|
104
конфокальная лазерная сканирующая микроскопия
в диагностике новообразований кожи
В последние годы одним из методов неин-
вазивного обследования кожи стала конфо-
кальная лазерная сканирующая микроскопия
(КЛСМ) [99; 114–116]. В условиях
in vivo
КЛСМ
отображает в реальном времени микроана-
томические кожные структуры. В сочетании
с клинической оценкой и дерматоскопией
КЛСМ становится ценным дополнительным
инструментом для неинвазивной диагностики
опухолей кожи [117].
Конфокальная микроскопия позволяет полу-
чить изображение эпидермиса и поверхност-
ной части дермы. Как и дерматоскопия, КЛСМ
за счет получения изображения в горизонталь-
ной плоскости позволяет оценить патологиче-
ские изменения тканей кожи. При конфокаль-
ной микроскопии контрастные изображения
«оптических» срезов эпидермиса и верхней
части дермы на клеточном уровне, ориенти-
рованных в горизонтальной плоскости, по раз-
решению сопоставимы с обычной световой
микроскопией. Глубина визуализации ново-
образования зависит от длины волны лазер-
ного излучения: при длине волны 488 нм она
достигает 50 нм; при длине 1064 нм – 400 нм.
Контрастное изображение получается за счет
различий в индексе преломления органелл и
других клеточных микроструктур, которые вы-
глядят более светлыми на фоне подлежащих
структур [118].
Конфокальная микроскопия – многообе-
щающий практический инструмент для диф-
ференциальной диагностики и мониторинга
пигментированных и непигментированных но-
вообразований кожи. Очень важно, что разре-
шение, которое дает КЛСМ при изучении кожи,
вполне сравнимо с таковым при гистологиче-
ском исследовании – латеральное разреше-
ние составляет менее 1 мкм, а вертикальное –
от 3 до 5 мкм [119].
Принимая во внимание все исследования
по КЛСМ, касающиеся диагностической точ-
ности при меланоцитарных новообразовани-
ях кожи (в том числе меланоме), чувствитель-
ность и специфичность метода составляют
приблизительно 90 % и 86 % соответственно
[120; 121]. КЛСМ может использоваться не толь-
ко для диагностики, но и для выбора места би-
опсии, оценки границы новообразования пе-
ред хирургическим иссечением и контроля за
ответом на консервативные методы терапии
(рис. 1.8.2.41; 1.8.2.42).
Рис. 1.8.2.41. Особенности конфокальной микроскопии при невусах:
а
– регулярная структура «медовых сот» или «булыжной мостовой»;
б
– регулярные «гнезда» клеток в соединительном слое;
в
– «гнезда» с постоянной плотностью в дерме [122]
в
б
а
«Гистологичность» метода конфокальной
микроскопии позволяет при диагностике опе-
рировать практически теми же особенностями
структуры ткани, как и при гистологическом ис-
следовании [121]. Проведенное масштабное
исследование особенностей конфокально-
микроскопических изображений при МК и МН
позволило определить три главных компонента,
позволяющих проводить дифференциальную
диагностику:
–
сосочки с нечетко отграниченными кон-
турами (в 90 % случаев меланом и лишь 41 %
невусов);
–
средняя или выраженная атипия (у 73 %
меланом и 27 % невусов);
–
клетки, распределенные в листоподоб-
ные структуры, и нарушение сосочковой архи-
тектуры базального слоя (признак высокоспе-
цифичный для меланомы, но имеющий низкий
критерий чувствительности).
Наличие неупорядоченных структур в эпи-
дермисе является высокоспецифичным для ме-
ланомы [118], в то время как при невусах встре-
чается упорядоченная структура типа «медовых
сот» или «булыжной мостовой». Одним из самых
значимых показателей, отличающих меланому
105
от невусов, является наличие педжетоидных кле-
ток. Если в исследуемой области присутствуют
такие клетки, риск злокачественности новооб-
разования возрастает в 15 раз.
При меланоме нарушена структура дер-
моэпидермального соединения, выявляются
бесформенные клетки, формирующие ли-
стовидные структуры, в то время как при не-
вусах структуры были организованы. Наличие
«гнезд» с четкой структурой в соединительном
слое и эпидермисе отличает невусы от мела-
ном, хотя специфичность этого признака не
очень высока [121].
Обращает на себя внимание то, что в силу
большой степени соответствия гистологиче-
ской и КЛСМ-картины этот метод является
крайне ценным (особенно для меланомы) не-
инвазивным методом определения границ но-
вообразования для проведения последующей
биопсии и/или хирургического вмешательства
[122].
Существуют также методики автоматизи-
рованного анализа изображений, полученных
при КЛСМ, что сближает этот метод с мето-
дом СИА-скопии и позволяет еще больше по-
высить точность и объективность полученных
результатов [123]. Использование компью-
терного алгоритма, который автоматически
анализирует глубину наиболее поверхностно
расположенных пигментных очагов, позволяет
использовать КЛСМ для сверхранней диагно-
стики поверхностно распространяющейся
МК [124; 125; 126].
КЛСМ
in vivo
может использоваться в каче-
стве самостоятельного метода таких новооб-
разований кожи, как актинический кератоз.
Рис. 1.8.2.42. Особенности конфокальной микроскопии при меланомах:
а
– нарушение структуры эпидермиса с неравномерным распределением ярких
зернистых частиц и педжетоидных клеток;
b
– атипичные клетки в листовидных структурах в соединительном слое;
c
– негомогенные «гнезда», образованные агрегатами клеток с разной плотностью [122]
c
b
а
Do'stlaringiz bilan baham: |
