ИССЛЕДОВАНИЕ БИОСОВМЕСТИМОСТИ
ПРОИЗВОДНОГО ФУЛЛЕРЕНА C60 С L-МЕТИОНИНОМ
Иванова Д.А., Агеев С.В., Ананьева А.А., студ.
Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский
университет имени академика И. П. Павлова,
Санкт-Петербург, Россия
Научный руководитель: Семёнов К.Н., д.х.н.
Актуальность изучения водорастворимых производных фулле-
ренов связана с их широкими возможностями применения в био-
логии и медицине. Задачами данной работы являются синтез, иден-
тификация и изучение биосовместимости аддукта фуллерена C60 с
L-метионином (C60(C5H10NO2S)3, C60-Met). Синтез C60-Met про-
водился по оригинальной методике. Идентификация полученного
соединения проводилась с использованием инфракрасной и Рама-
новской спектроскопии, термогравиметрического анализа, рент-
геноструктурного анализа, рентгеновской фотоэлектронной спек-
троскопии, а также сканирующей и просвечивающей электронной
микроскопии. Исследование биосовместимости включало экспе-
рименты по влиянию C60-Met на агрегацию тромбоцитов и спон-
танный гемолиз, а также изучение цито- и генотоксичности, связы-
вания с человеческим сывороточным альбумином и определение
сайтов связывания.
Влияние на агрегационную активность в богатой тромбоцита-
ми плазме исследовали с помощью агрегометра Solar (Беларусь).
В качестве индукторов агрегации использовали динатриевую соль
аденозиндифосфата (АДФ), коллаген и адреналин. Исследование
гемолиза эритроцитов проводили путём измерения оптической
плотности супернатантов на длине волны λ = 540 нм на спектрофо-
тометре СФ-2000. Оценку цитотоксичности производного C60-Met
проводили с помощью МТТ-теста на эпителиальных клетках (HEK
293). Генотоксичность C60-Met оценивали методом ДНК-комет
с использованием мононуклеарных клеток периферической кро-
ви человека (МКПК) и проведения щелочного гель-электрофореза.
Изучение связывания C60-Met с человеческим сывороточным аль-
ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ
735
бумином (ЧСА) проводили на спектрофлуориметре Solar (Беларусь).
Регистрация спектров эмиссии осуществлялась в диапазоне длин
волн 310-450 нм и интервале температур 298,15-318,15 К; длина вол-
ны возбуждения составляла 290 нм. Измерения проводились в от-
сутствии и в присутствии маркеров сайтов связывания, в качестве
которых были использованы варфарин, ибупрофен, дигитоксин.
В результате было выявлено, что C60-Met проявляет антиагрегатив-
ные свойства и генотоксичность и не проявляет цитотоксического
действия. Анализ полученных значений констант связывания пока-
зывает, что C60-Met образует прочный комплекс с ЧСА в субдомене
IB и слабо связывается в субдомене IIIA. Отрицательные значения
ΔG в интервале температур 303,15-318,15 К свидетельствуют, что
процесс связывания производного C60-Met с ЧСА является термо-
динамически выгодным.
736
ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ
Do'stlaringiz bilan baham: |