Restriktazalar. Gen muhandisligida foydaliligi nuqtayi nazaridan maxsus
endonukleazalar alohida guruhni tashkil etadi. Tabiatda biror mikroorganizm
hujayrasiga tashqaridan yot genetik material kirsa, u darhol hujayra nukleaza
fermentlari ishtirokida parchalab tashlanadi. Genlar ustida bevosita muolajalar
o‘tkazish usullarining takomillashtirilishi restriksion endonukleazalar (restrik-
tazalar)ning ochilishi bilan bog‘liqdir. Esherichia coli (E.coli)ning alohida
shtammi DNKsi boshqa shtamm hujayrasiga kiritilganda, odatda, genetik
faollik ko‘rsata olmaydi. Chunki u maxsus fermentlar-restriktazalar bilan tezda
bo‘laklarga bo‘lib yuboriladi. Hozirgi vaqtda turli xil mikroorganizmlardan har
xil restriktazalar ajratib olingan.
Restriktazalar endonukleazalarning DNKni muayyan maxsus ketma-
ketliklari restriksiya saytlari (nuqtalari)ni tanib kesadigan, gidroliz qiladigan
guruhi hisoblanadi. Yot DNKni parchalaydigan har qanday restriktaza fermenti
DNKni o‘ziga mos 4–6 ta nukleotid ketma-ketligini tanib kesadi, natijada
to‘mtoq yoki yopishqoq uchli bir nechta DNK bo‘laklari hosil bo‘ladi.
Yopishqoq uchli DNK bo‘laklarining qo‘sh zanjiri bir necha nukleotidga siljigan
holda bo‘laklarga ajraladi. Xuddi shunday bo‘laklar o‘zaro komplementar
juftlar hosil qilib, birikish xususiyatiga ega. Olingan DNK bo‘lagini plazmida
yoki bakteriya virusiga kiritish mumkin.
Restriktazalarni nomlashda ferment ajratib olingan bakteriya turining
lotincha nomini bosh harfl ari va qo‘shimcha belgilaridan foydalaniladi. Chunki
bir turdagi bakteriyalardan bir necha xil restriktazalar ajratib olingan bo‘lishi
mumkin.
Shu bilan birga qo‘sh zanjir DNK molekulasini «yopishqoq» uchlar hosil
qilib kesuvchi restriktazalar (EcoR I), «to‘mtoq» uchlar hosil qilib kesuvchi
restriktazalar (Hpa I) ham mavjud. Restriktazalar hosil qilgan «yopishqoq»
uchlardan foydalanib, har xil DNK bo‘laklarini bir-biriga bog‘lash soddalashadi.
Ana shu xususiyati tufayli bu xil restriktazalar gen muhandisligida keng
qo‘llaniladi.
Restriktaza fermentlarining ochilishi DNK molekulasini bo‘laklarga bo‘lib,
elektroforez qurilmasida o‘ta aniqlik bilan bir-biridan ajratib olish imkonini
berdi. Bu usulda ajratib olingan DNK bo‘laklaridan gen muhandisligida
foydalaniladi.
Restriktaza tanib kesadigan nukleotid-
lar izchilligi
Restriktazaning
qisqartma nomi
Restriktaza ajratib olingan
mikroorganizm
EcoR I
Esherichia coli bakteriyasi.
1 – restriksiya sayti.
Hpa I
Haemophilus parainfl uen-
zae