Курсовая работа по фармакогнозии «лекарственное растительное сырье, содержащее дубильные вещества»

Глава 3. Перспективные источники дубильных веществ из лекарственного растительного сырья
3.1. Исследование содержания дубильных веществ корней шиповника собачьего

Шиповник собачий - Rosa canina (L.): густой кустарник, с дугообразными ветвями, высотой 1,5-2 метра. Шипы редкие, у основания весьма широкие, серповидно-изогнутые. Листья непарноперистые, 6-9 см длины, с 5-7 листочками продолговато-яйцевидной формы. Длина листочков 1,5-5 см, край зубчатый, снизу они серо-зелёного цвета. Плоды ягодообразные, сочные, светло-красного цвета. Чашелистики перисто-рассечённые, после цветения отгибаются вниз и опадают вниз, оставляя после себя пятиугольную площадку. Установлены внешние признаки цельного сырья: корневища узловатые, ветвистые, длиной 20-25 см, толщиной 10-12 см, с гладкой, блестящей поверхностью, красновато-бурого цвета. Корни по форме цилиндрические, изогнутые и слабоветвистые, цвет - коричневато-серый с бурым оттенком, на изломе желтовато-белый. Длина корней достигает 30 см, толщина - 0,3 -1,0 см. Запах слабый, терпкий [11, 24].

Рисунок 19 Внешний вид шиповника собачьего - Rosa canina
Содержание дубильных веществ определяли в водном извлечении. Количественное определение органических кислот (фенолокислот) устанавливали титриметрическим методом, используя пермангонатометрическое титрование, определяли содержание дубильных и легко окисляемых веществ.
Для определения танина в исследуемом сырье использовали микроколоночный жидкостный хроматограф «Милихром А-02», снабжённый колонкой из нержавеющей стали размером 2х75 мм, заполненный адсорбентом Prontosil 120-5CAQ.
Анализ проводили методом изократического элюирования при комнатной температуре. В качестве подвижной фазы использовали систему растворителей кислота муравьиная 2% - ацетонитрил (60:40). При хроматографировании в предложенных условиях раствора РСО танина 0,1% фиксировались два симметричных пика со временем удерживания 1,85 и 2,45 мин, коэффициент разделения пиков составил 2,1.
Содержание дубильных и легко окисляемых веществ, определяемые фармакопейным методом, составило 10,77±0,03%. Относительная ошибка при доверительной вероятности не превышает ±0,28%. В связи с тем, что фармакопейный перманганатометрический метод позволяет определить в растительном сырье не только содержание дубильных веществ, а сумму всех легко окисляемых соединений, переходящих в водное извлечение, нами для стандартизации сырья был использован метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, как более точный и информативный метод качественного и количественного анализа, которым определили содержание в ЛРС танина, что в количественном соотношении равно (1,46±0,026%). На рисунке 20 представлены метрологические характеристики метода ВЭЖХ для определения дубильных веществ (ДВ) в корнях шиповника собачьего (в пересчете на танин) (рис.20) [24].



Рисунок 20. Метрологические характеристики метода ВЗЖХ для определения ДВ

3.2. Исследование содержания дубильных веществ растений семейства Hydrocharitaceae

Материалом для исследования послужили образцы побегов растений семейства Hydrocharitaceae: Hydrocharis morsus - ranae L. (Водокрас лягушачий), Stratiotes aloides L. (Телорез алоевидный), Elodea canadensis Mich. (Элодея канадская), Egeria densa Planch. (Эгерия густая), Hydrilla verticillata Royle (Гидрилла мутовчатая) [19].

Для исследования компонентного состава отбор проб растений проводили в фазу цветения - начала плодоношения/вегетации после цветения (в июле-августе) из нескольких участков одного местонахождения. Отобранные рандомизированным путем, средние пробы высушивались до воздушно-сухого состояния и хранились при комнатных условиях до проведения испытаний.
Полученные, путем экстрагирования горячей водой, водные извлечения (1:10) были подвергнуты количественному анализу пермагантометрическим методом, результаты которого представлены на рисунке 21 [19].
Рисунок 21. Результаты определения содержания дубильных веществ в растительных объектах
Таким образом, результаты количественного анализа позволили обнаружить гидролизуемые дубильные вещества у Hydrocharis morsus-ranae, а у Stratiotes aloides, Elodea canadensis, Egeria densa, Hydrilla verticillata - смесь гидролизуемых и конденсированных дубильных веществ. Наибольшим содержанием дубильных веществ отличается Stratiotes aloides, содержаний 3.1±0.1%, и Hydrilla verticillata, содержащая - 2.8±0.1%, минимальным - Elodea canadensis 1.1±0.1%. В качестве возможной фармакологической активности предложена – антиоксидантное действие.
Также, были проведены исследования качественных характеристик выделенных дубильных веществ из растений рода Hydrocharitaceae путем проведения серии качественных реакций с 1% раствором железоамммонийных квасцов и 0,5% раствором бромной воды.