6-мавзу. Геномнинг ДНК даражасидаги таҳлили. Режа

Днк ни ажратиб олиш

ДНК фрагментларининг амплификацияси

ДНК амплификал маҳсулотларининг детекцияси.

Пзр натижасида ДНК занжири фрагментининг копияси олинади. Специфик аниқ организмлар учун шунақа аниқ бир участкаларни қидириш талаб этилади.
ПЗР жараёни қуйидаги босқичларда амалга ошади.

ПЗР механизми

Пзр методининг моҳияти

• 
  Тест системалар-ДНК амплификацияларини тузишда одамдаги бактерия ва вирусларни, турли патогенларни аниқлаш учун хизмат қилади.
  
• 
  Кўпгина патогeн бактериялар учун ПЗР методи эффектли ҳисобланади. Лабораторияларда бактериялар миқдори кўпайтирилади. Бунда аввал ДНК нинг керакли қисмлари танлаб олиниб керакли миқдоргача ушбу метод ёрдамида кўпайтирилади.
  
• 
  ДНК чипи-генетик мутациялар ёки силжишларни аниқлаш учун махсус чип, касалликларни аниқлаш ҳамда шу касаллик белгиларини ўзида сақловчи генетик карталаштирилган ДНК нинг айнан нусхаси кўчирилган махсус лабораторияларда ишлаб чиқилган микрочип кўринишидаги қурилма.
  
• 
  SNP lex нуклеотид полиморфизми-генотипларни таҳлил қилиш учун полимераза занжир реакцияси ва капилляр электрофорездан фойдаланишдир.
  
• 
  Днк микролизаси методи-Днк молекулаларини шиша, пластмасса ёки силикон платформасида ташкил этиш. Кўп сонли ДНК фрагментлари тузилмаси махсус ДНК чиплардаги маълумотлар билан текширилади.
  

Ажратилган геном ДНК си ва ПЗР таҳлилини гель-электрофорез усулида текшириш
Дастлаб намуналарнинг ДНК концентрацияси 0,9 % ли агароза гелида, аниқ (25 нг/µл) концентрацияли лямбда (λ) фагининг ДНКсига таққосланиб, гель электрофорез усули ёрдамида аниқланади. Сўнгра, ПЗР амплификация маҳсулотлари 3,5 % агароза гелида текширилади. Геллар этидиум бромид ёрдамида бўялади ва ултрабинафша нури таъсир эттирилиб, Alpha Imager гел-ҳужжатлаштирувчи қурилмада суратга олинади.