18 – ish. Achitqidan nukleoproteinlarni ajratib olish va gidrolizlash. Kerakli asbob va reaktivlar: chinni hovoncha, pipetka, laboratoriya tsentrifugachi, tsentrifuga tarozisi, shisha tayoqcha, 25-30 sm uzunlikdagi shisha nay yoki qaytar



Download 33,3 Kb.
bet7/20
Sana01.01.2022
Hajmi33,3 Kb.
#294646
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   ...   20
Bog'liq
DNK

Ishning bajarilishi.

1-bosqich. Jigar yoki qora taloqni ishqor ta‘sirida gidrolizlash.

100 mg to’qima tsentrifuga probirkasiga solinib, uning ustiga 1 ml 1 n NaOН eritmasidan quyib, qaynab turgan suv hammomiga 15 minut quyiladi. Vaqti-vaqti bilan probirkadagi aralashma shisha tayoqchyaa bilan aralashtirib turiladi. Shu vaqt ichida to’qima to’la erib ketadi.

2-bosqich. Oqsillar va DNK ni cho’ktirish.

Gidrolizat asta-sekin avvalo xona temperaturasigacha, so’ngra muz yordamida 00S gacha sovitiladi. Uning ustiga NaCl ning 20% li sirka kislotadagi to’yingan eritmasidan 0,5 ml qo’shib, oqsil cho’ktiriladi. 5 minutdan keyin aralashma 5 minut minutiga 3000 marta aylanish tezligida tsentrifugalanadi.

Tsentrifuga probirkalaridan biriga 6 ml etil spirt qo’yib, sovitib qo’yiladi. Sovitilgan spirt ustiga tsentrifugat (cho’kma ustidagi suyuqlik) qo’yiladi: bu vaqtda DNK cho’kadi, RNK va tarkibida fosfor bor boshqa birikmalar spirtli eritmada qoladi. DNK ni to’laroq cho’ktirish uchun, tsentrifugalanganda olingan oqsil cho’kmasini 1 ml 1 n li NaOН da (sovitilgan) eritiladi va tezda NaCl ning 20% li sirka kislotadagi to’yingan eritmasidan 0,5 mo qo’shib, qaytadan cho’ktiriladi. Aralashma 5 minut minutiga 5000 marta aylanish tezligida tsentrifugalanadi. Tsentrifugat birinchi DNK cho’ktirilgan spirli aralashmaga qo’yiladi. Probirkadagi suyuqlik yaxshilab aralashtirilgach, DNK ni to’laroq cho’ktirish uchun muz hammomiga 1 soat qoldiriladi. Bir soatdan keyin probirkadagi aralashma 5 minut yuqori tezlikda-minutiga 5000 marta aylanish tezligida tsentrifugalanadi; tsentrifugat to’kib tashlanadi. DNK cho’kmasi esa 2 marta 5% li trixlorsirka kislota bilan yuviladi. DNK miqdorini uning tarkibidagi fosforga yoki dezoksiribozaga qarab aniqlash mumkin.


Download 33,3 Kb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   ...   20




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©hozir.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling

kiriting | ro'yxatdan o'tish
    Bosh sahifa
юртда тантана
Боғда битган
Бугун юртда
Эшитганлар жилманглар
Эшитмадим деманглар
битган бодомлар
Yangiariq tumani
qitish marakazi
Raqamli texnologiyalar
ilishida muhokamadan
tasdiqqa tavsiya
tavsiya etilgan
iqtisodiyot kafedrasi
steiermarkischen landesregierung
asarlaringizni yuboring
o'zingizning asarlaringizni
Iltimos faqat
faqat o'zingizning
steierm rkischen
landesregierung fachabteilung
rkischen landesregierung
hamshira loyihasi
loyihasi mavsum
faolyatining oqibatlari
asosiy adabiyotlar
fakulteti ahborot
ahborot havfsizligi
havfsizligi kafedrasi
fanidan bo’yicha
fakulteti iqtisodiyot
boshqaruv fakulteti
chiqarishda boshqaruv
ishlab chiqarishda
iqtisodiyot fakultet
multiservis tarmoqlari
fanidan asosiy
Uzbek fanidan
mavzulari potok
asosidagi multiservis
'aliyyil a'ziym
billahil 'aliyyil
illaa billahil
quvvata illaa
falah' deganida
Kompyuter savodxonligi
bo’yicha mustaqil
'alal falah'
Hayya 'alal
'alas soloh
Hayya 'alas
mavsum boyicha


yuklab olish