ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА
ДВУХ НОВЫХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ
АДЕНОКАРЦИНОМЫ ЖЕЛУДКА ЧЕЛОВЕКА
Мурылёва А.А., студ., м.н.с., Синегубова Е.О., асп., м.н.с.,
Есаулкова Я.Л., м.н.с.
Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт
эпидемиологии и микробиологии им. Пастера,
Санкт-Петербург, Россия
Научный руководитель: Слита А.В., к.б.н., с.н.с.
Рак желудка занимает пятое место по распространенности
и третье место по смертности от злокачественных новообразований
в мире. Одной из причин этого является отсутствие выраженной
клинической картины на ранних этапах развития опухоли. В связи
с этим не теряют актуальности поиск и разработка эксперименталь-
ных моделей для апробации диагностических методов и терапевти-
ческих подходов к противоопухолевой терапии. В качестве таких
моделей используют перевиваемые культуры опухолевых клеток
пациента. Работа посвящена получению постоянных клеточных ли-
ний аденокарциномы желудка человека и описанию их свойств.
В результате субкультивирования клеточных изолятов от двух
пациентов были получены постоянные клеточные линии аденокар-
циномы желудка: GAC-T и GAC-P.
Клетки линии GAC-T отличаются очаговым характером роста и
имеют морфологию, характерную для эпителиальных клеток, кле-
точные островки в процессе роста сливаются в монослой. Клетки
сильно вакуолизированные. Иммуногистохимический анализ по-
казывает, что индекс пролиферации культуры очень высок: актив-
ность Ki-67 наблюдается в 95% клеток, уровень экспрессии мем-
бранного белка EpCam средневысокий — 3,5%, что характерно для
рака желудка. Клетки, составляющие клеточные полиморфные кла-
стеры, имеют крупное ядро с грубым глыбчатым хроматином, вы-
ступающими ядрышками, неравномерной, васкуолизированной
цитоплазмой, также встречаются единичные перстневидные клетки
с большим количеством патологических митозов. В биоптате опу-
ОНКОЛОГИЯ, ОНКОГЕМАТОЛОГИЯ И ИХ БИОМЕДИЦИНСКИЕ ОСНОВЫ
459
холи, как и в культуре клеток, экспрессия цитокератинов 7 и 20 не
обнаружена. Полученные данные позволяют сделать вывод о соот-
ветствии полученной культуры исходному материалу.
Кроме того, в клетках обеих линий выявлена ядерная экспрессия
р53, характерная для низкодифференцированных опухолей.
Анализ коротких тандемных последовательностей показал при-
надлежность GAC-P к линиям аденокарциномы желудка челове-
ка. Клетки этой линии отличаются мезенхимальной морфологией
и сильной вакуолизацией, в них содержится муцин; в культуре
встречаются перстневидные клетки, что может говорить о диффуз-
ном характере роста опухоли в организме. Исходя из этого, можно
предположить, что в клетках опухоли GAC-P произошёл эпители-
ально-мезенхимальный переход, что подтверждается отсутствием
экспрессии мембранного белка EpCam. Пролиферативная актив-
ность культуры высокая: Ki-67 ≥90%. Клетки GAC-P чувствительны
к заражению вирусом герпеса первого типа, аденовирусом пятого
типа и бетакоронавирусом штамма OC-43.
460
ОНКОЛОГИЯ, ОНКОГЕМАТОЛОГИЯ И ИХ БИОМЕДИЦИНСКИЕ ОСНОВЫ
Do'stlaringiz bilan baham: |