Введение. Цель, задачи предмета

Рис. 37. Этапы получения трансгенных млекопитающих от введения фрагмента ДНК, содержащего нужный ген (SRY) в пронуклеус зиготы мыши с помощью микропипетки до получения взрослых особей, несущих чужеродную ДНК в




оплодотворенной яйцеклетки мыши с помощью микропипетки до получения взрослых особей, несущих чужеродную ДНК в каждом клеточном ядре представлены на рис. 37. В результате проведения этого эксперимента было показано, что именно ген SRY кодирует у мышей тестес детерминирующий фактор (TDF). У всех трансгенных самок с кариотипом ХХ половые органы под действием тестес детерминирующего фактора были мужского типа, включая четко выраженный пенис. Наличие гена SRY у трансгенных самок,
полученных в данном эксперименте, было подтверждено Саузерн- блот анализом.
Метод микроинъекции ДНК в оплодотворенные яйцеклетки с 82-го года до настоящего времени остается наиболее популярным у исследователей, занятых получением трансгенных животных, несмотря на то, что он требует высокой квалификации и дорогостоящего оборудования. И это понятно, поскольку быстрота и надежность данного метода окупают все его недостатки.
В последние годы при создании трансгенных животных используют также эмбриональные стволовые клетки (ЕС-клетки), взятые из бластоцисты. ЕС-клетки можно культивировать in vitro, вводить в них с помощью трансдукции или ретровирусных векторов целевые трансгены и после трансформации инъецировать их в бластоцисту. Практическое достоинство этого методического подхода состоит в том, что он дает возможность проводить селекцию