Technical Note 17 — June 2012

Comparative validation 

Comparative (i.e. correlation or cross) validation is usually applied to bioanalytical methods and aims to 

demonstrate equivalent performance between two (or more) methods

 

used to generate data within the same 

study or across different studies by comparing the validation parameters. An example of comparative 

validation

 

would be a situation where an original validated bioanalytical method serves as the

 

reference and 

the revised bioanalytical method is the comparator. 

 

 

There is no single test of establishing method equivalence or numerical acceptance criteria for it. Generally, 

a method with the greatest sensitivity or highest recovery for the target analyte is the best. To determine if 

the alternative method mean is not statistically different from the reference method mean, a one way 

analysis of variance or a paired t-test by sample type and analyte concentration is performed. Comparative 

validation studies of qualitative methods involve the identification of operating characteristics of the method 

(e.g. sensitivity, selectivity, presumptive false positive and presumptive false negative). 

 

Validation studies can be supported by additional technical studies sourced externally from the facility. The 

use of verifiable proficiency testing data could be considered. 

 

When sample analyses within a single study are conducted at more than one site or more than one 

facility, cross-validation with spiked matrix standards and subject samples should be conducted 

at each site or facility to establish inter-laboratory reliability. Comparative validation should also be 

considered when data generated using different analytical techniques (e.g. LC-MS-MS vs. 

ELISA) in different studies are included. 

 

---

Technical Note 17 - Guidelines for the validation and verification of quantitative and qualitative test methods 

 

 

June 2012 

Page 7 of 32 

AS/NZS 4659 Guide to Determining the Equivalence of Food Microbiology Test Methods is an example of a 

protocol that can be used for comparative validation. This Standard provides guidance on the validation of 

qualitative, quantitative, confirmation and antibiotic tests.