Achitqidan nukleoproteidlarni ajratish

Achitqidan nukleoproteidlarni ajratish

Kerakli reaktiv va asboblar: a) achitqi; b) dietil efiri; v) 0,4% NaOH; g) 5% sirka kislotasi; d) yaxshilab yuvib qizdirilgan shisha kukuni yoki qum.
Hovonchaga 5g achitqi olib ustiga 1 ml dietil efiri va 1 ml suv qo‗shilib namlantiriladi, so‗ng ustiga ozgina shisha kukuni yoki qum qo‗shib 0,4 % NaOH bilan oz-oz miqdorda (5-10 ml) qo‗shib yaxshilab tuyiladi. Hammasi bo‗lib 50 ml ishqor sarflanadi. Bu jarayon 15-20 daqiqa davom yetadi. Hosil bo‗lgan massa filtrlanadi yoki 10 daqiqa davomida sentrifugalanadi (minutiga 2500g). Filtrat yoki sentrifugat stakanga quyilib ustiga tomchilatib 5% SN₃SOON dan nukleoproteidlar to‗liq cho‗kmaga tushgunga qadar tomiziladi. CHo‗kma sentrifugalanib ajratib olinadi.

DNK ga xos sifat reaksiyasi.

DNK dezoksiribozalarga hos bo‗lgan rangli reaksiyalar orqali aniqlanadi. Ko‗pincha difenilamin bilan boradigan reaksiya qo‗llaniladi (C₆H_s-NH-C₆H_s). Difenilamin dezoksiriboza yoki DNK bilan ko‗k rangli, riboza yoki RNK bilan yashil rangli birikma hosil qiladi.
Kerakli asbob va reaktivlar: a) dezoksiribonukleoproteidlar cho‗kmasi (avvalgi ishga qaralsin) b ) difenilamin reaktivi: 1 gr difenilamin 100 ml muzlagan sirka kislotasida eritiladi. Eritmaga 2,75 g konsentrlangan N₂SO₄ qo‗shiladi (Ro= 1,836) v) 0,4% NaOH eritmasi.
Dezoksiribonukleitidlar cho‗kmasining bir qismi probirkaga solinadi va 0,5- 1ml NaOH qo‗shiladi (cho‗kma eriguncha). Eritmaga teng hajmda difenilamin reaktivi qo‗shildi. Reaksiya boshida hosil bo‗lgan cho‗kma reaktivning keyingi porsiyalari yordamida eritiladi, so‗ng 15-20 diqiqa davomida suv hammomida qizdiriladi. Natijada ko‗k rang hosil bo‗ladi.