Магнитное поле и его характеристики. Электромагнитные колебания и волны в биологических средах

разделенными веществами на бумаге вырезают и проводят экстракцию соответствующими
растворителями. Экстракты веществ можно количественно анализировать различными методами :
спектрофотометрически, потенциометрические или радиометрический, если вещества содержат
радиоактивные метки.
Электрофорез на ацетат целлюлозе.
Большинство органических молекул адсорбируются на волокнах бумаги за счет гидроксильных групп
целлюлозы. Адсорбция противодействует движения частиц и вызывает вытягивание пятен в значительной
степени ухудшает процесс разделения компонентов образца. Этих негативных явлений можно избавиться,
если вместо бумаги использовать мембраны из ацетата целлюлозы. В ацетат целлюлозе гидроксильные
группы целлюлозы преобразовано в ацетатные, не проявляют адсорбционных свойств. Это улучшает
качество разделения, увеличивает скорость процесса разделения, а также дает возможность использовать
более низкие напряжения для электрофореза. Методически электрофорез на ацетат целлюлозе проводят
как и электрофорез на бумаге.
Следует также отметить, что высокая растворимость ацетат целлюлозы в различных растворителях и ее
прозрачность позволяют легко экстрагировать разделены компоненты и определять эти вещества
спектрофотометрически.
Тонкослойный электрофорез.
При тонкослойном электрофорезе носителем служит слой сорбента толщиной 0,25-0,50 мм, который
равномерно нанесен на стеклянную пластину. Чаще всего в качестве носителя используют оксид кремния
или оксид алюминия. Пластину с носителем помещают в аппарат для горизонтального электрофореза и
дают возможность тонкому слою насытиться буфером за счет диффузии раствора из буферных камер
через контактный бумажный фитиль. Микропипетки наносят образец и подают напряжение.
Тонкослойный электрофорез чаще всего используют для разделения при высоких напряжениях
(высоковольтный электрофорез). Метод имеет высокое разрешение и высокую чувствительность.

---

Часто тонкослойный электрофорез проводят в комбинации с тонкослойной хроматографией, т.е. после
электрофореза, в перпендикулярном к нему направлении на той же пластине проводят хроматографию.
Такой метод получил название " метода отпечатков пальцев " и позволяет с высоким качеством разделять
сложные многокомпонентные смеси.
Гель- электрофорез.
Наилучший эффект разделения органических макромолекул достигают с помощью гель - электрофореза.
В качестве носителя используют гели с крахмала, агарозы, полиакриламида и агарозы - акриламида.
Высокую разрешение гель -носителей объясняют эффектом '' молекулярного сита ". Это связано с
пониженной диффузией частиц образца в сетке геля и распределительной действием гель - проникающей
хроматографии. Структурно гели состоят из хаотично переплетенных полимерных цепей, образующих
ситовидных структуру по всему об ' объема геля. Принцип действия молекулярного сита состоит в том,
что крупные молекулы будут двигаться тем медленнее, чем меньше времени в структуре геля, размеры
которых определяются числом поперечных сшивок между полимерными цепями.
Наиболее эффективными гель - носителями считают полиариламидни гели, которые сочетают в себе
ряд свойств:
1. Размер пор может колебаться в широких пределах.
2. Гели можно формировать в калиброванных контейнерах (трубках и пластинах).
3. Они характеризуются очень низким уровнем адсорбции и электроосмоса.
4. Их можно применять с разными буферами.
5. Процесс разделения проходит очень быстро.
6. Разделенные вещества можно определять с помощью денситометра.
Полиакриламидном геле получают при сополимеризации акриламида и метиленакриламиду в
присутствии системы свободнорадикальных катализаторов. Мономеры растворяют в буфере, добавляют
катализатор и приготовленную смесь заливают в соответствующие контейнеры, в которых будут
проводить электрофорез. Процесс полимеризации (образование геля) при необходимости ускоряющих
облучая контейнеры ультрафиолетом. Изменяя в буфере концентрацию акриламида от 3 до 30 % можно
получать гели с диаметром пор от 0,2 до 0,5 нм и таким образом регулировать эффект молекулярного
сита.
Диск- электрофорез.
Диск- электрофорез является видоизмененным гель - электрофорезом на вертикальных колонках в
полиакриламиде. Этот метод электрофореза был разработан для высококачественного разделения
фракций белковых препаратов. Особенность метода заключается в том, что :
1. В электрофоретической колонке используют гели с различным размером пор. Верхний слой геля,
который занимает треть колонки, является крупно пористым и его называют концентрационным гелем.
В нижней части колонки формируют мелко пористый гель, который собственно является рабочим
гелем. Такой градиент размеров пор дает возможность эффективно использовать в процессе