Учебное пособие / А. И. Жебентяев. Витебск: вгму,2014

Глава 2. Методология химико-токсикологического анализа 
____________________________________________________________________________ 
хроматографические методы – колоночную адсорбционную, 
тонкослойную и бумажную хроматографию. В последних двух случаях 
после высушивания пластин или хроматографической бумаги 
определяют зоны, в которых находятся анализируемые вещества, и 
элюируют их специально подобранным органическим полярным 
растворителем. При использовании колоночной хроматографии один 
из таких растворителей применяют для элюирования веществ из 
колонки, собирают нужные фракции и, если необходимо, 
концентрируют элюат в вакууме. 
При обработке проб мочи необходимо учитывать, что 
некоторые патологические процессы приводят к значительным 
количественным и качественным изменениям мочи. Может 
образоваться очень мало мочи и содержание солей, мочевины и других 
веществ в ней может быть очень высоким. При некоторых 
заболеваниях или при приеме диуретиков, напротив, суточный объем 
мочи может значительно возрасти и поэтому концентрация 
определяемых веществ будет низкой, что приводит к необходимости 
дополнительного концентрирования. В моче больных может 
содержаться кровь, различные бактерии (бактериурия), белки, может 
резко повышаться содержание билирубина, порфиринов, что 
значительно изменяет оптические свойства мочи, это необходимо 
учитывать при использовании спектрометрических методов. 
Наличие бактерий в биологическом материале (или попадание 
их извне в пробу) создает дополнительные сложности при сборе и 
хранении проб. В присутствии бактерий в пробах происходит ряд 
биохимических процессов: гидролиз мочевины с образование аммиака, 
трансформация глюкозы, расщепление белков, изменение рН, 
возможны также процессы химической трансформации определяемых 
веществ – гидролиз, окислительно-восстановительные процессы и др. 
Для предупреждения этих процессов к пробе добавляют различные 
вещества: толуол, хлороформ, борную кислоту, тимол. Естественно, 
что всякие добавки могут быть не безразличны для последующего 
анализа, и их влияние должно быть тщательно проверено 
контрольными опытами. Целесообразно собирать пробы в стерильные 
сосуды и хранить их в условиях, затрудняющих бактериальное 
загрязнение. В общем случае образцы при необходимости лучше 
хранить в замороженном виде в низкотемпературной холодильной 
камере (-10–20 
). Близким к идеальным условиям длительного 
хранения является хранение образцов после лиофилизации в запаянных 
ампулах, заполненных инертным газом (азот, гелий, аргон и др.). 
Анализ органов и тканей требует предварительной обработки с 
целью разрушения целостности тканей и клеточных структур. 
Гомогенизация 
(измельчение) 
производится 
с 
помощью 
46 

---