Nazorat savollari: Fosfodiester bog'lari qayerda joylashgan?
Virus infektsiyasi?
Stabilizatsiya paytida nima sodir bo'ladi?
Ozonoliz nima?Tushuntiring.
Serologik diagnostika va indikator diagnostikasi?
14- ma’ruza Mavzu: "Viruslarni immunologik usullar yordamida diagnostika qilish" Reja: 1. Virusning maksimal suyultirilishini aniqlash. 2.Bilvosita gemagglyutinatsiya reaktsiyasi (RIHA) 3. Gemagglyutinatsiya testi (RGA) va gemagglyutinatsiyani inhibe qilish testi (RTGA) Tayanch iboralar: aglyutinatsiya, eritrotsitlar, titr, gem, qutb, antitelalar, antitoksinlar. RNHA ikkita versiyada qo'llaniladi: antikorlarni aniqlash uchun ma'lum antijen bilan yoki antigenni aniqlash uchun ma'lum antikorlar bilan. Bu reaktsiya o'ziga xosdir va bakteriyalar va rikketsiyalar keltirib chiqaradigan kasalliklarni tashxislash uchun ishlatiladi. RNGA ni o'rnatish uchun eritrotsitlar diagnostikumlari qo'llaniladi, tadqiqot maqsadiga qarab eritrotsitlarga antigenlar yoki antitellar adsorbsiyalanadi.Ijobiy holatlarda eritrotsitlarning aglutinatsiya darajasi plyuslar bilan belgilanadi. Probirkaning pastki qismini qoplaydigan eritrotsitlar (soyabon) yupqa plyonka shakliga ega bo'lgan reaktsiyani to'rtta plyus baholaydi, qirg'oqli dantelli qirralari bo'lgan plyonka mavjudligi ikkita plyus bilan ko'rsatilgan. Titr eritrotsitlarning ikkita qutbga aglutinatsiyasini keltirib chiqaradigan sinov materialining chegaraviy suyultirilishi sifatida olinadi.
Bilvosita (passiv) gemagglyutinatsiya reaktsiyasi: 1 - eritrotsitlar; 2 - eritrotsitlar antijeni; 3 - konjugatsiyalangan antigen; 4 - antikor.
Gemagglyutinatsiya reaktsiyasi (RGA) va gemagglyutinatsiyani inhibe qilish reaktsiyasi (RTGA).RGA eritrotsitlar ularga ma'lum antijenler adsorbsiyalanganda bir-biriga yopishib olish qobiliyatiga asoslanadi. Gemagglyutinatsiya uchun sinov materiali sifatida allantoik, amniotik suyuqlik, tovuq embrionlarining xorioallantoik membranalarining suspenziyasi, viruslar bilan kasallangan hayvonlarning kulturalari yoki organlaridan suspenziyalar va ekstraktlar, mahalliy yuqumli material ishlatiladi. RGA serologik emas, chunki u immun zardobi ishtirokisiz yuzaga keladi va RTGA ni o'rnatish uchun antigenning ishchi suyultirilishini yoki sinov materialida antijen (virus) mavjudligini tanlash uchun ishlatiladi (masalan, gripp bilan). Reaksiyada I qon guruhidagi hayvonlar, qushlar va odamlarning eritrotsitlari ishlatiladi.Taxminiy RGA ni belgilash uchun shisha slaydga 5% li eritrotsit suspenziyasi va bir tomchi tekshiriluvchi material surtiladi, yaxshilab aralashtiriladi. . Ijobiy natija bilan 1-2 daqiqadan so'ng makroskopik ravishda eritrotsitlarning flokulyant aglutinatsiyasi ko'rinishini kuzating. RHA ni kengaytirilgan qatorda polistirol plitalari quduqlariga o'rnatish uchun 0,5 ml hajmdagi fiziologik eritmada sinov materialining ikki baravar ko'paytirilishi tayyorlanadi. Barcha naychalarda 0,5 ml 0,25 - 1% eritrotsitlar suspenziyasi qo'shiladi. Natijalar nazoratdagi eritrotsitlarning to'liq cho'kishidan keyin hisobga olinadi (eritrotsitlar + sho'r suv). Reaktsiya eritrotsitlar cho'kindisining tabiati bilan hisobga olinadi. Ijobiy holatlarda aglutinatsiya darajasi plyuslar bilan belgilanadi. To'rtta plyus sinov naychasining (soyabon) pastki qismini qoplaydigan yopishtirilgan eritrotsitlarning yupqa plyonkasi shakliga ega bo'lgan reaktsiyani baholaydi, plyonkadagi bo'shliqlar bilan reaktsiya uchta plyus bilan qayd etilgan, yelimlangan eritrotsitlarning qisqichbaqasimon qirralari bo'lgan plyonka mavjudligi ikkita plyus bilan ko'rsatiladi, aglutinatsiyalangan eritrotsitlar bo'laklari zonasi bilan o'ralgan eritrotsitlarning flokulyant cho'kindisi bitta plyusga mos keladi. Nazoratdan farq qilmaydigan keskin aniqlangan eritrotsit cho'kmasi aglutinatsiyaning yo'qligini ko'rsatadi. Titr sinov materialining chegaraviy suyultirilishi sifatida olinadi, bu eritrotsitlar aglutinatsiyasini ikkita plyus bilan keltirib chiqardi. RHA ning ijobiy natijasi bilan, o'ziga xos sarumlar bilan gemagglyutinatsiyani inhibe qilish testi yordamida ajratilgan virus turini aniqlash bilan tadqiqot davom ettiriladi. RTGA virusli gemagglyutinatsiyani bostirish uchun antiserum xususiyatiga asoslangan, chunki o'ziga xos antikorlar tomonidan neytrallangan virus qizil qon hujayralarini aglutinatsiya qilish qobiliyatini yo'qotadi. Viruslarni taxminiy tiplash uchun shishaga tushirish usuli qo'llaniladi. Izolyatsiya qilingan virusning turiga mansubligini yakuniy aniqlash va qon zardobidagi antikorlarni titrlash uchun kengaytirilgan RTHA probirkalarga yoki quduqlarga joylashtiriladi. Buning uchun fiziologik sho'r suvda sarumlarning ikki marta suyultirilishi tayyorlanadi va 0,25 ml ga quyiladi. Zardobni suyultirishga bir tomchi virusli material va bir tomchi 1% eritrotsit suspenziyasi qo'shiladi.Virus turini aniqlash uchun RTGA dan foydalanilganda, ishlovchining teng hajmiga qo'shiladigan tipga xos sarumlar qo'llaniladi. antigenni suyultirish. Izolyatsiya qilingan virusning turi ushbu virusga antikorlarning eng yuqori titrini ko'rsatadigan o'ziga xos immun zardobi bilan belgilanadi.RGA va RTGA virusli infektsiyalarni (mahalli ensefalit, gripp va boshqalar) tashxislash uchun keng qo'llaniladi.
