Xxiv международная медико-биологическая конференция молодых исследователей Фундаментальная наука и клиническая

САЙЛЕНСИНГ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА 
FLI1 КАК НОВЫЙ МЕТОД ИЗУЧЕНИЯ МЕХАНИЗМОВ 
РАЗВИТИЯ СОСУДИСТОГО ФИБРОЗА ПРИ 
ПРЕЭКЛАМПСИИ
Надей О.В., асп., м.н.с., Ершов И.А., асп., Петрова Т.И. 
Институт эволюционной физиологии и биохимии 
им. И.М. Сеченова РАН,
Санкт-Петербург, Россия
Научные руководители: Агалакова Н.И., к.б.н., Багров А.Я., д.м.н.
Преэклампсия (ПЭ) представляет собой осложнение беремен-
ности, сопровождающееся гипертензией, и является одной из глав-
ных причин материнской и младенческой гибели. Хотя механизмы 
развития ПЭ до сих пор плохо понятны, предыдущие исследования 
показали, что важную роль в патогенезе этого синдрома играют 
кардиотонические стероиды, в частности маринобуфагенин (МБГ), 
избыточный синтез которого подавляет активность транскрипци-
онного фактора Fli1 и увеличивает синтез коллагена в сосудах. Мы 
предположили, что именно Fli1 является важнейшим компонентом, 
вовлечённым в развитие сосудистой дисфункции. Целью работы 
было подтвердить ключевую роль Fli1 в патогенезе ПЭ, используя 
новый экспериментальный подход — оценку экспрессии ключевых 
факторов развития ПЭ после подавления активности Fli1 методом 
сайленсинга гена (РНК-интерференции (siRNA)) в эксплантатах ум-
биликальных артерий 
in vitro
.
Для генетических модификаций были использованы фрагмен-
ты пуповинных артерий, выделенных из пуповин, полученных от 
женщин с неосложнённой беременностью сразу после родов. Транс-
фекция проводилась с 200 нМ векторов Fli1 siRNA (Santa Cruz 
Biotechnology, USA) в течение 24 ч в среде DMEM при 37°С и атмос-
фере 95% О
2 
/ 5% СО
2
, затем эксплантаты сосудов инкубировали 24 
ч в тех же условиях без векторов. Эффективность трансфекции и 
изменения экспрессии компонентов про-фибротических сигналь-
ных каскадов оценивали методом иммуноблоттинга в гомогенатах 
сосудов.

---

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ПАТОФИЗИОЛОГИЯ
631
Трансфекция Fli1siRNA в изолированные фрагменты умбили-
кальных артерий, полученные от здоровых рожениц, индуциро-
вала снижение уровня экспрессии Fli1 на 60-70%, увеличение фос-
форилирования РКСдельта на 50%, а также увеличение синтеза 
про-коллагена (proCOL) и коллагена-1 (COL1). Эти результаты пол-
ностью согласуются с последовательностью событий, наблюдаемых 
как у пациенток с ПЭ, так и у животных с экспериментальной ПЭ: 
PKCдельта — Fli1 — proCOL — COL1. В противоположность это-
му, подавление экспрессии Fli1 не привело к изменению экспрес-
сии других известных про-фибротических индукторов — цитокина 
TGF-бета и одного из его эффекторов SMAD2. Таким образом, мы 
впервые показали, что снижение экспрессии Fli1 в эксплантатах 
умбиликальных артерий, полученных от здоровых рожениц, с по-
мощью трансфекции Fli1 siRNA приводит к развитию событий по 
«преэкламптическому» фенотипу и появлению признаков сосуди-
стого фиброза 
in vitro
.
Работа поддержана грантом РНФ 18-15-00222. Авторы выра-
жают благодарность руководителям к.б.н. Н.И. Агалаковой и д.м.н. 
А.Я. Багрову.
 

---

632
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ПАТОФИЗИОЛОГИЯ