Laboratoriya mashg‘ulotlari

Kerakli asbob-uskunalar va yordamchi materiallar. 

1.Temir (III) xlorid 

2.Kobalt (II) xlorid 

3. UF-spektr 

4.pH metr 

5.Kolba 

 

Sofradeks quloq va ko„z tomchilari 5 ml li flakonlarda 

Tarkib 

Ingredientlar: 

Standart 

Miqdori (mg/ml) 

Faol ingredientlar: 

Framitsitin sulfat 

Gramitsidin 

Deksametazon 

(metasulfobenzoat natriy 

ko‗rinishida) 

 

VR 

VR 

SP firma 

 

5,0 

0,05 

0,50 

YOrdamchi moddalar: 

Litiy xlorid 

Natriy sitrat 

Limon kislotasining 

monogidrati 

Fenil etilli spirt 

Sanoat metil spirti 95% 

Polisorbat 80 

In‘eksiya uchun suv 

 

SP firma 

VR 

VR 

USP 

BP 

 

BP 

BP 

 

5,00 

0,15 

0,25 

6,00 

0,00116 ml 

 

2,50 

1,00 ml uchun etarli miqdor 

Spetsifikatsiyasi 

Sofradeks quloq va ko„z tomchilari 5 ml li flakonlarda 

Ko‗rsatkichlar: 

Ko‗rinishdagi: 

Tashqi ko‗rinishi 

Tiniq, deyarli rangsiz eritma fenil etil spirtiga 

xarakterli hidga ega 

---

340 

 

CHinligi: 

- gramitsidin 

 

- framitsetin sulfat 

 

- fenil etil spirti 

 

- deksametazon (metasulfobenzoat natriy 

formasidagi deksametazon) TSX 

 

Mos kelishi kerak 

 

Mos kelishi kerak 

 

Mos kelishi kerak 

 

Mos kelishi kerak 

Hajmni to‗ldirish 

5,0 ml dan kam bo‗lmasin 

pH 

4,5 – 5,0 

Miqdoriy tahlil: 

- gramitsidin 

 

 

 

- framitsetin sulfat 

 

- fenil etil spirti 

(YUESX) 

 

 

- 

deksametazon 

(metasulfobenzoat 

natriy formasidagi deksametazon) (YUESX) 

 

0,0050% - 0,0060% (chiqarish paytiga) 

0,0045% - 0,0060% (yaroqlilik muddati 

davomida) 

 

0,45% - 0,6% (670 mkg/mg faolligida) 

 

0,57% - 0,63% (chiqarish paytiga) 

0,45% - 0,65% (yaroqlilik muddati 

davomida) 

 

0,045 – 0,055% 

 

Sterilligi  

Mos kelishi kerak 

Mexanik qo‗shimchalar 

Bo‗lmasligi kerak 

Muzlash nuqtasi 

0,5° S dan  - 0,6° S 

Sofradeks quloq va ko„z tomchilari 5 ml li flakonlarda 

Oxirgi mahsulotning tahlil usullari 

Tashqi ko‗rinishi 

Tiniq, deyarli rangsiz eritma fenil etil spirtiga xarakterli hidga ega. 

Tiniqligi 

Tekshirilayotgan  eritmaning  opalessensiyasi  sandart  dori  moddasining  opalessensian 

oshmasligi kerak. 

Rangliligi 

Tekshirilayotgan  eritmaning  rang  intensivligi  standart  dori  moddasining  rang 

intensivligidan oshmasligi kerak. 

Tiniqligi.  Tekshirilayotgan  eritmani  yangi  tayyorlanagan  40  mm  qatlam  qalinligida 

bo‗lgan  standart  eritma  bilan  solishtiriladi.  Eritmalarni  rangsiz,  tiniq,  neytral  shishali  tekis 

tubli,  va  ichki  diametri  15  dan  25  mm  gacha  bo‗lgan  bir  xil  probirkalarga  solinadi.  5 

---

341 

 

daqiqadan  so‗ng  yangi  tayyorlangan  standart  eritmasini  eritma  bilan  solishtirilish  uchun 

probirkalarni vertikal holatda ushlab, diffuziyali kun yorug‗ligida, qora fonda ko‗riladi. 

Standart  eritmani  tayyorlash:  1,0  g  gidrazin  sulfatini  suvda  eritiladi  va    100,0  ml 

hajmgacha o‗sha erituvchi bilan to‗ldiriladi. 4-6 soatga qoldiriladi. 

25,0  ml  tayyorlangan  eritmaga  2,5  g  geksamin  25,0  ml  suvdagi  eritmasi  qo‗shilib, 

aralashtiriladi va 24 soatga qoldiriladi. Suspenziyani (S1) shishada chang hosil qilmasligi va 

ishlatishdan oldin yaxshilab aralashtirish kerak.  

15,0 ml olingan suspenziyani1000 ml suv bilan suyultiriladi (S2). Bu suspenziya yangi 

tayerlangan bo‗lishi kerak va 24 soatdan ko‗p saqlamaslik kerak.   

10 ml standart(S2)ga 90 ml suv qo‗shiladi va aralashtiriladi.  

Rangliligi. 

Tekshirilayotgan  eritmani  standart  eritmani  rangliligi  bilan  400  qatlam  qalinligida 

solishtiriladi. Eritmalarni  rangsiz, tiniq,  neytral  shishali tekis  tubli  va tashqi  diametri  15 dan 

25  mm  gacha  bo‗lgan  bir  xil  probirkalarga  solinadi.  Eritmalarni  solishtirish  probirkalarni 

vertikal holatda ushlab turilib, kunning difuziya nurida, oq fonda o‗tkaziladi. 

Eritmani  tayyorlash1:  46  g  temir  (III)  xloridni  25  ml  xlorid  kislotasidan  va  975  ml 

suvdan tashkil topgan, 900 ml aralashmada eritiladi  va hajmni 1000 ml gacha shu aralashma 

bilan to‗ldiriladi. 1 ml eritma tarkibida 45 mg FeCl

3

*6H

2

O  bo‗ladi,  agar kerak bo‗lsa olingan 

eritma  suyultirilgan  xlorid  kislotaning      konsentratsiyasiga  mos  bo‗lishi  kerak.  Eritmani 

yorug‗lik ta‘siridan  himoya qilish kerak. 

10,0 ml olingan eritmanikonik kolbaga qattiq siqilgan qopqoq bilan solinadi, 15 ml suv, 

5  ml  xlorid  kislota  va  4  g  kaliy  yod  qo‗shiladi.  Kolbani  yopiladi  va  15  daqiqaga  qorong‗u 

joyga  qo‗yib  qo‗yiladi.  100  ml  suv  solingandan  so‗ng  0,1  M  natriy  tiosulfat  bilan  yodni 

titrlanadi, indikator sifatida (0,5 ml) kraxmal eritmasini titrlash oxirida qo‗shib ishlatiladi.  

1 ml 0,1M natriy tiosulfat 27,03 mg FeCl

3

*6H

2

O  ga mos kelishi kerak. 

Eritmani  tayyorlash  2:  60  g  kobalt  (II)  xloridni  25  ml  xlorid  kislotasi  va  975  ml  suv 

bilan hosil bo‗lgan 900 ml aralashmada eritiladi va hajmni 1000 ml gacha shu aralashma bilan 

to‗ldiriladi. 1 ml eritma tarkibida 59.5 mg SoCl

2

*6H

2

O  bo‗ladi,   agar kerak bo‗lsa olingan 

eritma suyultirilgan xlorid kislotaning   konsentratsiyasiga mos bo‗lishi kerak. 

5,0  ml  tayyor  bo‗lgan  eritmaga  konik  kolbaga  solib  qopqoq  bilan  yopiladi,  5  ml 

vodorod peroksid (10 ml) va 10 ml 30% (mg/ml) natriy ishqorining eritmasidan qo‗shiladi. 10 

daqiqa davomida asta –sekin qaynatiladi. Sovutilgandan so‗ng 60 ml 1M sulfat kislota va 2 g 

kaliy  yod  qo‗shiladi.  Kolbani  yopiladi  va  cho‗kmani  sekin  silkitish  orqali  eritiladi.  Ajralib 

chiqgan yodni 0,1 M natriy tiosulfat bilan yodni titrlanadi, indikator sifatida (0,5 ml) kraxmal 

eritmasini  titrlash  oxirida  qo‗shib  ishlatiladi.  Titrlashning  oxirgi  nuqtasini  pushti  rang  hosil 

bo‗lishi bilan to‗xtatiladi.  

1 ml 0,1M natriy tiosulfat 23,79 mg SoCl

2

*6H

2

O  ga mos kelishi kerak. 

Eritmani tayyorlash 3: 63 g mis (II) sulfatni 25 ml xlorid kislotasi va 975 ml suv bilan 

hosil  bo‗lgan  900  ml  aralashmada  eritiladi  va  hajmni  1000  ml  gacha  shu  aralashma  bilan 

to‗ldiriladi. 1 ml eritma tarkibida 62.4 mg SuCl2*6H2O  bo‗ladi,  agar kerak bo‗lsa olingan 

eritma suyultirilgan xlorid kislotaning   konsentratsiyasiga mos bo‗lishi kerak. 

10,0 ml tayyor bo‗lgan eritmaga konik kolbaga solib qopqoq bilan yopiladi, 50 ml suv, 

12 ml 2M sirka kislota va 3 g kaliy yod eritmasidan qo‗shiladi.Ajralib chiqgan yodni 0,1 M 

natriy  tiosulfat  bilan  yodni  titrlanadi,  indikator  sifatida  (0,5  ml)  kraxmal  eritmasini  titrlash 

oxirida qo‗shib ishlatiladi. Titrlashning oxirgi nuqtasini och-jigarrang rang hosil bo‗lishi bilan 

to‗xtatiladi.  

1 ml 0,1M natriy tiosulfat 24,97 mg SuCl2*6H2O ga mos kelishi kerak. 

Ranglilikning standart eritmasini tayyorlash. 

30  ml  eritma  1ni,    30  ml  eritma  2  ni,  24  ml  eritma  3  ni  aralashtiriladi  va  16  ml  1% 

mg/kg xlorid kislota qo‗shiladi. 

---

342 

 

Ranglilikning standart eritmasini olish uchun 1,5 ml yuqorida ko‗rsatilgan eritmadan va 

97,5 ml 1% (mg/ml) xlorid kislotasini aralashtirilib olinadi. 

CHinligi. 

Gramitsidin chinligi. 

2 ml tekshirilayotga eritmadan 5 ml p-dimetilaminobenzaldegid reaktividan qo‗shib,  5 

daqiqadan so‗ng och jigarrang rang hosil bo‗ladi.  

p-dimetilaminobenzaldegid 

reaktivini 

tayyorlash. 

0,1% 

(mg/kg) 

p-

dimetilaminobenzaldegidni    65%  (mg/kg)  sulfat  kislotaning  suvli  eritmasida  eritiladi.  Bu 

eritmaga 0,1 ml 10% (mg/kg) temir xlorid qo‗shiladi. 

Framitsetin sulfat chinligi. 

2 ml tekshirilayotgan namunani test probirkaga solib, 5 ml ningidrin reativini qo‗shiladi 

va  suv  hammomida  qizliriladi,  bir  necha  daqiqa  davomida  eritmaning  rangi  tezda  binafsha 

rangga bo‗yaladi. 

Ningidrin  reaktivini  tayyorlash:    0,5 g ningidrin  va 1,0  g kaliy  atsetatni  100 ml suvda 

eritiladi va 0,5 ml srka kislota qo‗shiladi. 

Feniletilli spirtini tayyorlash. 

CHinligini  miqdori  tahlil  bilan  birga    yuqori  samarador  suyuqlik  xromatogrammasida 

(YUSSX) 

o‗tkaziladi. 

 

Feniletilli 

spirtning 

tekshirilayotgan 

eritmasining 

xromatogrammasidagi  cho‗qqisini  (R

t

)saqlab  qolish  vaqti  feniletilli  spirtning  standart 

eritmasining  xromatogrammasidagi  cho‗qqisini  (R

t

)saqlab  qolish  vaqti  bilan  mos  kelishi 

kerak. (±0.5 ml daqiqa). 

Deksametazon chinligi. (natriy metasulfobenzoat deksametazon formasidagi). 

CHinligini  miqdori  tahlil  bilan  birga    yuqori  samarador  suyuqlik  xromatogrammasida 

(YUSSX) 

o‗tkaziladi. 

 

Deksametazonning 

tekshirilayotgan 

eritmasining 

xromatogrammasidagi  cho‗qqisini  (R

t

)saqlab  qolish  vaqti  natriy  metasulfobenzoat 

deksametazon  eritmasining  xromatogrammasidagi  cho‗qqisini  (R

t

)saqlab  qolish  vaqti  bilan 

mos kelishi kerak. (±0.5 ml daqiqa). 

CHinligni yupqa qatlam sorbent (YUQS) xromatografiya usulida o‗tkaziladi. (alternativ 

usul). 

Harakatsiz faza: F254 silikagel qatlami bilan o‗ralgan xromatogramma plastinkasi. 

Harakatlanuvchi faza: Etilatsetat 80 

   

 

 

Metanol 20 

   

 

 

Suv 20 

Standart eritma: 0,3 % metanoldagi natriy metasulfobenzoat deksametazon. 

Tekshirilayotgan eritma: 4ml quruq holatgacha bug‗latiladi. Qoldiq 4 ml metanol bilan 

eritiladi. Sentrofugalaniladi va filtratga dog‗ ko‗rinishda surtiladi. 

Namunaning surtilishning miqdori: 

tekshirilayotgan eritma 05 mkl 

standart eritma – 20mkl. 

15  sm  stratdan  erituvchilarni  frontgacha  ko‗tariladi.  Plastinkani  xromatografik 

kameradan  olinadi  va  havoda  quritiladi.  254  nm  to‗lqin  uzunligida  ultrabinafsha  nurida 

ko‗riladi.  Natriy  metasulfobenzoat  deksametazon  qora  dog‗day  hosil  bo‗ladi.  So‗ng,  105°S 

haroratda  xromatografik  plastinkani  5  daqiqa  davomida  qizdiriladi.  Uni  olib  metazoladagi  1 

qism  0,2%  ko‗k  tetrazolni  3  qism  metanoldagi  konsentrlangan  NaOH  eritmasi  bilan  ishlov 

beriladi. Xromatogrammada deksametazon natriyga mos kelivchi to‗q qizil rangli dog‗ hosil 

bo‗ladi.