«fizika va kimyo» kafedrasi hayvonlar biokimyosi

Ishning borishi:
Kreatin miqdorini aniqlash uchun kolibrlangaan grafik 
tuziladi. Buning uchun bir necha probirkalar olib, 0,1- 0,5 ml mol kreatinni bor 
standart eritmadan 1 ml dan solinadi. 1ml dan 1% li γ- naftolning ishqordagi 
eritmasidan va 0,5 ml 0,05% li diatsetal eritmasidan solinadi. Namunalarning 
hajmi distillangan suv bilan 5 ml ga etkaziladi, so‘ngra yaxshilab aralashtiriladi 
va 30 minut xona haroratida qorong‘u joyda qoldiriladi. Keyin spektrofotometrda 
540 nm to‘lqin uzunligida optik zichligi o‘lchanadi. Olingan natijalardan grafik 
chiziladi.
Tekshirilayotgan namunalardagi kreatinni aniqlash uchun ham yuqorida 
yozilgan tartibdagidek ish olib boriladi. Namunaning optik zichligi belgilangandan 
so‘ng, grafikdan qancha miqdorda kreatin borligi aniqlanadi. 

---

63 - tajriba.
 
Kreatinfrsfatni kreatinga qarab aniqlash
Kreatinfosfatni aniqlash shunga asoslanganki, u ammoniy molibdatning 
kislotadagi eritmasi ta‘sirida anorganik fosfat kislota va kreatinga parchalanadi. 
Ishqoriy muhitda pikrin kislotasi bilan hosil qilgan rangning optik zichligi 
spektrofotomertda o‘lchab aniqlanadi. 
Kerakli asboblar
: probirka, termostat, filtr qog‘oz, spekrofotometr. 
Reaktivlar.
1,4% li ammoniy molibdatning 2n. sulfat kislotadagi eritmasi, 
0,7% li ammoniy molibdatning 1n. sulfat kislotadagi eritmasi, natriy ishqorining 
2n. eritmasi, pikrin kislotasining to‘yingan eritmasi, kreatinni stardart eritmasi, 
universal indikator. 
Ishning borishi
:
 
Neytrallangan oqsilsiz eritmadan 1-2 ml olib probirkaga 
solinadi va teng hajmda 1,4% li ammoniy molibdatning 2n. sulfat kislotadagi 
eritmasidan qo‘shiladi. Probirka chayqatilgach, 40 minut 
37˚C
haroratda 
termostatda qoldiriladi. Shundan keyin filtrlanadi, filtratdan 1.5-3 ml olib, 2n. 
natriy ishqorining eritmasi bilan neytrallanadi. Eritmaga 0,15 ml 2n. natriy 
ishqorining eritmasidan va 0,25 ml pikrin kislotasining to‘yingan eritmasidan 
qo‘shib, hajmi distillangan suv bilan 5 ml ga etkaziladi. So‘ngra uni aralashtirib 
10-15 minut rang hosil bo‘lishi uchun qoldirish kerak. 
Shundan so‘ng spekrofotometrda 540 nm to‘lqin uzunligida optik zichligi 
o‘lchanadi. Namunaning optik zichligiga qarab, kalibrlangan grafikdan qancha 
miqdorda kreatin borligini aniqlash mumkin. Kalibrlangan grafik tuzish uchun esa 
probirkalarga 1ml dan 0.1-0.5 mkmol kreatinning standart eritmasidan solib, 
yuqorida yozilgan sharoitda ish olib boriladi. 
Muskulda kreatinfosfatning kontsentratsiyasi quyidagi formula bilan 
hisoblanadi:
с
а
Х
2
100
10
Bu erda: