Трофимова Светлана Алексеевна, доцент кафедры ботаники и физиологии растений института биологии, экологии и агротехнологий ПетрГУ, кандидат биологических наук рабочая программа дисциплины

Лабораторное занятие № 8

Тема занятия: Санитарно-показательные микроорганизмы: методы изучения.

Цель занятия: ознакомиться с микрофлорой воды, воздуха, почвы; провести посев микрофлоры воздуха закрытых помещений, водопроводной воды и уличной почвы.
Задачи: изучить микробные пейзажи почвы, воды, воздуха; освоить отбор проб воды, воздуха и почвы для проведения санитарно-микробиологического анализа.


Студент должен знать:

1. 
   до изучения темы (базисные знания): морфологические и физиологические особенности микроорганизмов в составе природных биотопов;
   
2. 
   после изучения темы: методы санитарной микробиологии, принципы санитарно-микробиологического исследования, иметь понятие о санитарно-микробиологическом анализе, понятие о микробном загрязнении окружающей среды, знать источники загрязнения.
   

Студент должен уметь:

1. 
   проводить оценку санитарно-бактериологического состояния объектов окружающей среды;
   

СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ
1. Вводный контроль
- выполнение тестового контроля;
- контрольные вопросы:

1. 
   Микрофлора воды, методы изучения;
   
2. 
   Микрофлора воздуха, методы изучения;
   
3. 
   Микрофлора почвы, методы изучения;
   
4. 
   Санитарно-показательные микроорганизмы, требования, предъявляемые к ним.
   

2. Беседа по теме занятия

1. 
   Санитарная микробиология. Задачи и направления.
   
2. 
   Санитарно-показательные микроорганизмы. Требования, предъявляемые к ним. СМП – показатели санитарного неблагополучия объектов окружающей среды.
   
3. 
   Санитарно-микробиологическое исследование поверхностей в окружении человека.
   
4. 
   Микробиология пищевых продуктов и их оценка.
   

3.Самостоятельная работа

1. 
   Провести исследование микрофлоры воды централизованного водоснабжения:
   

• 
  Освоить отбор проб воды централизованного водоснабжения для микробиологического анализа [Вода питьевая. Отбор проб (Российский государственный стандарт) Р51ХХХ-00];
  
• 
  обжечь пламенем спиртовки кран с водопроводной водой;
  
• 
  открыть кран и спустить воду в течение 10 минут;
  
• 
  набрать 0,5 л воды в стерильную посуду с дехлоратором.
  
• 
  Посеять микрофлору водопроводной воды методом мембранных фильтров на наличие БГКП:
  
• 
  профильтровать заданный объем водопроводной воды через предварительно прокипяченные дважды нитроцеллюлозные фильтры № 3;
  
• 
  стерильным пинцетом взять фильтр и перенести его на среду Эндо, профильтрованной стороной кверху, избегая формирования пузырьков воздуха между фильтром и питательной средой;
  
• 
  чашку с питательной средой и посевом подписать, завернуть в бумагу и поместить в термостат на 24 ч при 37°С. Наличие ярко-красных с металлическим блеском колоний будет служить свидетельством о подозрении присутствия в данном объеме воды E. coli.
  
• 
  Посеять микрофлору водопроводной воды для определения ОМЧ:
  
• 
  в стерильную чашку Петри внести 1 мл исследуемой воды и залить 15 мл расплавленного и остуженного до 45°С МПА;
  
• 
  аккуратно перемешать исследуемый материал с питательной средой по часовой и против часовой стрелки;
  
• 
  посевы оставить до полного застывания питательной среды;
  
• 
  посевы подписать и поместить в термостат на 24 при 37°С.
  

2.Провести исследование микрофлоры почвы:

• 
  Освоить технику разведения почвенного раствора от 10^-1 до 10^-6;
  
• 
  сделать навеску почвы весом 1 гр;
  
• 
  выполнить стерильной пипеткой последовательное 6-кратное разведение почвенного раствора: для этого перенести по 0,1 мл раствора из каждой предыдущей пробирки в последующую, из последней пробирки 0,1 мл раствора поместить в дезинфицирующую жидкость.
  
• 
  Посеять микрофлору почвы для определения ОМЧ:
  
• 
  в стерильную чашку Петри внести 1 мл исследуемой пробы из рех последних разведений – 10^-4, 10^-5, 10^-6 и залить 15 мл расплавленного и остуженного до 45°С МПА;
  
• 
  аккуратно перемешать исследуемый материал с питательной средой по часовой и против часовой стрелки;
  
• 
  посевы оставить до полного застывания питательной среды;
  
• 
  посевы подписать и поместить в термостат на 24 при 37°С.
  

3.Провести исследование микрофлоры воздуха закрытых помещений:

• 
  Освоить методы забора воздуха для микробиологического анализа по методу Коха (седиментационный метод):
  
• 
  сделать посевы воздуха для определения ОМЧ;
  
• 
  чашки Петри с МПА открыть на 5-10 минут;
  
• 
  посевы закрыть, подписать и поместить в термостат на 24 ч при 37°С.
  
• 
  Посеять воздух седиментационным методом на кровяной агар с целью определения санитарно-показательных микробов.
  
• 
  Разобрать аспирационные методы исследования микрофлоры воздуха.