Ishning borishi. Kartoshka va qulupnayning apikal meristemalarini o‘stirish uchun moslashtirilgan (modifikatsiyalangan) Murasige-Skuga oziqa muhitlarini tayyorlash. Oziqa muhitlari tarkibi 4-5 jadvallarga berilgan. Avvalo makro-, mikrotuzlar va vitaminlarning boshlang‘ich eritmalarini tayyorlash kerak. Odatda, Murasige va Skuga oziqa muhitlari quyidagi birikmalardan tayyorlanadi.
1. NH4NO3, KNO3, KN2PO4, MgSO4 · 7H2O (MgSO4 ni cho‘kmaga tushishini oldini olish uchun, qizdirmasdan oxirida solinadi);
2. CaCl2 eritmasi;
3. Temir xelati eritmasi (FeSO4 va Na2EDTA eritmasi birgalikda qaynagunga qadar qizdirilganda temir xelati hosil bo‘ladi);
4. Mikro elementlar eritmasi.
Boshlang‘ich eritmalar uchun kerakli tuzlar miqdori va boshlang‘ich eritmalarning oziqa muhit uchun kerakli miqdorlari 1-jadvalda keltirilgan.
Murasige-Skuga bo‘yicha boshlang‘ich eritmalar tayyorlash
1-jadval
Oziqa muhitning tarkibiy qismi
|
Qo‘shimchalar
|
Makrotuzlar boshlang‘ich eritma uchun
|
g/l
|
1 litr oziqa muhit uchun 50 ml boshlang‘ich eritma olinadi
|
NH4NO3
KNO3
CaCl2 (suvsiz)
yoki CaCl2·2H2O
KN2PO4
MgSO4 · 7H2O yoki suvsiz
|
33
33
8,8
13,8
3,6
7,4
|
Mikrotuzlar, 100 ml boshlang‘ich eritma uchun
|
mg/l
|
1 litr oziqa muhit uchun 1 ml boshlang‘ich eritma olinadi
|
H3BO3
MnSO4·4H2O
ZnSO4
KI
Na2MoO4·2H2O
CuSO4 · 5H2O
CoCl2 · 6H2O
|
620
2230
860
83
25
25
25
|
100 ml boshlang‘ich eritma uchun
|
mg
|
1 litr oziqa muhit uchun 5 ml boshlang‘ich eritma olinadi
|
Fe-xelat
EDTA
|
557
745
|
Tayyorlangan eritmalarni og‘zi zich yopiladigan idishlarga solib, qog‘oz yorliq yopishtirib, muzlatgichda saqlash lozim. Temir xelati to‘q rangli shisha idishda saqlanadi. Vitaminlarning o‘ta to‘yingan eritmalari aolhida-alohida tayyorlanadi va pensillin idishlarida saqlanadi. Eritmalar tayyorlash uchun vitaminlar o‘n martalik og‘irlikda o‘lchanib 10 ml suvda eritiladi. SHu eritmaning 1 ml miqdori 1 litr Murasige-Skuga eritmasini tayyorlash uchun etarlidir. Endi boshlang‘ich eritmalardan foydalangan holda keyingi darslarda kartoshka va qulupnay apikal meristemalarini o‘stirish uchun oziqa muhitlari tayyorlash kerak. O‘lchami 1 litrli kimyoviy stakanga saxaroza solib idishning yarmigacha distillangan suv quyib isitiladi, saxaroza erigandan so‘ng, xona haroratigacha sovitiladi va unga makro-, mikrotuzlarning boshlang‘ich eritmalari va vitaminlar kerakli miqdorda solinadi (1 jadval). Kartoshka apikal meristemasini o‘stirish uchun oziqa muhitga aktivlangan ko‘mir (4-jadval) va regulyatorlar: GK, kinetin, adenin solinadi. Gibberal kislotasi bir necha tomchi spirtga eritilib, ozgina suv qo‘shiladi va oziqa muhitga solinadi. Sitokininlar suvda yaxshi erimaydi, balki ishqor, kislota, etil spirti va etil efiri eritmalarida yaxshi eriydi. Sitokinin eritmalari tayyorlash uchun gormonlarga ozgina (3-5 ml) distillangan suv, 0,5-1 ml 0,1 N KOH qo‘shib aralashtiriladi va eriguncha isitilib, so‘ngra oziqa muhitga solinadi. So‘ng albatta eritmaning rN i o‘lchanadi, rN ko‘rsatgichi 5,5-5,6 atrofida bo‘lishi kerak. Eritma rN normaga to‘g‘ri kelmagan hollarda oziqa muhitga 0,1 M HCl eritmasidan qo‘shiladi. Bir vaqtning o‘zida boshqa stakanga agar-agar eritiladi. Buning uchun suvda ivitilgan agar (7 g) elektroisitgichda to‘liq erigunga qadar qizdiriladi va harorat 500 S ga tushguncha saqlab turiladi. So‘ng agarni tuzlar, vitaminlar va saxaroza bilan birga idishga solib, eritmaning hajmini suv bilan 1 litrga etkazish kerak. Oziqa muhitini probirkalarga solib (taxminan 1/3 hajmda), probirkalar og‘zi paxta tiqinlar bilan yopiladi. Oziqa muhitlari avtoklavda sterillanishi kerak.
Do'stlaringiz bilan baham: |