Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

Ход работы: 
К
 
2–3 мг тиаминхлорида добавляют
 
5–10
 
капель раствора
 
гексациано-III-феррата калия и 2 мл 30 % раствора гидроксида калия, содер-
жимое пробирки тщательно перемешивают. При нагревании жидкость окра-
шивается в желтый цвет, вследствие превращения тиамина в тиохром. Затем в 
пробирку добавляют 1 мл изобутилового спирта и содержимое интенсивно 
взбалтывают в течение 1 минуты. Прогрев флюорометр в течение 10 минут, 
наблюдают синюю флюоресценцию при облучении раствора ультрафиолето-
выми лучами. 
Б. Диазореакция 
В щелочной среде В
1
с диазореактивом (смесь солянокислого или 
сернокис­ лого раствора сульфаниловой кислоты с раствором нитрита натрия) 
образует сложное комплексное соединение оранжевого или красного цвета. 
Ход работы: 
В пробирку наливают
 
1 мл
 
1 %
 
раствора сульфаниловой
 
кислоты, 1 мл 5 % раствора нитрита натрия. Образуется диазореактив, к нему 
добавляют­ небольшое количество (на кончике скальпеля) порошка тиамина 
или 0,5 мл 5 % раствора его. И по стенке пробирки осторожно добавляют 1 мл 
раствора карбоната натрия. На границе двух жидкостей появляется кольцо 
оранжевого или красного цвета. 
75 

---

Реакция на витамин В
2 
Основу молекулы рибофлавина составляет изоаллоксазин
,
в котором соче
­
таются бензольный
,
пиразиновый
,
пиримидиновый циклы
,
в положении 
9
име
­
ется остаток пятиатомного спирта 
—
рибита
: 
Рибофлавин входит в состав двух родственных коферментов флавинмоно
-
нуклеотида 
(
ФМН
): 
и флавинаденинуклеотида 
(
ФАД
): 
Эти коферменты функционируют в простетических группах ферментов де
­
гидрогеназ
.
В катализируемых этими ферментами реакциях изоаллоксазино
-
вое 
кольцо флавиновых нуклеотидов служит промежуточным переносчиком атомов 
водорода
,
отщепляющихся в ходе реакции от молекулы субстрата
. 
Рибофлавин химически неустойчив
,
легко разрушается при кипячении и 
на свету
.
Под действием света он распадается на рибит и 
6,7‑
диметилаллок
-
сазин или люмихром
.
Рибофлавин легко окисляется и восстанавливается
,
наи
-
большей способностью присоединять атомы водорода обладают атомы азота
,
находящиеся
­
в 
1‑
м и 
10‑
м положениях молекулы изоаллоксазина
. 
76 

---

При авитаминозе рибофлавина приостанавливается рост, наблюдается 
выпадение­ волос, поражаются слизистые оболочки, утомляется зрение, нару-
шается нормальный синтез гемоглобина. 
Образующийся при добавлении металлического цинка к концентрирован-
ной соляной кислоте водород восстанавливает желтый рибофлавин сначала в 
родофлавин красного цвета, затем в бесцветный лейкофлавин: