И правила работы в лаборатории биохимии

Катионная ионообменная хроматография
задерживает 
положительно заряженные катионы, так как неподвижная фаза имеет 
отрицательно заряженные функциональные группы, например, 
фосфат (PO
3
4
). 
Гель-хроматография
(гель-фильтрация), или эксклюзионная 
хроматография, – разновидность хроматографии, в ходе которой мо-
лекулы веществ разделяются по размеру за счѐт их разной способ-
ности проникать в поры неподвижной фазы. При этом первыми выхо-
дят из колонки наиболее крупные молекулы, способные проникать
в минимальное число пор стационарной фазы. Последними выходят 
вещества с малыми размерами молекул, свободно проникающими
в поры. При гель-фильтрации стационарная фаза остается химически 
инертной и с разделяемыми веществами не взаимодействует. 
Аффинная хроматография
(от лат. 
affinis
– родственный; 
биоспецифичная хроматография, хроматография по сродству) – 
метод очистки и разделения белков, основанный на их избирательном 
взаимодействии с лигандом, ковалентно связанным с инертным 
носителем. В качестве лигандов используют соединения, взаимо-

---

57 
действие которых с разделяемыми веществами основано на биоло-
гической функции последних. Так, при разделении ферментов (для 
чего преимущественно и применяется аффинная хроматография) 
лигандами служат их субстраты, ингибиторы, коферменты.
Главная особенность, которая обусловливает высокую эффек-
тивность аффинной хроматографии, в том, что разделение фермента 
основано на различии не физико-химических признаков молекулы 
(заряда, формы и размера), а на специфических функциональных 
свойствах, отличающих данный фермент. 
Неподвижная фаза в аффинной хроматографии представляет 
собой специально получаемый сорбент, построенный обычно по схе-
ме носитель – соединяющее звено ("ножка") – специфичный лиганд. 
Носителем служит чаще всего сефароза – производное агарозы, 
имеющее поперечные сшивки.