O„zbekiston respublikasi oliy va o„rta maxsus ta‟lim vazirligi qarshi davlat universiteti biotexnologiya kafedrasi

2.6. Lipidlarni perekisli oksidlanish induksiyasi va malon dialdegidining hosil 

bo„lishini o„rganish 

 

Fe

2+

/askorbat 

ga 

bog‗liq 

lipidlarning 

perekisli 

oksidlanishining 

nofermentativ  faollashuvi  inkubasiya  muhitiga  (IM  tarkibi:  125  mM  KСI,  10mM 

Tris-НСI, рН 7,5) 10

-5

M FeSO

4

 ва 2

.

10

-4

 M аskorbat qo‗shish orqаli chaqirildi va 1 

ml ajratish muhitida 8 mg oqsil borligi hisoblab topildi. Inkubasiya 37 

o

С hаrorаtli 

suv hammomida doimiy aralashtirib turilgan holatda amalga oshirildi.   

LPO  ni  GPK  (gidroperekis  kumol)  ning  turli  konsentrasiya  (yuqori 

konsentrasiya  4

.

10

-3

M)  larini  qo‗shish  orqali  chaqirildi.  IM  da  oqsilning 

konsentrasiyasi taxminan 8 mg/ ml ni tashkil etdi. 0,2 ml 70 % li TXUK qo‗shish 

orqali  reaksiya  to‗xtatildi.  Shundan  so‗ng  ushbu  namunani  15  minut  davomida 

6000  g  tezlikda  sentrifugalandi.  Keyin  2  ml  qoldiqni  ajratib  oldik  va  1  ml  TBK 

qo‗shdik.  Kontrol  probirkaga  2  ml  suv  va  1  ml  TBK  qo‗shdik.  Aralashmani  15 

minut davomida qizdirdik.  

Hosil  bo‗lgan  malon  dialdegidi  miqdori  molyar  ekstinksii  koeffisienti  (e  = 

1,56

.

10

5

  M

-1

  sm

-1

)  [Бoлдирев,  1990]  dan  foydalanib,  quyidagi  formulaga  asosan 

(nmol MDA/ mg belka = D/1.56x30) hisoblandi.