Контрольные вопросы
Химическая природа ферментов, их классификация.
Как регулируется синтез ферментов у микроорганизмов?
Что такое катаболитная репрессия?
Что такое амилолитический комплекс?
Как измеряют количество фермента?
Общие принципы колориметрического метода определения амилолитической активности.
Что такое продуцирующая способность микроорганизма?
РАБОТА 16. СОЗДАНИЕ БЕЗОТХОДНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ. ИЗВЛЕЧЕНИЕ ПЕКТИНА ИЗ ВАТЫ.
Все ферменты, гидролизующие полинуклеотидные цепи, можно отнести к числу фосфодиэстераз, поскольку они разрушают фосфодиэфирные связи. Они делятся на две группы:
эндонуклеазы;
экзонуклеазы.
Эндонуклеазы разрушают связи внутри полинуклеотидной цепи. Под действием этих ферментов цепь распадается на фрагменты, размеры которых могут варьировать от мононуклеотидов до кислоторастворимых полинуклеотидов. Иногда эндонуклеазы называют нуклеодеполимеразами или нуклеофосфодиэстеразами.
Экзонуклеазы расщепляют полинуклеотидную цепь путем последовательного отщепления мононуклеотидов с одного конца цепи. Обычно их называют фосфодиэстеразами.
Экзонуклеазы делятся на две основные группы:
разрушающие РНК – рибонуклеазы или РНК-азы;
разрушающие ДНК – дезоксирибонуклеазы или ДНК-азы.
Из различных источников сырья в настоящее время получены разнообразные формы рибонуклеаз, из которых наиболее изучена панкреатическая РНК-аза, т.е. выделенная из поджелудочной железы.
Рибонуклеаза характеризуется устойчивостью в широких пределах рН и значительной термостабильностью в слабокислых растворах, но легко инактивируется щелочами. На ДНК рибонуклеаза не действует. Фермент обладает ярко выраженными антигенными свойствами. Максимальная активность фермента проявляется в области рН от 7,0 до 8,2 с оптимумом при рН 7,7. Температурный оптимум рибонуклеазы – 65оС.
Действие рибонуклеазы направлено в основном на разрыв связи, соединяющей фосфатный остаток при С-3’ в пиримидиннуклеотиде с С-5’ следующего нуклеотида. Например, нижеприведенный нуклеотид будет разрушаться РНК-азой следующим образом:
фАфЦфУфГфА→фАфЦф+Уф+ГфА.
Поэтому рибонуклеазу можно рассматривать как высокоспецифичную фосфодиэстеразу, гидролизующую только вторичные фосфорные группы пиримидиннуклеозид-3’-фосфаты. Если РНК-аза действует на РНК в течение короткого промежутка времени, то первичными продуктами распада оказываются циклические 2’, 3’-фосфаты цитидина и уридина. Эти циклические фосфаты медленно гидролизуются рибонуклеазой, образуя пиримидин-3’-фосфаты либо в виде свободных нуклеотидов, либо в виде концевых нуклеотидных остатков в олигонуклеотиде.
Do'stlaringiz bilan baham: |