295
MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH
TEKSHIRISH UCHUN MATERIAL
1. Birlamchi davrda qattiq shankrdan material.
2. Rozeola, papula, vezikuladan material (ikkilamchi davrda).
3. Qon (ikkilamchi, uchinchi va tortinchi davrda).
Tekshirish materialini toplash
Kirish darvozasi oldida qattiq shankrdan hosil bolgan yara fiziologik
eritmaga namlangan paxta yoki doka bilan artiladi va yara ichidagi
material steril piðetkada olinadi. Agar suyuqlik yaxshi ajralmasa, yara
atrofi pinset yordamida biroz eziladi. Piðetkada olingan suyuqlik
yogsizlantirilgan buyum oynachasiga tomiziladi va mikroskop ostida
tekshiriladi (ish rezina qolqop kiygan holda olib boriladi).
Rozeola, vezikula,
Steril piðetka yoki paxtali tampon
papuladan material.
yordamida olinadi. Surtma preparat tay-
yorlanadi va mikroskop ostida tekshiriladi.
Qon
Bilak venasidan 47 ml olinadi. Qon
zardobi ajratib olinadi va serologik reak-
siya qoyiladi.
Asosiy tekshirish usullari
1. Mikroskopik.
2. Serologik: a) Vasserman reaksiyasi (komplement boglanish
reaksiyasi);
b) chokma reaksiyasi.
3. Òreponemalarni immobilizatsiya reaksiyasi.
4. Immunofluoressensiya usuli.
Mikroskopik usul
Yara, rozeola, vazikula, papuladan olingan materiallar bir necha
usulda tekshiriladi:
1-usul. Qorongilashtirilgan mikroskopik maydonda tekshirish. Olingan
tekshirish materiali yogsizlantirilgan buyum oynachasi ustiga tomiziladi
va ustiga yopqich oynacha yopiladi. Mikroskopning qorongilashtirilgan
maydonida (40x obyektiv, 10x okular) tekshiriladi. Qorongi maydonda
rangsiz, harakatlanayotgan, ingichka, buramali qozgatuvchilar korinadi.
2-usul. Òekshirish materialidan surtma preparat tayyorlanadi va
RomanovskiyGimza usulida boyaladi, mikroskop ostida tekshiriladi.
Zaxm qozgatuvchilari och pushti rangda boyaladi.
3-usul. Levaditi usuli. Olingan tekshirish materiali kumush bilan
aralashtirilib surtma preparat tayyorlanadi va mikroskop ostida tekshi-
riladi. Preparatda treponemalar qora spiralsimon bolib korinadi,
korilayotgan maydon esa oq rangda boladi.
296
Serologik usul
Vasserman reaksiyasi. Bu reaksiya komplement boglanish reaksiyasi
asosida olib boriladi. Vasserman reaksiyasi boshqa reaksiyalardan
nospetsifik antigen qollanilishi bilan farqlanadi. Masalan, kardio-
antigen buqa yuragidan tayyorlangan yogli ekstrakt boladi. Mana
shu nospetsifik antigenga sezgir bolgan nospetsifik antitelolarni reaginlar
deyiladi. Nospetsifik antigen bilan boradigan reaksiya bemor qon zardobi
tarkibidagi globulin miqdorining ortishi va dispersiya darajasining
ozgarishi sababli yuzaga keladi. Globulinlar yogli ekstraktlar bilan
birikadi va komplement bilan boglanib kompleks hosil qiladi. Shuning
uchun ham gemolitik sistemada gemoliz bolmaydi. Gemolizning sodir
bolmasligi reaksiya musbatligidan dalolat beradi, yani «zaxm», deb
tashxis qoyishiga asos beradi. Serologik reaksiyalarni qoyishda, bundan
tashqari treponema va kultural toqimalardan ajratib olingan spetsifik
antigenlarni ham qollash lozim (30-jadval).
30-jadval
Vasserman reaksiyasini qoyish
l
m
,
r
a
lt
n
e
y
i
d
e
r
g
n
I
r
a
l
a
k
r
i
b
o
r
P
1
2
3
)
t
a
r
o
z
a
n
(
4
n
a
g
n
a
l
a
y
i
s
t
a
v
it
k
a
n
I
.
1
b
o
d
r
a
z
n
a
g
t
o
y
a
li
r
i
h
s
k
e
t
1
,
0
1
,
0
1
,
0
1
,
0
a
m
ti
r
e
k
i
g
o
l
o
i
z
i
F
.
2
4
,
0
4
,
0
4
,
0
9
,
0
n
a
g
li
r
it
l
u
y
u
s
a
h
c
i
y
o
b
r
ti
T
.
3
i
s
a
y
i
r
e
s
n
e
g
it
n
a
-
1
5
,
0
n
a
g
li
r
it
l
u
y
u
s
a
h
c
i
y
o
b
r
ti
T
.
4
i
s
a
y
i
r
e
s
n
e
g
it
n
a
-
2
5
,
0
n
a
g
li
r
it
l
u
y
u
s
a
h
c
i
y
o
b
r
ti
T
.
5
i
s
a
y
i
r
e
s
n
e
g
it
n
a
-
3
5
,
0
t
n
e
m
e
l
p
m
o
K
.
6
5
,
0
5
,
0
5
,
0
5
,
0
i
d
a
li
r
i
d
l
o
q
a
g
t
a
o
s
1
a
d
t
a
t
s
o
m
r
e
T
n
a
g
n
a
l
a
y
i
s
t
a
z
il
i
b
i
s
n
e
S
a
m
e
t
s
i
s
k
it
il
o
m
e
g
1
1
i
d
a
li
r
i
d
l
o
q
a
g
a
q
i
q
a
d
0
4
0
3
a
d
t
a
t
s
o
m
r
e
T
a
ji
t
a
N
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
i
d
a
li
y
e
d
t
a
b
s
u
m
a
y
i
s
k
a
e
R
297
E s l a t m a : 1) «++++» gemolizning toliq bolmasligi;
«» toliq gemolizga uchrashi;
2) 1-nospetsifik antigen (buqa yuragining yogli
fraksiyasi);
3) 2 va 3-antigenlar treponema kulturasidan
olingan spetsifik antigenlardir.
Chokma reaksiyasi. 1. Qon reaksiyasi. Bemor qon zardobi 56°C
haroratda 30 daqiqa inaktivatsiya qilinadi. Antigenga (buqa yuragining
yogli ekstrakti) 0,6 % xolesterin qoshiladi. Bu reaksiyaning sezgirligini
oshiradi (31-jadval).
31-jadval
Qon reaksiyasini qoyish
N a t i j a : pretsepitatsiya yuzaga kelsa, reaksiya musbat deyiladi.
2. ZaksVitebskiy reaksiyasi (sitoxolesterin chokma reaksiyasi). Bu
reaksiya qon reaksiyasiga oxshash. Pretsepitatsiyani tezroq yuzaga keltirish
uchun bunga yanada konsentrlangan xolesterinlik antigen qoshiladi.
Òreponemalarni immobilizatsiyalash reaksiyasi. Zaxm diagnostika-
sida spetsifik reaksiya hisoblanadi.
Òreponemalarni immobilizatsiya reaksiyasi spetsifik reaksiya
hisoblanadi. Hozirgi vaqtda bu reaksiyaning aniq uslubi ishlab chiqilgan.
T.pallidum bilan zararlangan quyon tuxumdoni maydalanib tayyor-
langan aralashmada qozgatuvchilar harakatchanligini saqlab qolish
uchun u maxsus oziqa muhitiga solinadi. Probirkaga 1,7 ml miqdorda
treponema toqimasi aralashmasi, 0,2 ml hajmda tekshirilayotgan
zardob, 0,1 ml yangi komplement olinadi.
Bu reaksiya probirkalarda olib boriladi. Birinchi nazorat probirkasiga
tekshirilayotgan bemor qon zardobi orniga soglom odamning qon
l
m
,
r
a
lt
n
e
y
i
d
e
r
g
n
I
r
a
l
a
k
r
i
b
o
r
P
a
b
i
rj
a
t
i
n
e
g
it
n
a
t
a
r
o
z
a
n
n
e
g
it
n
A
5
2
1
0
,
0
;
5
2
0
,
0
;
5
0
,
0
5
2
1
0
,
0
;
5
2
0
,
0
;
5
0
,
0
b
o
d
r
a
z
n
a
g
t
o
y
a
li
r
i
h
s
k
e
T
5
1
,
0
;
5
1
,
0
;
5
1
,
0
a
m
ti
r
e
k
i
g
o
l
o
i
z
i
F
5
1
,
0
;
5
1
,
0
;
5
1
,
0
i
d
a
li
t
a
q
y
a
h
c
a
g
a
q
i
q
a
d
3
a
m
ti
r
e
k
i
g
o
l
o
i
z
i
F
5
,
0
;
5
,
0
;
1
,
0
5
,
0
;
5
,
0
;
0
,
1
i
d
a
li
t
a
q
y
a
h
C
298
zardobi qoshiladi; ikkinchi nazorat probirkasiga dengiz choch-
qachasining inaktivatsiya qilingan qon zardobi qoshiladi. Barcha
probirkalar gazlar aralashmasi bilan toldirilgan (1 hajm karbonat
kislota va 19 hajm azot) eksikator yoki anaerostatda qoldiriladi va
35°C haroratlik termostatga solinadi. Song tekshirish materiali buyum
oynachasiga tomiziladi va spiroxetalar harakatchanligi qorongilashgan
mikroskop maydonida organiladi. Reaksiyaning prinsiði shundan
iboratki, bemor qon zardobidagi antitelo tasirida va komplement
ishtirokida zaxm qozgatuvchisi harakatdan toxtaydi. Bunda
harakatdan toxtagan treponemalarning foizi aniqlanadi.
Agarda 50 % dan ortiqroq qozgatuvchilar harakatdan toxtasa
reaksiya musbat, 3050 % gacha harakatdan toxtasa, kuchsiz musbat,
20 % dan kam harakatdan toxtasa, reaksiya manfiy deyiladi.
1. Zaxm kasalligining turli davrlarida qanday tekshirish materiali
olib tekshiriladi?
2. Zaxm diagnostikasida qanday laboratoriya tekshirish usullari
qollaniladi?
3. Vasserman reaksiyasini qoyishda qanday antigenlardan foy-
dalaniladi?
4. Òreponemalarni immobilizatsiya qilish reaksiyasida qanday
ingrediyentlardan foydalaniladi?
5. Òreponemalarni immobilizatsiya reaksiyasining natijasi qanday
oqiladi?
38-bob.
QAYTALAMA TIF QOZGATUVCHILARI
Qaytalama tif qozgatuvchilari Spirochetaceae oilasiga, Borre-
lia avlodiga kiradi.
Infeksiya tashuvchisiga kora qaytalama tif epidemik qaytalama tif
(tashuvchisi bitlar) va endemik qaytalama tif (tashuvchisi kanalar)
kabilarga bolinadi.
Qaytalama tif borreliyalari boshqa spiroxetalardan yirikligi, bura-
malari turlicha joylanishi, RomanovskiyGimza usulida boyalganda,
binafsha rangda boyalishi bilan farqlanadi.
Epidemik qaytalama tif
Epidemik qaytalama tif qozgatuvchisi 1868-yilda O. Obermayer
tomonidan aniqlangan.
Morfologiyasi. Obermayer borreliyalari spiralsimon iðga oxshash
bolib, 58 buramadan iborat, buramalari turlicha joylashgan, uchlari
?
Nazorat uchun savollar
299
uchli, 1018x0,30,5 mkm kattalikdadir. Harakatchan, spiroxetalarga
xos barcha tort xilda bolgan turda harakatlanadi.
Kultural xossasi. Zardob, assit suyuqligi, toqima yoki hayvon
azolari qoshilgan suniy oziqa muhitlarida osadi. Ular juda sekin,
712 kundan song, anaerob, 3035°C haroratda va pH 7,27,4
bolgan sharoitda osadi. Suyuq oziqa muhitida ular jadal bolinib
kopayishlariga qaramasdan, muhit tiniq qoladi. Keyingi yillarda
borreliyalar tovuq embrionida ham ostirilmoqda.
Fermentativ xossasi. Borreliyalar fermentativ xossaga ega emas.
Òoksigenligi. Endotoksin ajratadi (toliq organilmagan).
Antigenligi. Kam organilgan.
Chidamliligi. Borreliyalar yuqori haroratga juda sezgir. 4550°C
harorat tasirida 30 daqiqadan song, 0°C da bir kungacha saqlanadi.
Past haroratga ancha chidamli. Muzlatilganda bir necha oylab saqlanadi.
Quritilganda tez nobud boladi. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida
bir necha daqiqadan song nobud boladi.
Patogenligi. Tabiiy sharoitda hayvonlar qaytalama tif bilan
kasallanmaydi. Laboratoriya hayvonlaridan maymunlar, oq sich-
qonlar, olmaxonlarga Obermayer borreliyalari qiyinchilik bilan
yuqadi.
Infeksiya manbai. Kasal odam infeksiya manbai hisoblanadi.
Òarqalish yoli. Òransmissiv yol orqali, yani yashashi davomida
(3040 kun) bitlar orqali tarqaladi.
Bemor qonini sorgan bitlar 57 kundan keyin zararli bolib
hisoblanadi. Bu vaqt ichida spiroxetalar ichakdan gemolimfa yoliga
soriladi va u yerda toplanadi. Odam qashinganda bit tanasini
shikastlaydi va uning gemolimfasini qashigan joyga kiritadi.
Patogenezi. 1874-yilda G. Minx, 1881-yili I. I. Mechnikov tajriba
sifatida bemor qonini ozlariga yuborib, qaytalama tif qozgatuv-
chisini qonda aylanib yurishini isbotlab berganlar.
Organizmga kirgan borreliyalar limfa yoliga otib makrofag siste-
masi hujayralarida kopayadi, songra qonga soriladi. Bemorda birinchi
kasallik xuruji, yani isitma tutishi shundan keyin yuzaga keladi. Bemor
qonida antitelolar spiroxetolizinlar toplanadi, ular borreliyalarini
lizisga uchratadi. Qozgatuvchilar tomonidan ajratilgan endotoksin
intoksikatsiyani tana haroratini kotarilishi va boshqa funksional
ozgarishlarni yuzaga keltiradi. Òoqimalarning chuqur qismida
saqlanib qolgan borreliyalar bolinib kopayadi va organizmda
lizinlarga sezuvchan bolmagan yangi avlod borreliyalarini hosil qiladi.
Bu borreliyalar qonga otib, yangidan ikkinchi isitma tutishni yuzaga
keltiradi. Organizmda endi ana shu borreliyalarni lizisga uchratuvchi
lizinlar yuzaga keladi. Bunday isitma tutishlar bir necha marotaba
300
(35) takrorlanadi. Har bir keyingi isitma tutish oldingisidan qisqa
va ular orasidagi vaqt (apiraksiya) uzoqroq boladi. Organizmdagi
barcha turdagi borreliyalar toliq lizisga uchragandan song tuzalish
yuzaga keladi.
Qaytalama tif bilan kasallangan bemorlardan favqulodda hodisa
trombotsitobariya, yani ichki azo kapillarlaridagi spiroxetalarga
trombotsitlar shimilishi va natijada «spiroxet va trombotsit» agregati
yuzaga kelishi kuzatiladi. Bu agregat shu azoda qon aylanishini
buzilishiga olib keladi, borreliyalar esa harakatchanligini yoqotadi.
Immuniteti. Spiroxetolizin, agglutinin, trombotsitobarin kabi
antitelolar borligi bilan tavsiflanadi. Lekin ular turgun emas.
Profilaktikasi. Bitlarga qarshi kurashish, sanitar-gigiyenik sharoitni
yaxshilash. Maxsus profilaktikasi ishlab chiqilmagan.
Davosi. Òetratsiklin, penitsillin, levomitsetin va margumushdan
tayyorlangan dorilar beriladi.
1. Qaytalama tif borreliyalarining morfologik va kultural xossasini bayon
eting.
2. Bemor qonida qaytalama tif borreliyalari aylanib yurishini kim
isbotlab bergan?
3. Qaytalama tifning yuqish mexanizmi va patogenezi qanday?
4. «Òrombotsitobariya» favqulodda hodisasi nima?
Endemik qaytalama tif
Endemik qaytalama tif kasalligini bir qancha turdagi borreliyalar
(B. persica, B.duttonii va b.) keltirib chiqaradi. B.duttoniini 1904-yili
R. Ross bemor qonidan ajratib olgan.
Morfologiyasi. Kana qozgatadigan qaytalama tif borreliyalarining
morfologiyasi epidemik qaytalama tif qozgatuvchisiga oxshashdir.
Kultural xossasi. B. duttonii maxsus oziqa muhitida osishi mumkin.
Ular 3035°C haroratda va pH 7,27,4 bolgan anaerob sharoitda
ostiriladi.
Fermentativ xossasi. Aniqlanmagan.
Antigenligi. Borreliyalarning bir qancha variantlari mavjud bolib,
ularni bir-biridan farqlash ishlarini olib borishda biologik usulni qollash
yordam beradi.
Patogenligi. Kopincha kemiruvchilar sichqonlar, olmaxonlar,
qumsichqonlar kasallanadi. Laboratoriya hayvonlaridan dengiz choch-
qachasi, kalamush, oq sichqonlar sezgir.
?
Nazorat uchun savollar
301
Chidamliligi. Epidemik qaytalama tifga oxshash.
Infeksiya manbai. Òabiiy ochogi va infeksiya manbai bolib
kemiruvchilar sichqon, olmaxonlar, qumsichqon va Ornithodoros
avlodiga kiruvchi kanalar hisoblanadi. Borreliyalar kana organizmida
butun hayoti davomida saqlanadi va nasldan naslga uzatiladi.
Òarqalish yoli. Òransmissiv yol bilan, yani qon soruvchi ha-
sharotlar orqali tarqaladi. Odamni kana chaqqanda, ularning solagi
tarkibidagi borreliyalar organizmga kiradi. Chaqqan joyida papula yuzaga
keladi.
Patogenezi. Epidemik qaytalama tifga oxshash, lekin isitma tutishi
koproq boladi. Kasallik ancha yengil otadi.
Immuniteti. Epidemik ochoqda odamlarda immunitet yosh bolalik
davridan va qonda spiroxitolizin hamda boshqa antitelolarning borligi
sababli yuzaga keladi. Asosan, shu ochoqqa kelgan odamlargina endemik
tif bilan kasallanadi. Kasallikdan song turgun bolmagan immunitet
yuzaga keladi. Epidemik qaytalama tif bilan kesishib otadigan
immuniteti yoq.
Profilaktikasi. Qurt-qumursqa va kemiruvchilarga qarshi kurash. Har
bir ochoqda oziga xos turdagi kasallik qozgatuvchisi mavjuddir.
Sanitariya-gigiyena qoidalariga rioya qilish. Maxsus profilaktikasi ishlab
chiqilmagan.
Davosi. Antibiotiklar tetratsiklin, penitsillin, levomitsetin va
boshqalar bilan davolanadi.
MIKROBIOLOGIK TEKSHIRISH
TEKSHIRISH MATERIALLARI
Bemor qoni.
Òekshirish materialini toplash
Bemordan qon.
1. Qalin tomchi preparati. Barmoqning yumshoq joyi teshiladi.
Yogsizlantirilgan buyum oynachasi barmoqdagi qonga tekkizilib,
aylanma harakat qilinib, diametri 11,5 sm. ga teng surtma tayyorlanadi.
2. Yupqa surtma tayyorlash. Yogsizlantirilgan buyum oynachasining
chetki qismiga barmoqdan qon tomiziladi va ikkinchi buyum
oynachasining cheti bilan qon tomchisi oynachada yoyilib chiqiladi.
Asosiy tekshirish usullari
1. Mikroskopik.
2. Biologik.
302
Mikroskopik usul
Bemor harorati kotarilgan vaqtda qon olib, yuqorida korsatil-
ganidek, surtma preparat tayyorlanadi. Quritilib, fiksatsiya qilinmagan
holda uning ustiga 0,5 ml Gimza boyogi tomiziladi. Bir necha
daqiqadan song tomchida gemoglobin bulutchalari hosil boladi.
Shundan song boyoq tokilib, yangi boyoq tomchisi tomiziladi.
Bu boyoq 2030 daqiqa ushlanadi, songra asta-sekin yuviladi va
mikroskop ostida tekshiriladi. Borreliyalar binafsharangda korinadi.
Diqqat! Òomchi fiksatsiya qilinmaganligini esda tutish lozim.
Òomchini suvli fuksin boyogida ham boyash mumkin. Bunda
borreliyalar pushti rangga kiradi.
Negativ preparatlarni qorongilashgan mikroskopik maydonda
korish mumkin.
Biologik usul
Bemordan 23 ml qon olinadi va dengiz chochqachasi terisi
ostiga yuboriladi yoki koz, burun shilligiga tomiziladi.
Endemik qaytalama tif mavjud bolsa, hayvonlar 58 kunda
kasallanadi. Hayvon qonidagi borreliyalar aniqlanadi.
Epidemik qaytalama tif qozgatuvchisiga dengiz chochqachalari
sezuvchan emas.
1. Epidemik va endemik qaytalama tif diagnostikasida qanday tekshirish
materiali olinadi?
2. Diagnostikada qollaniladigan asosiy tekshirish usullarini aytib
bering.
3. Epidemik va endemik qaytalama tifni qanday farqlash mumkin?
39-bob.
LEPTOSPIROZ QOZGATUVCHISI
Patogen spiroxetalar Spirochaetaceae oilasiga, Leptospira avlodiga
kiradi. Leptospiralarni 1915-yili yapon olimlari Inado va Ido aniq-
lagan.
Leptospira avlodiga odam va hayvon organizmida kasallik keltirib
chiqaradigan kopgina guruh mikroorganizmlari kiradi.
?
Nazorat uchun savollar
303
Morfologiyasi. Leptospiralar spiralsimon, 620x0,10,25 mkm
uzunlikda, 1218 ta buramadan iborat bolib, buramalari mayda,
bir-biriga zich joylashgan va ularning uchi ilmoqqa oxshashdir.
Leptospiralar juda harakatchan, spiroxetalarga xos barcha harakatlanish
usullarida harakatlanadi.
Ular anilin boyoqlarida yaxshi boyalmaydi. Shuning uchun
patologik materiallarda va kulturalarda ularni aniqlash maqsadida
qorongilashgan maydon yoki kumush bilan qoplash usulida organiladi.
Bunday usullarda ular jigarrang bolib korinadi.
Kultural xossasi. Leptospiralar jiddiy aerob. Suyuq va yarimsuyuq
oziqa muhitlariga quyon zardobi qoshilganda, 2830°C haroratda va
pH 7,27,4 bolgan sharoitda osadi. Bu muhitlarda ular sekin (710
kun ichida) osadi va leptospiralar bolinib kopaygan bolsa ham
muhit tiniq qoladi. Leptospiralar osganligini ezilgan tomchi preparati
tayyorlab, mikroskop ostida (qorongi maydonda) quritib aniqlanadi.
Qon zardobi qoshilgan zich oziqa muhitida 57 kunlarda osadi,
suniy oziqa muhitida leptospiralar virulentlik xossasini yoqotadi.
Fermentativ xossasi. Leptospiralarda katalaza, oksidaza, liðaza va
boshqa fermentlar aniqlangan.
Òoksigenligi. Leptospiralarda endotoksin borligi isbotlanmagan.
Antigenligi. Leptospiralarning antigenlik tuzilishi monoretseptor
zardoblar bilan mikroagglutinatsiya reaksiyasi qoyish orqali aniq-
lanadi. Mana shu reaksiyaga asoslanib, leptospiralar 19 ta seroguruhga
va 159 serovarga bolinadi. Har bir seroguruh va serovar ozining
nomiga ega.
Chidamliligi. Leptospiralar yuqori haroratga sezgir: 56°C harorat
tasirida 30 daqiqadan song nobud boladi. Past haroratda ular
(7080°C) uzoq vaqt saqlanadi. Leptospiralar quritishga, kislota
va ot suyuqligiga ham sezgirdir. Dezinfeksiyalovchi moddalar tasirida
bir necha daqiqadan song nobud boladi. Leptospiralar suvda ikki
oygacha, sut mahsulotlarida, nonda bir necha soatgacha saqlanadi.
Do'stlaringiz bilan baham: |