ЭКСПРЕССИЯ РЕЦЕПТОРОВ СЕМЕЙСТВА KIR
ЕСТЕСТВЕННЫМИ КИЛЛЕРАМИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ
КРОВИ В ПРИСУТСТВИИ ЦИТОКИНОВ IL-15, IL-18
И TGF-БЕТА И КЛЕТОК ТРОФОБЛАСТА
Гребенкина П.В., лаб-исслед., Саллум З., студ.,
Давыдова А.А., лаб.-исслед., Ковалева А.А., студ.
НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им Д.О. Отта,
Санкт-Петербург, Россия
Научные руководители: Михайлова В.А., к.б.н., Соколов Д.И., д.б.н.
Физиологическое развитие беременности определяется взаимо-
действием трофобласта (Тр) и клеток иммунной системы матери.
Одной из популяций лейкоцитов эндометрия являются естествен-
ные киллеры (ЕК). Рецепторы ЕК можно разделить на активиру-
ющие и ингибирующие. Одной из групп рецепторов ЕК являются
трансмембранные белки семейства KIR. В микроокружении деци-
дуальных ЕК присутствуют цитокины, способные регулировать их
цитотоксичность.
Целью
работы являлось изучение влияния IL-15, IL-18 и TGF-
бета на экспрессию ингибирующего рецептора KIR2DL1 и активи-
рующего рецептора KIR2DS4 ЕК периферической крови в присут-
ствии клеток Тр.
В исследование включена 21 женщина репродуктивного возрас-
та без острых и обострений хронических заболеваний. В качестве
клеток Тр использовали клетки линии JEG-3, воспроизводящие ос-
новные свойства инвазивного Тр. Клетки Тр культивировали в со-
ответствии с указаниями производителя (ATCC, США). За 24 часа
до эксперимента в 96-луночный планшет вносили 20000 клеток Тр
в 100 мкл среды. В день эксперимента мононуклеары выделяли из
периферической крови и вносили на образованный клеткамм Тр
монослой или в пустые лунки по 100000 клеток в 100 мкл среды
с добавлением IL-2 в концентрации 500 Ед/мл. В часть лунок вноси-
ли IL-15, IL-18, TGF-бета. Клетки инкубировали 4 суток, затем для
оценки экспрессии KIR2DL1 и KIR2DS4 ЕК периферической крови
использовали проточный цитометр BD FacsCanto II. Для статисти-
470
ОХРАНА МАТЕРИНСТВА И ДЕТСТВА И ЕЕ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ
ческого анализа использовали непараметрический критерий Вил-
коксона (p<0,05).
Культивирование в присутствии IL-15 и IL-18 не приводило к из-
менению экспрессии KIR2DL1 и KIR2DS4 ЕК периферической кро-
ви. При культивировании ЕК периферической крови в присутствии
TGF-бета были снижены относительное количество KIR2DS4+ ЕК
и интенсивность экспрессии KIR2DS4 и KIR2DL1. Взаимодействие
ЕК с Тр не приводило к изменениям относительного количества
и интенсивности экспрессии KIR2DS4 и KIR2DL1. После культиви-
рования ЕК в присутствии Тр и TGF-бета была снижена интенсив-
ность экспрессии KIR2DS4 и KIR2DL1 по сравнению с культивиро-
ванием с Тр без TGF-бета.
Таким образом, TGF-бета приводит к снижению количества
KIR2DS4+ ЕК и их активационного потенциала. Присутствие клеток
Тр отменяет эффект TGF-бета, связанный с уменьшением количе-
ства ЕК, несущих активационный рецептор KIR2DS4.
Финансирование: грант РФФИ №20-015-00014, государственные
программы ААА-А-20-120041390033-4, ААА-А-19-119021290116-1.
ОХРАНА МАТЕРИНСТВА И ДЕТСТВА И ЕЕ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ
471
Do'stlaringiz bilan baham: |