23 -laboratoriya ishi: Tuxum oqsilidan albuminni kristal xolda ajratish
Tuxum oqi bir nechta oqsillarning aralashmasidir.Tuxum oqsilining taxminan 70%
albumin, bu osonlikchaglobulinlardan ajralib chiqadi. Tuxumning o'n barobar suyultirilishi
bilandistillangan suv bilan oqsil, globulinlar cho'kadi vaalbumin eritmada qoladi.
Ishning borishi:
1. Oqni sarig'dan ehtiyotkorlik bilan ajrating,buning uchun ikkala tuxumqobig'idan teshik
oching va oqsilni hajmi 500 ml bo'lgan stakanichiga to'kib tashlang, so'ngra stakanga 250 ml
distillangan suv qo'shiladiva
aralashmani rezina uchli shisha tayoqchabilan aralashtiriladi.
2. Eritmani o’lchovli kolbaga o'tkazing va distillangan suv bilan 300 ml
ga yetkazing. Eritmani
globulinlar mayda-mayda cho'kmasi xosil bo’lguncha xona haroratida 30 daqiqa qoldiriladi.
3. Olingan suspenziyadan 20 ml ikki martaburma filtrorqali filtrlanadi.
4. Tuxum albuminini o'z ichiga olgan filtrat bilan oqsillarga rangli reaktsiyalar (biuretik,
ninhidrin,ksantoprotein, Milon va Foli reaktsiyalari) qiling.
24 -laboratoriya ishi: Muskul to’qimasidan oqsil fraksiyalarini ajratish
Mushak hujayralarining miofibrillalarida kontraktil oqsillar (miyozin va aktin) va
boshqaruvchi oqsillar (tropomiyozin vatroponin) mavjud.Miofibril oqsillari suvda erimaydi, lekin
ulartuz konsentratsiyasi (0,5 mol/l)bilan mushak eritmasidan fiziologik eritmalar bilan ajratib olish
mumkin.
Ko'p sarkoplazmatik oqsillar(mushak hujayralarining gialoplazmasi) suvda yoki past
konsentratsiyali tuz eritmalari (0,05 mol/l)da eriydi.
Mushak to'qimasini 5% kaliy xlorid eritmasi
bilan ekstraktsiya qilinganda,ham miofibrillar, ham sarkoplazmatikoqsillar olinadi.
Ishning borishi:
2 g mushak to'qimasini torting.
Qaychi bilan maydalang, so’ngra chinni
havonchaga solinadi, 2 ml 5% kaliy xlorid eritmasi qo’shiladi va shishaliqumbilan gomogen(bir
hil bo'lguncha) xolatiga kelguncha eziladi yoki ishqalanadi.
Gomogenatga 3 ml dan kaliy xlorid eritmasi qo'shiladiva xosil bo’lgan bo’tqasimon
aralashmani 5 daqiqa davomida ishqalanadi, so’ngra yana 5 ml 5% kaliy xlorid eritmasi
qo'shiladiva 5 daqiqa davomida ishqalanish davom ettinriladi.
Olingan gomogenat ikki qavatli doka orqali filtrlanadi yoki 15 daqiqa davomida 4000
ayl/daq tezlikda santrifuga qilinadi.
Filtrat bilan oqsillargaranglireaktsiyalar (biuret, ksantoprotein, reaktsiyalarMilona, Fola
va Sakaguchi) o’tkaziladi.
Do'stlaringiz bilan baham: |