Sanoat biotexnologiyasi va tovar mahsulotlari

Sanoat biotexnologiyasi va tovar mahsulotlari
U. Gottschalk, keng qamrovli biotexnologiya (uchinchi nashr), 2011 y.

3.57.4.3.1 Ion almashinuvi xromatografiyasi

Ion almashinish xromatografiyasi oqsillarni sof zaryadiga qarab ajratadi, bu avvalroq muhokama qilinganidek, oqsildagi zaryadlangan aminokislotalar qoldiqlarining soni va tabiatini hamda buferning pH qiymatini aks ettiradi.19 Qutblilik va kattalikni nazorat qilish qobiliyati. pH ni o'zgartirish orqali oqsil zaryadidan maqsadli oqsillarni zaryadlangan guruhlar bilan hosil qilingan qatronga selektiv adsorbsiyalash uchun ion almashinadigan xromatografiyada foydalaniladi. Qarama-qarshi zaryadli oqsillarni adsorbsiyalash uchun turli quvvatdagi anion va katyonik qatronlar ishlatilishi mumkin. Anion almashtirgichlar (AEXs) va katyonik almashinuvchilar (CEXs) ning ba'zi misollari 2-jadvalda keltirilgan.
Ion almashinish xromatografiyasi jarayoni afinite xromatografiyasi uchun tavsiflangan jarayonga o'xshaydi, ustun sig'imi va elutsiya mexanikasidagi muhim farqlar bilan. Dastlab, ustun qatronga qarama-qarshi zaryadli ionlarni o'z ichiga olgan past ionli quvvatli tampon bilan muvozanatlanadi. Bu qarama-qarshi ionlar qatronga adsorbsiyalangan ozuqa oqimidagi zaryadlangan molekulalar tomonidan almashtiriladi. Bog'lash va tozalash rejimida ishlaganda maqsadli oqsil va qatronlar o'rtasidagi bog'lanishning kuchi va selektivligi buferning ion kuchi va pH qiymatini va ustun orqali oqim tezligini sozlash orqali optimallashtiriladi, shunday qilib kolonka maksimal darajada ushlab turiladi. maqsadli molekulaga erishiladi. Biroq, ko'plab oqsillar maqsad bilan bir xil zaryad profili va pI qiymatiga ega bo'lganligi sababli, ko'plab raqobatdosh molekulalar bir xil fraktsiyada birlashadi. Bu shuni anglatadiki, ion almashinuvi ustunining DBC har doim yaqinlik ustunidan past bo'ladi. Oqim orqali o'tish rejimida shartlar muayyan ifloslantiruvchi moddalarni ushlab turishni optimallashtirish uchun o'rnatiladi, shu bilan birga maqsadli oqsilni yuvish imkonini beradi. Asosan, CEX va AEXda selektiv elutsiya uchun namunaning pH qiymatini maqsadli oqsilning pI qiymatida to'liq ushlab turish mumkin bo'lishi kerak, ammo amalda bu maqsadli oqsilni beqarorlashtiradi va agregatsiyani rag'batlantiradi. Buning o'rniga, maqsadli oqsilni eritmada ushlab turish uchun namunaning pH qiymati pI dan yuqori yoki pastda 0,5-1 pH birligida saqlanadi.

Ion almashinuvi ustunidan elutsiya ion kuchi yoki pH ning bosqichma-bosqich yoki bosqichma-bosqich o'sishi buferlari yordamida amalga oshiriladi. Maqsad va ligandning yaqinligi asosan elektrostatik bog'lanishlar orqali aniqlansa, printsip adsorbsiyalangan fraktsiyani yaqinlik ustunlaridan tozalash uchun qo'llaniladigan printsipga juda o'xshash. Asosiy farq shundaki, yaqinlik xromatografiyasida bog'lanishning selektivligi shunday bo'ladiki, odatda, faqat bitta elyusiya fraksiyasi talab qilinadi, ion almashinish xromatografiyasida esa bosqichma-bosqich elyusiya bilan bir qancha turli fraktsiyalarni olish mumkin. Ion almashinish xromatografiyasining ruxsatiga namuna yuki, chiziqli oqim tezligi va elutsiya gradientining qiyaligi ta'sir qiladi.

Gidroksiapatit (HA) xromatografiyasini ion almashinish xromatografiyasining maxsus shakli sifatida ko'rib chiqish mumkin, uni eng yaxshi "aralash rejim" deb ta'riflash mumkin, ya'ni AEX va CEX aspektlarini o'z ichiga oladi.17 HAda musbat zaryadlangan kaltsiy ionlari o'rtasida o'ziga xos bo'lmagan o'zaro ta'sirlar mavjud. qatronlar va oqsillardagi manfiy zaryadlangan karboksil guruhlari, shuningdek, HA qatronidagi manfiy zaryadlangan fosfat ionlari va oqsillardagi musbat zaryadlangan aminokislotalar o'rtasida. Bu reaksiyalar HA xromatografiyasi natijasini bashorat qilishni qiyinlashtiradi va shuning uchun har bir holatda tekshirilishi kerak; ammo, bu ma'lum qo'lga olish bosqichlari uchun foydalidir, shuningdek, qoldiq nuklein kislotalar va HCPlarni olib tashlash uchun polishing. HA ustunlaridan elutsiya odatda fosfat konsentratsiyasining bosqichma-bosqich oshishi bilan erishiladi.
Xromatografik usullar: turlari, tamoyillari va qo'llanilishi
V.B. Chandana Kumari, ... Kingsley C. Patrik-Ivuanyanvu, Biosciences Analitik Texnikalarida, 2022

5.4.2 Ion almashinadigan xromatografiya

IEC (5.9-rasm) - zaryadlangan molekulalar yoki komponentlar bilan tarkibiy aralashmani ajratish usuli. Ion almashinadigan qatronlardagi statsionar faza analit yoki kerakli komponentning zaryadlangan statsionar qatron bilan o'zaro ta'sirini osonlashtirish uchun unga qarama-qarshi zaryadlanadi [82]. Qo'llaniladigan smola turiga qarab anion yoki kation almashinadigan xromatografiyaga bo'linadi. Statsionar faza bog'langan ionga qarama-qarshi zaryadlangan qarshi ion bilan birga bog'langan ionni o'z ichiga oladi. Shunday qilib, statsionar fazada musbat zaryadlangan bog'langan ion va manfiy zaryadlangan qarshi ion mavjud, masalan, qatronlar anion almashinadigan xromatografiya deb nomlanadi. Namuna aralashmasini o'z ichiga olgan mobil faza kiritilganda, manfiy zaryadli kerakli birikma manfiy zaryadlangan qarshi ionni almashtiradi va qatron bilan bog'lanadi. Kation almashinadigan xromatografiya uchun esa buning aksi [92]. O'ziga jalb qilingan molekulalarni bog'langan qatrondan siqib chiqarish uchun uni qatron yoki matritsadan chiqarish uchun bog'langan molekula zaryadiga o'xshash zaryadga ega bo'lgan yuqori afinitetli zaryadlangan komponentlar qo'llaniladi. Keyin bufer elyusiya jarayonida hosil bo'lgan kation yoki anion almashinadigan qatron-komponent kompleksini ajratish uchun ishlatiladi [93].
Nuklein kislotaning gidrolizlanishidan keyin hosil bo'lgan natijani ushbu texnikada tahlil qilish mumkin [94]. Ijobiy zaryadlangan yoki manfiy zaryadlangan ionli suv vodorod ionlari bilan almashtiriladi, gidroksil ionlari IEC tomonidan tozalanadi [95]. Yer qobig'i, metallar va boshqa noorganik birikmalardan olingan lantanoid ionlari IEC tomonidan ajratiladi. Qon zardobidagi xom aralashmasidan oqsillarni ajratish ham shu usul bilan amalga oshiriladi [96]. Bundan tashqari, aminokislotalar va nuklein kislotalarni (salbiy zaryadlangan) ajratish anion almashinadigan xromatografiya yordamida mumkin [97,98].
Inositol 1,4,5-Trisfosfat ishlab chiqarish
Maykl Barani, Kate Barani, silliq mushaklar qisqarishi biokimyosida, 1996 yil

Inositol fosfatlarni ajratish va aniqlash

Oddiyligi va arzonligi tufayli ion almashinadigan xromatografiya eng ko'p qo'llaniladi. Odatda [3H]inositol bilan belgilangan inositol fosfatlarini o'z ichiga olgan ekstraktlar Dowex format ustuniga joylashtiriladi, ulardan GPI, IP, IP2 (inositol bifosfat) va IP3 molyarligi ortib borayotgan ammoniy formatli buferlar bilan ketma-ket elutsiya qilinadi.

Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC) Dowex ustuniga qaraganda ancha yaxshi aniqlikka ega, ya'ni inositol fosfatlarining alohida izomerlarini ham hal qiladi (Button va boshq., 1994; Foster va boshq., 1994). Ko'pgina HPLC protseduralarida suvda eriydigan inositollarni elutsiya qilish uchun anion almashinadigan ustunlar va ammoniy fosfatning suvli mobil fazasi qo'llaniladi. Ikki yorliqli (3H va 32P) inositol birikmalari HPLC yordamida silliq mushaklar qisqarishi paytida inositol va fosfat qoldiqlarining taqdirini kuzatish uchun ishlatilishi mumkin.

Metall bo'yoqlarini aniqlash tizimi radioaktiv bo'lmagan to'qimalardan inositol fosfatlarini pikomolyar diapazonda HPLC tahlil qilish imkonini beruvchi (May, 1990) ishlab chiqilgan va dam olish va qo'zg'atilgan skelet mushaklarida inositol fosfatlar massasini aniqlash uchun qo'llanilgan (Mayr va Thieleczek). , 1991).
Ikkilamchi metabolitlarni ajratish va tozalash
Jeyms B. Makalpin, Jill E. Xoxlovski, "Terapevtik salohiyatga ega yangi tabiiy mahsulotlarni kashf qilish" kitobida, 1994 yil

13.5.2.4 Dehidropeptidaza ingibitorlari

Streptomyces parvulus (Hashimoto va boshq. 1990) dan ikkita chambarchas bog'liq bo'lgan WS1358A1 (13.44A) va WS1358B1 (13.44B) dehidropeptidaza inhibitörlerini tozalashda ion almashinuvi xromatografiyasi keng qo'llanilgan. O'rim-yig'imli bulon diatomli tuproqdan filtrlangan va filtrat natriy gidroksid eritmasi bilan pH 10 ga o'rnatildi. Faol printsiplar Dowex 1 × 2 ga xlorid shaklida adsorbsiyalangan va 0,2 N natriy xlorid eritmasi bilan elut qilingan. Eritma xlorid kislotasi bilan pH 2 ga o'rnatildi va keyin faollashtirilgan ko'mir ustuni bilan tuzsizlandi. Ushbu ustun dastlab suv bilan, keyin esa 25% suvli metanol bilan yuvilgan, ingibitorlar 0,5 N ammoniy gidroksidni o'z ichiga olgan 25% suvli metanol bilan elutsiya qilingan. Eluat suv bilan ishlab chiqilgan Diaion SP-207 ustuniga qo'llanilishidan oldin konsentratsiyalangan va pH 2 ga sozlangan. WS1358A1 ning bir oz ko'proq lipofilligi uni B analogiga qaraganda ustunda uzoqroq saqlashga imkon berdi va shuning uchun bu nuqtada ikkita faol printsipni ajratishga erishildi. Har bir sof birikmalar olish uchun DEAE Sephadex A-25, Sephadex G-15 va tsellyuloza yoki Dowex 1 × 2 paketlaridan foydalangan holda bir nechta qo'shimcha xromatografiyalarni talab qildi.

(13.44)

ION ALMASH XROMATOGRAFIYASINI STEROID TAHLILIDA FOYDALANISH.
RISTO HEIKKINEN, ... HERMAN ADLERCREUTZ, gormonal steroidlar bo'yicha: Gormonal steroidlar bo'yicha oltinchi xalqaro kongress materiallari, 1983 yil

XULOSA
Ion almashinuvi xromatografiyasi (IXC) o'ttiz yildan ko'proq vaqt davomida steroidlarni tahlil qilish sohasida turli xil usullarda qo'llanilgan. Steroid konjugatlar anionik tabiatiga ko'ra anion almashtirgichlarda olinishi va fraktsiyalanishi mumkin va xuddi shu tarzda zaif kislotali fenolik steroidlar neytrallardan ajratiladi. Namunalarni tozalash jarayonida anion va katyonik ifloslantiruvchi moddalar IXC tomonidan olib tashlanadi va bundan tashqari, lipofil ion almashtirgichlardan foydalanish neytral lipidlarni bir vaqtning o'zida teskari fazali xromatografik yo'q qilishga imkon beradi. Nihoyat, ma'lum funktsional guruhlarga ega bo'lgan ba'zi steroidlar mos shaklga aylantirilgan ion almashtirgichlar tomonidan tanlab fraktsiyalanishi mumkin.

IXC ning yuqori sig'imi va moslashuvchanligi uni so'nggi o'n yil ichida GC yoki GC-MS tomonidan steroidlarni ko'p komponentli tahlil qilish uchun biologik namunalarni tozalashda tanlov usuliga aylantirdi.
Aminokislotalar va oqsillar
Jon V. Baynes tibbiyot biokimyosi fanlari nomzodi, 2019 yil

Ion almashinadigan xromatografiya

Proteinlar zaryad va zaryad o'zaro ta'siri asosida ion almashinadigan matritsalarga bog'lanadi
Zaryadlangan ion yoki bir yoki bir nechta musbat zaryadli molekula manfiy zaryadlangan immobilizatsiyalangan fazaga bog’langan boshqa musbat zaryadlangan komponent bilan almashinsa, bu jarayon kation almashinuvi deyiladi. Teskari jarayon anion almashinuvi deb ataladi. Kation almashinuvchisi, karboksimetilselüloza (R–O–CH2–COO–) va anion almashtirgich, dietilaminoetil [(DEAE) tsellyuloza [R–O–C2H4–NH+(C2H5)2] oqsillarni tozalash uchun tez-tez ishlatiladi. Albomin va immunoglobulinni o'z ichiga olgan oqsil aralashmasini tozalashni o'ylab ko'ring. pH 7,5 da pI 4,8 bo'lgan albumin manfiy zaryadlangan; pI ~8,0 bo'lgan immunoglobulin musbat zaryadlangan. Agar aralash pH 7,0 da DEAE-tsellyuloza ustuniga qo'llanilsa, albumin musbat zaryadlangan ustunga yopishadi, immunoglobulin esa ustundan o'tadi. 2.13 ion almashinadigan xromatografiya tamoyilini ko'rsatadi. Jel-o'tkazuvchanlik xromatografiyasida bo'lgani kabi, oqsillarni pI dagi kichik farqlar asosida bir-biridan ajratish mumkin. Shunday qilib, oqsillar asta-sekin kolonnadan chiqariladi va ularning pI ga qarab ajratiladi.
Tahlil: asbobsozlik tamoyillari
Richard A. McFerson MD, MSc, Genrining Klinik diagnostikasi va laboratoriya usullari bilan boshqarish, 2022 yil

Suyuqlik xromatografiyasi

Ajratish texnikasi sifatida GC suyuqlik xromatografiyasini mos alternativa qiladigan ba'zi cheklovlarga ega. Ko'pgina organik birikmalar juda beqaror yoki oldindan kimyoviy derivatizatsiyasiz GC tomonidan tahlil qilish uchun etarli darajada uchuvchan emas. Suyuq xromatografiya usullari ajratish uchun past haroratlardan foydalanadi va shu bilan termolabil birikmalarni yaxshiroq ajratishga erishadi. Bu ikki omil suyuqlik xromatografiyasini GC bilan ajratib bo'lmaydigan birikmalarni ajratish imkonini beradi. Nihoyat, suyuq xromatografiyada namunani olish gaz xromatografiyasiga qaraganda osonroq. Mobil faza olib tashlanishi mumkin va namunani boshqa sharoitlarda qayta ishlash yoki qayta tahlil qilish mumkin.

Suyuq xromatografiyaning ko'p shakllari mavjud; tegishli shaklni tanlash turli omillarga bog'liq. Bu omillarga tahlil vaqti, birikma turi va aniqlash chegaralari kiradi. Qog'oz, yupqa qatlamli (24-bobda muhokama qilingan), ion almashinuvi va istisno suyuqlik xromatografiyasi ko'pincha past mobil faza oqimi tezligi tufayli past samaradorlikka va juda uzoq tahlil vaqtiga olib keladi. 24-bobda ham muhokama qilingan HPLC 1960-yillarning oxirida suyuq xromatografiyaning boshqa shakllari va GCga nisbatan afzalliklarni ta'minlovchi yashovchan shakli sifatida paydo bo'ldi. HPLC kichik, qattiq tayanchlar va maxsus mexanik nasoslardan foydalanadi, bu esa mobil fazani ustun orqali o'tkazish uchun yuqori bosim hosil qiladi. HPLC ustunlarini qayta tiklashsiz ko'p marta ishlatish mumkin. HPLC ustunlari bilan erishilgan ruxsat suyuqlik xromatografiyasining boshqa shakllaridan ustundir, tahlil qilish vaqtlari odatda ancha qisqaroq va takror ishlab chiqarish sezilarli darajada yaxshilanadi. HPLC ning barcha bu atributlari uni suyuq xromatografiyaning boshqa shakllariga qaraganda yaxshiroq ajratish usulini yaratadi.

Suyuq xromatografiyada odatda beshta ajratish texnikasi qo'llaniladi. Ularga adsorbsiya, bo'linish, ion almashinuvi, yaqinlik va o'lchamni istisno qilish kiradi. Har biri statsionar faza va mobil fazaning o'ziga xos kombinatsiyasi bilan tavsiflanadi. Inadsorbsion (suyuq-qattiq) xromatografiya, birikmalar kremniy yoki alumina kabi qattiq tayanchga adsorbsiyalanadi. Bu ustunli suyuqlik xromatografiyasining birinchi turi ishlab chiqilgan bo'lsa-da, ko'plab birikmalarni tayanchlar tomonidan kuchli ushlab turishi sababli keng qo'llanilmaydi, bu ularni kolonkadan ajratib olishni qiyinlashtiradi. Bo'linish (suyuqlik-suyuqlik) xromatografiyasi birikmalarni ularning xususiyatlariga qarab ajratadi. suyuq mobil faza va qattiq tayanch bilan qoplangan suyuq statsionar faza o'rtasidagi bo'linish. Bo'linish xromatografiyasi qutbli suyuqlikning statsionar fazasidan foydalanadigan normal fazali suyuqlik xromatografiyasini va C18 kabi qutbsiz statsionar fazadan foydalanadigan teskari fazali suyuqlik xromatografiyasini o'z ichiga oladi. polimer matritsaga biriktirilgan. Xromatografiyaning bu turidagi mexanizm namuna ionlari va harakatlanuvchi fazali ionlarning statsionar fazaning zaryadlangan guruhi bilan almashinishidan iborat.Affinlik xromatografiyasi statsionar faza sifatida bir nechta erigan moddalarni boshqa tutilmagan eritmalardan ajratish uchun immobilizatsiyalangan biokimyoviy ligandlardan foydalanadi. Ushbu turdagi ajratish biologik tizimlarda keng tarqalgan bo'lgan qulf va kalit birikmasidan foydalanadi. O'lchamni istisno qilish xromatografiyasi molekulalarni o'lchamlaridagi farqlarga ko'ra ajratadi. Qo'llab-quvvatlovchi material ma'lum bir teshik o'lchamlariga ega. Erigan moddalar bo'ylab harakatlanayotganda, kichik molekulalar teshiklarga kirishi mumkin, kattaroqlari esa ustundan birinchi bo'lib suzadi.
Ion almashinadigan xromatografiya
Xolid Z. Masudiy, ... Rovidha Saba Rasool, molekulyar biologiya va biotexnologiyada ilg‘or usullar, 2021

Abstrakt
Ion almashinadigan xromatografiya ionlashtiriladigan molekulalarni zaryad xususiyatlarining farqiga ko'ra ajratish imkonini beradi. U katta namunalarni qayta ishlash qobiliyatiga ega, kengroq qo'llanilishi (xususan, oqsillar va fermentlar uchun), o'rtacha xarajatlarni talab qiladi, kuchli hal qilish qobiliyatiga ega va masshtabni kengaytirish va avtomatlashtirishni osonlashtiradi, bu esa uni eng ko'p qirrali va keng qo'llaniladiganlardan biriga aylantirishga olib keldi. boshqa suyuq xromatografiya usullari qatorida texnikalar. Ushbu bobda ion almashinadigan xromatografiyaning asosiy printsipi tushuntirilgan. Gemoglobin va sitoxrom C pigmentlarida kation almashinadigan xromatografiya protsedurasi o'tkazildi va tahlil qilindi.

Tibbiy biotexnologiya va sog'liqni saqlash
Jun Kobayashi, ... Teruo Okano, keng qamrovli biotexnologiya (uchinchi nashr), 2019 yil

5.35.3.2 Haroratga javob beruvchi ionli o'zaro ta'sir kromatografiyasi

Ion almashinadigan xromatografiya hidrofobik va ionli qismlarni ifodalovchi turli xil biomolekulalarni ajratish va tozalash uchun keng qo'llaniladi, chunki ustun matritsasi uzoq masofali elektrostatik kuch orqali biomolekulalar bilan kuchli ta'sir o'tkazishi mumkin. Shunday qilib, biomolekulyar moddalarni samarali ajratish haroratga javob beradigan statsionar fazaga qarama-qarshi ionli qismni kiritish orqali erishiladi.

Ko'pgina bioaktiv birikmalar, masalan, dorilar, asosiy xususiyatlarga ega bo'lganligi sababli, salbiy zaryadlangan haroratga javob beradigan sirt ularni samarali ushlab turishi mumkin. Salbiy zaryadlangan o'zaro bog'langan poli(IPAAm-ko-akril kislota-ko-tert-butilakrilamid) (poli(IPAAm-co-AAc-co-tBAAm)) - payvandlangan silika boncuklar ustun matritsasiga qo'llanildi va katexolamin hosilalarini ajratish uchun foydalanildi. suvli mobil fazada (7-rasm). Haroratning oshishi bilan sirtdagi manfiy yoki musbat zaryadlangan haroratga javob beruvchi polimerlar qulab tushadi va suvsizlanadi, bu esa zaryadlangan guruhlarning harakatlanuvchi fazadagi hidrofil muhitga kirishiga to'sqinlik qiladi va natijada sirt zaryadining zichligi kamayadi. Shunday qilib, ionli PIPAAm-payvandlangan silika boncuklarining sirtlari harorat o'zgarishiga javoban hidrofilik / gidrofobik va zaryad zichligi o'zgarishlarini ko'rsatadi. Poli(IPAAm-co-AAc-co-tBAAm) ustunidagi katexolamin hosilalari zaryadlanmagan PIPAAm mos yozuvlar ustunidagilarga nisbatan yuqori pHda yuqori saqlash vaqtlariga ega bo'lib, bu ajratish rejimi sifatida elektrostatik o'zaro ta'sirni ko'rsatadi. Statsionar fazaning hidrofobikligi ortishi tufayli pH 7.0 da suvli mobil fazada 36 ° C da katexolamin hosilalarini optimal ajratishga erishildi. Ushbu natijalardan asosiy katekolaminlar va o'zaro bog'langan poli (IPAAm-co-AAc-co-tBAAm) o'rtasidagi elektrostatik va hidrofobik o'zaro ta'sirlarning o'zaro ta'siri qayd etildi. Saqlash vaqtlari 36 °C dan yuqori bo'lsa, elektrostatik o'zaro ta'sir o'zaro bog'langan poli(IPAAm-co-AAc-co-tBAAm) ning fazaga o'tish haroratidan yuqori bo'lishi kerakligini ko'rsatadi. Binobarin, ionli bioaktiv birikmalarning elutsiyasi statsionar fazaning temperaturaga javob beruvchi gidrofil/hidrofobik va zaryad zichligi o'zgarishlarini modulyatsiya qilish orqali osonlik bilan tartibga solinadi.

Ijobiy zaryadlangan o'zaro bog'langan poli (IPAAm-co-N, N-dimetilaminopropilakrilamid-co-n-butil metakrilat) (poli(IPAAm-co-DMAPAAm-co-BMA)) - payvandlangan silika boncuklar ajratish uchun ustun matritsasiga qo'llanildi. adenozin nukleotidlarining (AMP, ADP va ATP) suvli harakatchan fazasi. Pastroq haroratlarda adenozin nukleotidlari yuqori tutilishni ko'rsatadi va elutsiya qilingan adenozin nukleotidlarining tartibi fosfat guruhlari sonining ko'payishiga mos keladi. Adenozin nukleotidlarini ushlab turish, birinchi navbatda, musbat zaryadlangan sirtlar bilan elektrostatik o'zaro ta'sirlar bilan bog'liq. Ustun haroratini oshirish orqali ularning saqlanishi qisqartirildi va o'zaro bog'langan poli (IPAAm-co-DMAPAAm-co-BMA) ning fazaga o'tish haroratidan yuqori keskin o'zgarish kuzatildi. Bu erigan moddalarning saqlanishi haroratga javob beradigan sirt-zaryad zichligi va gidrofobik o'zaro ta'sir o'zgarishi bilan tartibga solinishining kuchli dalilidir. Adenozin nukleotidlari ko'pincha an'anaviy RPC yoki ion almashinadigan xromatografiya bilan tahlil qilinadi. Biroq, RPC erigan moddalarning elutsiyasini modulyatsiya qilish uchun organik erituvchilar va / yoki hidrofobik ion juftlashtiruvchi moddalarni talab qiladi va ion almashinadigan ustunlar ko'pincha uzoq tahlil vaqtlarini talab qiladi. Aksincha, o'zaro bog'langan poli(IPAAm-co-DMAPAAm-co-BMA)-payvandlangan ustundan nukleotidlarning elyusiyasi suvli harakatlanuvchi faza tarkibini o'zgartirmasdan bosqichma-bosqich harorat gradienti bilan modulyatsiya qilingan.
https://www.sciencedirect.com/topics/biochemistry-genetics-and-molecular-biology/ion-exchange-chromatography