Toksikologik kimyo fanidan laboratoriya

Barbitur kislota hosilalarini qon va peshobdan ajratib olish hamda tahlilih 

 

50  ml  hajmli  kolbaga  2  ml  qon  yoki  10  ml  peshob  olinib,  pH  sharoiti  2  ga 

kelguncha  xlorid  kislota  bilan  nordonlashtiriladi.  Aralashma  2  qayta  5  ml  dan 

xloroform bilan, har gal 1 daqiqadan chayqatib ajratib olinadi, so‘ngra yupqa qatlam 

xromotografiyasi usuli bilan barbituratlarni aniqlanadi. Buning uchun silikagel bilan 

qoplangan  oyna  yoki  “Silufol”  plastinkalarining  start  chizig‘iga  nuqta  shaklida  bir 

tomchi  xloroformli  eritmadan,  undan  2  sm    oraliqda  nuqta  holida  bir  tomchi 

barbituratlarning  aniqlovchi  eritmalardan  (0,01%  etil  spirtidagi  barbiturat  eritmasi) 

tomiziladi.  Plastinka  xloroform  n-butanol-25%  ammiak  (70:40:5)  erituvchilar 

sistemasini  saqlagan  idishga  tushiriladi  va  suyuqlik  10  sm  ga    ko‘tarilguncha 

saqlanadi. Plastinka kameradan olinib ochiq havoda quritilgach, dog‘larni hosil qilish 

uchun difenilkarbozidning 0,02% xloroformli va simob sulfatning 1% eritmasi bilan 

purkaladi.  Barbituratlar  bo‘lgan  taqdirda  xromotagrafik  plastinkada    binafsha 

rangdagi  dog‘lar  hosil  bo‘ladi.  Barbiturat  aniqlangan  taqdirda  birlashtirilgan 

xloroformli  ajralmaga  4-5  g  suvsiz  natriy  sulfat    tuzi  qo‘shiladi  hamda  10  ml  pH 

sharoiti  7,4  bo‘lgan  fosfat      buferi  eritmasi  bilan  yuviladi  (tozalash).  Xloroformli 

qatlam ajratgich voronkasi yordamida ajratilib, barbituratlarni 10 ml  pH=10 bo‘lgan 

borat buferi bilan qayta ekstraksiyalanadi. Emulsiya hosil bo‘lsa 5 daqiqa davomida 

sentrifuglanadi  va  suvli  qatlam  barbituratlarni  aniqlash  uchun  ajratib  olinadi  va  UB 

spektrofotometrik usulda miqdori aniqlanadi.