№ 2 (68)
февраль, 2020 г.
17
Целлюлоза представляет собой наиболее распро-
страненное в природе органическое соединение. Она
является главной составной частью оболочки клеток
высших и низших растений. В большом количестве
целлюлоза собирается с урожаем различных расте-
ний в виде хлопка, лына, конопли и других лубяных
культур, соломы, оболочек семян, плодов и т. д.
В то время, как синтез целлюлозы осуществля-
ется почти исключительно зелеными растениями,
распад её в процессе круговорота вещества в природе
совершается в основном различными микроорганиз-
мами. Как теперь известно, даже жвачные животные,
употребляющие значительное количества целлюло-
зосодержащих кормов,
синтезируют фермента цел-
люлазы и разложение целлюлозы в рубце происходит
под воздействием различных обитающих в нем мик-
роорганизмов. Целлюлаза наряду с другими фермен-
тами, гидролизующими углеводные полимеры, мо-
жет быть применена для осахаривания отходов раз-
личных производств, использующих растительное
сырье. Гидролизованная таким образом масса с по-
выщенным содержанием более легкоусвояемых уг-
леводов может
сама служить кормом для скота, либо
использоватьоя
для
выращивания
кормовых
дрожжей.
Для поисков продуцентов с полным набором
ферментов необходим новый подход к оценке био-
технологичности ферментов и выделение с заранее
заданными характеристиками. Эти задачи можно ре-
шить с помощью современных методов микологии,
микробиологии, молекулярной генетики и генной ин-
женерии. В связи с этим необходимо вести исследо-
вания по выделению из природы новых высокоактив-
ных грибов, конструированию целлюлолитически
активных высокобелковых
форм микромицетов ме-
тодами генной и клеточной инженерии, изучению
биотехнологии синтеза ферментов и белка.
Для получения протопластов из клеток микроор-
ганизмов используются механические или автолити-
ческие методы, методы в результате которых созда-
ются условия, задерживающие образование клеточ-
ной стенки [1], а также методы, основанные на фер-
ментативном растворении клеточной стенки пищева-
рительным соком виноградных улиток, насчитываю-
щим более 30 литических ферментов [2] или коммер-
ческими препаратами,
выделяемыми из некоторых
актиномицетов или грибов базидиомицетов.
Действие этих литических комплексов на от-
тенку грибов авторы объясняют присутствием λ-1,3–
глюканазы, β-1,3–глюканазы, хитизаны, целлюлазы
[3].
Применение методов электронной микроскопии
позволило проследить основные этапы получения
протопластов у почкующихся дрожжей
Saccharomy-
ces cerevisiae [4]. Растворение клеточной стенки, как
правило, начинается в точке, противоположной
рубцу, образующемуся в
месте предшествующего
почкования. После этого клеточная стенка сползает с
клетке, в результате чего остается протопласт, окру-
женный клеточной мембраной.
Кожиной с соавторами [5] удалось с достаточна
эффективностью получить протопласты у ряда
дрожжеподобных грибов (кроме
Saccharomyces
pombe), причем все они, за исключением
А.pullulans
относятся к аскомицетам. Такие результаты подтвер-
ждают уже известные данные о дифференцирован-
ном действии различных литических ферментных си-
стем на некоторые группы дрожжеподобных грибов,
связанном с различным отроением их клеточных сте-
нок. Низкий выход протопластов у
S.pombe объясня-
ется тем, что, клетки этого гриба богаты λ (1–3) глю-
каном и для эффективного получения протопластов
необходимо обработать клетки смесью ПСУ и λ–и β
(1–3) – глюканазы.
В отличие от дрожжей рода
Saccharomyces и
Can-
dida дрожжи рода
Rhodotorula образуют протопла-
сты при инкубации с улиточным ферментом только
после длительного периода инкубации [6]. Исследо-
ватели предлагают способ ускорения этого процесса
путем суспензирования клетки в смеси либо β-глю-
коронидазы (1000 Е/мл) и дриcелазы (по 50 мг/мл)
каждого фермента.
Протопласты бактерий являются более удобной
по сравнению с клетками
моделью для фундамен-
тальных и прикладных исследований, так как отсут-
ствие такого важного биологического барьера, как
клеточная стенка, облегчает слияние протопластов и
проникновение в них ДНК.
Багдасарян С.Н. и Авакян З.Т [7] подобрали усло-
вия массового образования протопластов у клеток
бактерий
Bac.thuringiensis, Bac.cepomunoe, Bac.cau-
casicus и шт.
Bac.popieliae. Авторы установили высо-
кую устойчивость вeгетативных клеток
Bac.popieliae
к действию лизоцима и разработали способ образова-
ния протопластов
Bac.popieliae с использованием
культуральной
жидкости
Bac.thuringiensis
var.galleriae.
Стрижковой А.М. и др. [8] был разработан метод
получения протопластов и их регенерация у
Вас.polymixa. Исследователями подобраны опти-
мальные
условия для выращивания, максимального
выхода и регенерации. Установлено, что антибиоти-
ческая активность у 30–40% ревертантов значи-
тельно повышается, однако стабильно сохраняется
только у 5% проверенных ревертантов.
Интенсивно развиваются такие исследования по
изучению образования и регенерации протопластов у
стрептомицетов [9].
Так Сугахара с соав. [10] показали, что клеточная
стенка стрептомицетов становится более чувстви-
тельной к
действию литических ферментов, если
культуру предварительно выращивать на ореде с ин-
гибирующим рост концентрациями глицина.
Do'stlaringiz bilan baham: 
