Fluorophore
Excitation
Category
LED
Designatio
n
LED
FWHM
Bandwidt
h
(nm)
Power
mW/Cm
2
(LLG)
a
Power
mW/Cm
2
(Mirror)
b
Fluorescenc
e
Filter Set
Excitatio
n
Bandwidt
h
(nm)
Power
mW/Cm
2
(Filter
Set)
b
Ultraviolet
(DAPI,
BFP)
400
393-408
748
23.3
DAPI
c
365/10
0.09
Cyan
(ECFP)
445
433-453
819
24.2
ECFP 114
d
440/20
9.0
Blue (EGFP,
Cy2, AF488)
465
449-473
777
21.8
ET-GFP
c
470/40
17.5
Blue-Green
(EYFP)
505
491-520
308
6.4
ET-YFP
c
500/20
2.8
Green
(AF532)
525
503-539
273
6.6
TRITC
HQ
c
545/30
1.5
Green
(TRITC,
Cy3, AF546)
535
503-573
383
9.5
TRITC
HQ
c
545/30
2.6
Green-
Yellow
(TRITC,
Cy3)
565
515-594
333
7.3
TRITC
HQ
c
545/30
1.9
Green-
Yellow
(TRITC,
Cy3)
565
515-594
333
7.3
TR HQ
c
560/55
3.2
Yellow (TR,
MitoTracke
r)
585
547-613
348
5.9
TR HQ
c
560/55
2.8
Orange (TR,
mCherry)
595
587-604
112
2.7
TR HQ
c
560/55
0.51
Red
(Cy5,
AF635)
635
620-637
370
4.6
Cy5 XF110
d
630/50
3.5
a Suyuq yorug'lik qo'llanmasida o'lchanadib Maqsadda o'lchanadi FPcChroma
filtrlaridadOmega filtrlarida
1-jadvalda hozirgi vaqtda floresan mikroskopiyada qo'llaniladigan bir nechta
yaqin ultrabinafsha va ko'rinadigan yorug'lik chiqaradigan LEDlar uchun optik
chiqish quvvati qiymatlari va FWHM spektral tarmoqli kengligi keltirilgan. Har bir
LED uchun quvvat millivatt/sm2 da kataloglangan va suyuq yorug'lik yo'riqnomasi
(1-jadvaldagi LLG ustuni) chiqishida, shuningdek mikroskop ob'ektivining fokus
tekisligida (40x ftorit quruq, raqamli diafragma = 0,85) o'lchangan. fotodiodga
asoslangan radiometr. Yorug'likni ob'ektiv orqali va radiometr datchigiga
proyeksiya qilish uchun 350 dan 800 nanometrgacha bo'lgan 95% dan yuqori aks
ettiruvchi oyna yoki standart lyuminestsent filtri to'plami ishlatilgan (qiymatlar 1-
jadvalda mos ravishda Oyna va Filtrlar to'plami deb nomlangan ustunlarda
keltirilgan) . Mikroskopning yoritish tizimidagi yorug'lik o'tkazuvchanligini
yo'qotish optik poezddagi filtrlar, nometalllar, prizmalar va linzalar soniga qarab,
kirish quvvatining 95 dan 99 foizigacha o'zgarishi mumkin. Tashqi LED yorug'lik
manbasiga ulangan odatiy tadqiqot darajasidagi teskari mikroskop uchun suyuqlik
yorug'lik qo'llanmasidan chiqadigan yorug'likning 3 foizdan kamrog'i ob'ektiv fokus
tekisligida joylashgan ftoroforlarni qo'zg'atish uchun mavjud. Xuddi shunday
yorug'lik yo'qotilishi suyuq yorug'lik qo'llanmasi orqali mikroskopga ulangan tashqi
metall galoid yorug'lik manbalari, shuningdek chiroqxona orqali to'g'ridan-to'g'ri
yoritgichga mahkamlangan an'anaviy ksenon va simob yoyi deşarj lampalarida sodir
bo'ladi.
Tijoriy LED chiroqxonalarda har bir tajribada ishlatiladigan turli xil
floroforlar uchun mos keladigan qo'zg'alish tarmoqli kengligiga erishish uchun
individual diod modullari osongina almashtirilishi mumkin. Har bir LED
modulining intensivligi, shuningdek, aniq elektr bosqichlarida (maksimal chiqish
foizlari) mustaqil ravishda sozlanishi mumkin, shunda yorug'likning qo'zg'alish
davrlari namunaning fototoksikligini oldini olish uchun detektor sezgirligi bilan
muvozanatlashtirilishi mumkin. LEDlarning yana bir afzalligi - elektr toki
kiritilgandan so'ng to'liq intensivlikda bir zumda yoritish qobiliyati. Ark deşarjli va
cho'g'lanma lampalardan farqli o'laroq, LEDlarni qayta-qayta modulyatsiya qilish
yoki yoqish va o'chirish, ularning ishlash muddatiga salbiy ta'sir ko'rsatishi mumkin.
Bundan tashqari, mexanik qismlarsiz, to'liq elektronli diodli yoritish tizimi
deklanşör va neytral zichlikdagi filtr harakati natijasida hosil bo'lgan muammoli
tebranishlardan xoli.
Do'stlaringiz bilan baham: |