Структура и функции белков и пептидов

 
 

---

12 
МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ 
 
Для выделения 
нативных белков
(без изменения пространственной структуры) из 
биологического раствора используют методы: 

высаливание
: осаждение солями щелочных, щелочноземельных металлов (хло-
рид натрия, сульфат магния), сульфатом аммония; при этом не нарушается первичная струк-
тура белка; 

осаждение
: использование водоотнимающих веществ: спирт или ацетон при низ-
ких температурах (около –20 

С). 
При использовании этих методов белки лишаются гидратной оболочки и выпадают в 
осадок в растворе. 
Денатурация
— нарушение пространственной структуры белков (первичная структу-
ра молекулы сохраняется). Может быть обратимая (структура белка восстанавливается после 
устранения денатурирующего агента) или необратимая (пространственная структура моле-
кулы не восстанавливается, например, при осаждении белков минеральными концентриро-
ванными кислотами, солями тяжелых металлов). 
МЕТОДЫ РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ 
 
Отделение белков от низкомолекулярных примесей 
Диализ
Используют специальную полимерную мембрану, которая имеет поры определенной 
величины. Малые молекулы (низкомолекулярные примеси) проходят через поры в мембране, 
а крупные (белки) задерживаются. Таким образом, белки отмывают от примесей. 
Разделение белков по молекулярной массе 
Гель-хроматография 
Хроматографическую колонку заполняют гранулами геля (сефадекс), который имеет 
поры определенной величины. В колонку вносят смесь белков. Белки, размер которых мень-
ше, чем размер пор сефадекса, задерживаются в колонке, так как «застревают» в порах, а 
остальные свободно выходят из колонки (рис. 2.1). Размер белка зависит от его молекуляр-
ной массы. 
 
Рис. 2.1.