Иш д а ф т а р и факултет Курс гуруҳ

*Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y₅ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
Удельное вращение. От + 270 до + 300 в пересчете на сухое вещество (2 % водный раствор субстанции, ОФС «Поляриметрия»).
Показатель поглощения. Оптическая плотность 0,188 % водного раствора субстанции в кювете с толщиной слоя 1 см при длинах волн 280 нм и 325 нм должна быть не более 0,10 и в максимуме поглощения при длине волны 264 м должна быть от 0,80 до 0,88 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
При необходимости раствор дополнительно разводят для измерения при длине волны 264 нм. Оптическую плотность определяют в пересчете на основание для неразбавленного раствора (1,88 мг/мл).
pH. От 5,5 до 7,5 (2 % водный раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ.
Растворы готовят непосредственно перед использованием.
Подвижная фаза А (ПФ А). Калия дигидрофосфата 0,5 М раствор, доведенный фосфорной кислотой разведенной 10 % до pH 3,5 ± 0,1 – метанол – вода 10:30:60.
Подвижная фаза Б (ПФ Б). Калия дигидрофосфата 0,5 М раствор, доведенный фосфорной кислотой разведенной 10 % до pH 3,5 ± 0,1 – метанол – вода 10:40:50.
Испытуемый раствор А. Около 50,0 мг (точная навеска) субстанции растворяют в воде и доводят тем же растворителем до 50,0 мл.
Испытуемый раствор Б. Около 80,0 мг (точная навеска) субстанции растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до 20,0 мл.
Раствор сравнения А. Около 50,0 мг (точная навеска) стандартного образца бензилпенициллина натрия растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до 50,0 мл.
Раствор сравнения Б. 10 мг стандартного образца бензилпенициллина натрия и 10 мг фенилуксусной кислоты (примесь В, CAS 103-82-2) растворяют в воде идоводят объем раствора тем же растворителем до 50 мл.
Раствор сравнения В. 4,0 мл раствора сравнения А доводят водой до 100,0 мл.
Хроматографические условия

Колонка	25 × 0,46 см силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
^С^к^ор^о^сть п^от^о^к^а	^1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 225 нм;
Объем пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФ А, %	ПФ Б, %	Режим
0 – tR	70	30	Изократический
tR – (tR + 20)	70  0	30  100	Линейный градиент
(tR + 20) – (tR + 35)	0	100	Изократический
(tR + 35) – (tR + 50)	70	30	Изократический
tR – время удерживания пика бензилпенициллина на хроматограмме раствора сравнения В

Хроматографируют испытуемый раствор Б и раствор сравнения Б в изократическом режиме, раствор сравнения В и воду (холостой раствор) в градиентном режиме.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение (R) между пиками примеси В и бензилпенициллина должно быть не менее 6,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора Б:
- площадь пика любой примеси должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения В (не более 1 %).