Biologiya fakulteti genetika kafedrasi fan: genetika va genomika asoslari

Polimeraza zanjiri reaktsiyasi tushunchasi
Polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PCR) 1983da Carrie B. MULLIS tomonidan ochilgan, u uchun muallif Nobel mukofoti bilan taqdirlangan. PCR birinchi marta 1985 yilda Cetus tomonidan amalga oshirildi va PCR da termostabil DNK polimerazidan keyingi foydalanish uni qo'llash imkoniyatini sezilarli darajada oshirdi .Ushbu reaktsiya genomning maqsadli qismlarini bir necha marta ko'paytirish (amplifikatsiya qilish) imkonini beradi.Ushbu jarayonni amalga oshirish uchun in vitro, tanlangan DNK marker qismini sintez qilish uchun urug ' sifatida xizmat qiluvchi primerlar deb ataladigan ikkita genetik namunadan foydalaning. PRIMERLARGA qo'shimcha ravishda PCR ning asosiy tarkibiy qismlari quyidagilardir: Taq - DNK polimeraza fermenti; 4 turi deoksinükleosid trifosfat (dNTF); kopyalanan DNK (matritsa); Mg+2 ionlari. Yordamchi komponentlar bufer eritmasi va mineral moydir. Sinovga kiritilganda, primerlar DNKning kerakli qismiga qo'shilib, shu bilan ikki tomonlama boshlang'ich maydonini tashkil qiladi. Primerlarni biriktirgandan so'ng, DNK polimeraza fermenti yordamida primerlarning 5 uchlari orasida joylashgan maxsus uchastkaning takrorlanishi boshlanadi. Yangi sintezlangan DNK qismlari keyingi amplifikatsiya davrida yangi iplarni sintez qilish uchun matritsa bo'lib xizmat qiladi. Bu PCR da zanjirli reaktsiya. 30-40 tsikllari davomida DNK miqdori agaroz yoki poliakrilamid Jelda elektroforezdan keyin reaktsiya natijalarini ingl.
Hozirgi vaqtda DNK polimorfizmiga asoslangan o'nlab marker tizimlari eksperimental ravishda sinab Ko'rildi. Quyida eng muhim tasvirlangan.
Birinchisi, tasodifiy tanlangan DNK ketma - ketligi (tasodifiy amplified polimorfic DNK-RAPD) usuli bo'lib, unda standart primer to'plamlari ishlatiladi; tasodifiy amplifikatsiya qilingan polimorf DNKning tahliliga asoslangan. Ushbu turdagi tahlilni amalga oshirishda polimorfizm elektroforetik spektrlarda DNKning o'ziga xos qismlari yo'qligi va primer ekish joylarida DNK ketma - ketliklari o'rtasidagi farqlar tufayli mavjudligi sifatida tavsiflanadi.