6-мавзу. Геномнинг ДНК даражасидаги таҳлили. Режа


ДНК ажратиш учун тўқима танлаш



Download 0,55 Mb.
bet2/3
Sana27.05.2022
Hajmi0,55 Mb.
#610696
1   2   3
Bog'liq
2 5361977583397246452

ДНК ажратиш учун тўқима танлаш. ҳужайралар сони кам ва ДНК миқдори кўп бўладиганларини, имкон даражасида ДНК тўқимадан осон ажраладиган шунингдек, ҳужайралари оқсиллар, липидлар ёки полисахаридлар билан тўйинмаган бўлиши керак.

  • Тўқималарни ҳужайра даражасигачага парчалаш. ДНК тўқимасини ҳужайралар даражасигача парчалаш учун уни фарфор идишга солинади ва устига -800C ли суюлтирилган азот қуйилиб, чинни ховонча ёрдамида эзилади.

  • Йирик молекулаларнинг ажралиши.

    Ҳужайра мембранаси ва унинг ядросини эритиш учун 650C хароратда 45 дақиқа давомида 2хCТАВ буфферида инкубация қилинди.

    • Оқсиллардан тозалаш. хлороформ: изоамил спирти (24:1) аралашмаси қўшилиб, Сентрафуга қилинади. Супернатант янги пробиркага олинади ва устига (суюқликдаги ДНКни ивиши учун) CТАВ пресипитация буфферидан қўшилади.

    • ДНК суспензиясини РНК дан тозалаш. РНКаза фрагменти қўшилган юқори тузли буффер билан қайта ишланади.

    • ДНК молекулаларини чўктириш. 96% ли этил спирти қўшилади. ДНК центрафугада чўктириб олинади.

    • ДНК ни тузлардан тозалаш ва эритиш. 70% ли этил спирти билан икки маротаба ювилади.




    Полимераза занжир реакцияси (PZR). Полимераза занжир реакцияси (PZR) методи молекуляр биологияда жуда муҳим ўрин тутиб, ушбу усул 1983-йили Колифорниядаги Сетус компаниясининг биохимиги Кери Мюллис томонидан кашф этилган. Бу кашфиёти учун Кери Мюллис 1993-йилда Нобел мукофотига сазовор бўлган. Бу усулнинг яратилишига ДНК полимераза ферментининг яратилиши сабаб бўлган. Ушбу фермент ПЗР методи бўйича борадиган анализ жараёнларини катализлайди ва назорат қилади. Бу ферментнинг муҳим аҳамияти шундаки, у иссиқликка чидамли бўлиб, анча юқори ҳароратда ҳам ўз фаоллигини йўқотмайди. Унинг фаоллигини намоён қилувчи оптимал температура 72С.
    ПЗР анализи 3та босқичда амалга ошади:
  • 1   2   3




    Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©hozir.org 2024
    ma'muriyatiga murojaat qiling

    kiriting | ro'yxatdan o'tish
        Bosh sahifa
    юртда тантана
    Боғда битган
    Бугун юртда
    Эшитганлар жилманглар
    Эшитмадим деманглар
    битган бодомлар
    Yangiariq tumani
    qitish marakazi
    Raqamli texnologiyalar
    ilishida muhokamadan
    tasdiqqa tavsiya
    tavsiya etilgan
    iqtisodiyot kafedrasi
    steiermarkischen landesregierung
    asarlaringizni yuboring
    o'zingizning asarlaringizni
    Iltimos faqat
    faqat o'zingizning
    steierm rkischen
    landesregierung fachabteilung
    rkischen landesregierung
    hamshira loyihasi
    loyihasi mavsum
    faolyatining oqibatlari
    asosiy adabiyotlar
    fakulteti ahborot
    ahborot havfsizligi
    havfsizligi kafedrasi
    fanidan bo’yicha
    fakulteti iqtisodiyot
    boshqaruv fakulteti
    chiqarishda boshqaruv
    ishlab chiqarishda
    iqtisodiyot fakultet
    multiservis tarmoqlari
    fanidan asosiy
    Uzbek fanidan
    mavzulari potok
    asosidagi multiservis
    'aliyyil a'ziym
    billahil 'aliyyil
    illaa billahil
    quvvata illaa
    falah' deganida
    Kompyuter savodxonligi
    bo’yicha mustaqil
    'alal falah'
    Hayya 'alal
    'alas soloh
    Hayya 'alas
    mavsum boyicha


    yuklab olish