Method · March 2008 doi: 10. 13140/RG

6. Биологик обе кг гл ар таркибидан ажратиб олинган гексамидин ва унинг
метаболити фенобарбитал ни ёт моддалардан тозалаш.
6.1. Копонкали хроматография усулида тозалаш
Шиша хроматографик колонка(буйи 25 см, ички диаметри 2 см) олиб, 5.0 г 
силикагел(КСК) солиниб, курук колли к эритилган спиртли эритма куйилди ва спирт 
шимилганидан сунг этил спирти ёрдамида уч маротаба 50 мл дан элюант йигиб 
олинади. Элюантлар бирлаштирилиб, сув хаммомида 5 мл элюант колгунча 
парлатилади ва гексамидин ва фенобарбиталга текширув амалга оширилади.
6.2. Юпка катпамли хроматография усулида тозалаш
«Silufol UV 254» пластинкаларнинг старт чизигига олинган спиртли эритмадан 
чизик шаклида томизилиб, бир томонига тасдикловчи сифатида гексамидин ва 
иккинчи томонига фенобарбиталнинг ишчи стандарт эритмасидан томизилиб, хона 
хароратида куритилади. Органик эритувчилар аралашмаси хлороформ - этил спирти 
- бензол (1:1:4) солинган ва уларнинг буги билан туйинтирилган хроматографик 
камерага пластинкани туширилиб, эритувчилар аралашмаси 10 см баландликка 
кутарилиб, 
финиш 
чизигига етганида 
пластинкани 
олиб 
хона хароратида 
куритилади. Хроматографик пластинкада моддани кутарилиб тупланган жойини 
аниклаш максадида УБ-254 лампа ёрдамида белгдоаб олинади ёки кириб 
олинадиган сорбент катлами томони беркитилиб, гексамидин томизилган кисмига 
очувчи реактив сифатида бром фенол куки реактиви, фенобарбитал кисмига симоб 
сульфатнинг 5 % эритмаси ва дифенилкарбазоннинг 0,02 
%
хлороформли эритмаси 
билан пуркалади. Гексамидин (Rf=0,49-0,51) ва фенобарбитал (Rf=0,70-0,72) ни 
доглар хосил булган кисми тугриси белгиланиб, сорбент катламларини кириб 
олинади ва сорбентлар алохида чинни косачаларга солиниб, уларни 5 мл дан 4 
маротаба этил спирти билан элюация килиб олинади ва этил спирти учириб 
юборилади ва текш ириш олиб борилади.
7. Гексамидин ва унинг метаболити фенобарбитални газ-хромато-масс