O`zbekiston respublikasi oliy va o`rta maxsus ta`lim vazirligi qarshi davlat universiteti

 
 
XULOSALAR 
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________ 
 
 
Baho_______ Sana________ ____________imzo 
 
6-Labarrtoriya mashg`uloti:
DNK ajratish uchun namunalar yig‘ish, eritmalar va 
asboblarni tayyorlash 
Ishdan maqsad: 
Talabalarni DNK ajratish uchun namunalar yig‘ish, eritmalar va asboblarni 
tayyorlashni o`rgatish.
 

---

Ish uchun zarur tuzli bufer eritma tayyorlab olinadi. Buning uchun 10ml tuzli bufer eritma 
o`lchov silindriga o`tkaziladi va uning ko`rsatgichi 100 mlga yetguncha distillangan suv 
qo`shiladi va unga 96% li etil spirtidan ko`rsatkich 300 ml ga yetguncha qo`shilib, tayyor bo`lgan 
yeritma aralashtiriladi. Shu usul bilan tayyorlangan eritma germetik yopiq idishga solinib 4° S 
xaroratda saqlanadi. 
•
1,5 ml li probirkaga 200 mkl kuzatilayotgan namunadan qo`shib, 800 mkl Lizirlaydigan 
reagent (suyuq azot) qo`shiladi va probirkadagi maxsulot probirkani 10 marta aylantirish 
yo`li bilan aralashtiriladi.
•
Probirkadagi aralashma (7 min) 65°S xaroratda termostatda qoldiriladi. Agar DNK qattiq 
va quruq to`qimalardan ajratib olinayotgan bo`lsa u xolda termostatda 30-40min 
qoldiriladi.
Probirkadagi aralashmaga 40 mkl (20 mkl) suspenziya NucleoS™ sorbenti 
qo`shiladi. NucleoS™ dan foydalanishdan oldin uni gomogen suspenziya xolga kelguncha 
vorteksda aralashtiriladi. 
•
Probirkani rotatorga joylab 10 min aylantiriladi. (10 ayl/min) 
•
10 sekund sentrifugirlanadi. (5000 ayl/min). 
•
Ehtiyotlik bilan, cho`kmani chayqatmasdan supernatant olib tashlanadi.
•
CHo`kmaga 400 mkl Lizirlaydigan reagent qo`shib, u vorteksda gomogen xolatga 
kelguncha aralashtiriladi. 
•
Probirkaga 1ml tuzli bufer eritma qo`shiladi. (punkt 1 ga qarang). 
•
Aralashma, probirkani 10 marta aylantirish yo`li bilan aralashtiriladi.
•
10 sekund sentrifugirlanadi. (5000 ayl/min) 
•
Ehtiyotlik bilan, cho`kmani chayqatmasdan supernatant olib tashlanadi
•
Probirkaga 1ml tuzli bufer yeritma qo`shiladi, probirkadagi aralashma vorteksda 
aralashtirilib, 10 sekund sentrifugirlanadi (5000 ayl/min) cho`kma chayqatilmasdan 
supernatant olib tashlanadi
•
Yana 13 banddagi xolat qaytariladi. 
•
CHo`kma 4 min davomida 65°C da quritiladi. 
•
Shu probirkaga 200 mkl YekstraGenaYE™ qo`shiladi! 
•
Probirkadagi aralashma 10 sek davomida vorteksda gomogen suspenziya xosil bo`lguncha
suspendirlanadi, keyin (5 min) 65°S xaroratga termostatga qo`yiladi. 
•
Yana bir marta vorteksda suspendirlanib olinadi.
•
Keyin 1 minut davomida sentrifugirlanadi.(10000 ayl/min). 
•
DNK li supernatant toza (nomerlangan) probirkaga o`tkaziladi. DNK -20°S xaroratda
saqlanadi.