю и пробирку с культурой. Простерилизовать петлю. После того как петля накалится докрасна, провести конец петледержателя через пламя. Вынуть пробку из пробирки, захватить ее мизинцем правой руки. Обжечь на спиртовке края пробирки. Внося петлю в пробирку, охладить ее, касаясь стенок пробирки. Затем петлей с поверхности среды снять очень небольшое количество культуры. Не касаясь стенок пробирки, вынуть петлю, еще раз обжечь края пробирки над спиртовкой и закрыть ее пробкой. Захваченную петлей культуру внести в приготовленную ранее каплю раствора, хорошо размешать и равномерно распределить по стеклу в виде небольшого круга или овала (1-1,5 см в диаметре). По окончании приготовления мазка вновь простерилнзовать петлю.
Высушивание. Высушивание мазка производится на воздухе. Для ускорения высушивания предметное стекло с мазком, обращенным кверху, подержать в струе теплого воздуха, высоко над пламенем спиртовки, не внося препарат в пламя.
Фиксация мазка над пламенем горелки или спиртовки в течение нескольких секунд мазком вверх. Эту операцию проводят достаточно быстро, стараясь не перегреть мазок так как при перегревании могут произойти необратимые изменения в клетке.Химический метод фиксации - более мягкий по сравнению с фиксацией на пламени. В качестве фиксаторов используют этанол, ацетон, смесь Никифорова (этанол + эфир 1:1), метанол, формалин
Цель фиксации–во время фиксации бактерии хорошо прикрепляются к стеклу, происходит обеззораживание, не вымываются при дальнейших этапах и хорошо окрашиваются. Ошибки при фиксации - при перегревании могут произойти необратимые изменения в клетке
К простым относятся методы с использованием одного вида красителя, к сложным - нескольких красителей.