|
Kolorimetrik titrlash usuli
Kolorimetrik titrlash usulida konsentratsiyasi noma'lum bo'lgan tekshirilayotgan rangli eritmaning ma'lum bir hajmi ma'lum bir konsentratsiyali rangli standart eritma qo'shilgan bir xil hajmdagi suv bilan taqqoslanadi. Byuretkadagi eritmani (titrat) rangi tekshiriluvchi eritma bilan tenglashguncha qo'shing. Fermentatsiya zavodlarini texnokimyoviy nazorat qilishda bu usul 0,1 N millilitrda ifodalangan pivo rangini aniqlash uchun ishlatiladi. rangni 100 ml pivo bilan tenglashtirish uchun 100 ml distillangan suvga yod eritmasi qo'shiladi. Taraqqiyot. Ushbu aniqlash quyidagi tarzda amalga oshiriladi. 150-200 ml hajmli ikkita bir xil kimyoviy stakan oq qog'ozga yoki oq chinni plastinka ustiga qo'yiladi. Biri 100 ml pivoga, ikkinchisi - 100 ml distillangan suvga quyiladi. Byuretkadan bir stakan suvga 0,1 N aralashtirib quyiladi. yod eritmasi yuqoridan ham, yon tomondan ham (suyuqlik orqali) qaralganda suyuqliklarning rangi bir xil bo'lguncha.
Fotokolorimetrik usul
Bu usul kitobning “Sabzavotlarni quritish va oziq-ovqat konsentratlarini ishlab chiqarishni texnokimyoviy nazorat qilish” bobida bayon etilgan.
Spirtli ichimliklar ishlab chiqarishning oraliq mahsulotlarida uglevodlar tarkibini kolorimetrik usul bilan aniqlash uchun reagent kimyoviy moddada antron eritmasi hisoblanadi. shu jumladan nisbiy zichligi 1,830 (konsentratsiyasi 0,2% og'irlik) bo'lgan sulfat kislota. Yuqori kislotali muhitda glyukoza parchalanib, furfural hosilalarni hosil qiladi, ular antron bilan reaksiyaga kirishib, yashil kompleks birikma hosil qiladi. Ushbu usul uglevodlarning umumiy miqdorini aniqlaydi va ma'lumotlar glyukoza birliklarida olinadi. Polisaxaridlarni glyukozaga oldindan gidroliz qilish shart emas, chunki antron bilan reaksiya kuchli kislotali muhitda sodir bo'ladi; bu holda polisaxaridlar monosaxaridlarga gidrolizlanadi, ular antron bilan reaksiyaga kirishadi.
Uglevod tarkibini aniqlash uchun x eritmalari bo'yicha kalibrlash egri chizig'ini qurish kerak. shu jumladan 5-10 mg / 100 ml konsentratsiyali glyukoza (59-rasm). Kalibrlash egri chizig'i quyidagicha tuzilgan. Yechimlarni tayyorlang x. har bir milligram orqali 100 ml eritmada 5 dan 10 mg gacha bo'lgan glyukoza, shu jumladan. Keyin sig'imi 20 ml bo'lgan o'tga chidamli shishadan yasalgan probirkaga 5 ml reaktiv quyiladi va unga 2,5 ml tayyorlangan glyukoza eritmasidan ehtiyotkorlik bilan ikki qatlam hosil bo'ladigan tarzda qo'shiladi. Naycha maydalangan tiqin bilan yopiladi, uning tarkibi tez aralashtiriladi va trubka 6 daqiqa davomida qaynayotgan suv hammomiga joylashtiriladi. Bu vaqtdan so'ng probirka vannadan chiqariladi, reaksiya aralashmasi 20 ° C ga qadar sovutiladi va rangli eritma yorug'lik to'lqin uzunligi 610 nm bo'lgan yorug'lik filtri va faset uzunligi bo'lgan kyuvetta yordamida fotokolorimetrda ranglanadi. 5 mm. O'lchovlar eng konsentrlangan eritmadan boshlanadi (bu misolda 100 ml eritmada 10 mg glyukoza). Optik zichlik chap baraban yordamida o'lchanadi. Barcha eritmalarning optik zichligini o'lchagandan so'ng, abscissa o'qi bo'ylab ma'lum konsentratsiyalarni va ordinata o'qi bo'ylab mos keladigan optik zichliklarni ko'rsatadigan kalibrlash egri chizig'i chiziladi. Berilgan egri chiziqdan ko'rinib turibdiki (59-rasmga qarang), optik zichlik eritmadagi glyukoza konsentratsiyasiga mutanosib ravishda ortadi. Bu munosabat to'g'ri chiziq sifatida ifodalanadi.
Uglevodlarni aniqlash uchun tekshiriluvchi eritma 100 ml probirkadagi 5-10 mg miqdorida suyultiriladi va aniqlash quyidagicha amalga oshiriladi: probirkaga 5 ml reaksiya aralashmasi quyiladi, keyin esa 2,5 ml. sinov eritmasi ikki qatlam hosil bo'lishi uchun ehtiyotkorlik bilan qo'shiladi. Kelajakda kalibrlash egri chizig'ini qurishda bo'lgani kabi davom eting. Kalibrlash chizig'i bo'ylab D optik zichligini aniqlab, eritmadagi glyukoza miqdori topiladi. Eritmadagi glyukoza miqdorini tenglama yordamida ham hisoblash mumkin
bu to'g'ri chiziqning tenglamasi va bu to'g'ri chiziqning koordinatalari bo'yicha tuzilgan.
Odatda, optik zichlik faset uzunligi 5 mm bo'lgan kyuvetada aniqlanadi. Agar glyukoza eritmasi juda konsentrlangan bo'lsa, u holda antron bilan reaksiyaga kirishgandan so'ng, juda zich rangli eritma olinadi, uning optik zichligi fotokolorimetr barabanining cheklovchi optik zichligidan kattaroq bo'ladi va uni aniqlash mumkin bo'lmaydi. uning qiymati; yuqori darajada suyultirilgan glyukoza eritmasi bilan optik zichlik qiymati kichik bo'ladi va aniqlash xatosi sezilarli bo'ladi. Ikkala holatda ham tahlilni takrorlash, shunga mos ravishda eritmaning suyultirilishini o'zgartirish kerak. Bundan tashqari, tahlilni takrorlamasdan, kolorimetriya paytida boshqa kyuveta yordamida optik zichlikni aniqlash mumkin: faset uzunligi 3 yoki 1 mm bo'lgan kuchli rangli eritmalar uchun, zaif rangli eritmalar uchun - 10 yoki 20 mm. Boshqa kyuvetlarda optik zichlikni olgandan so'ng, faset uzunligi 5 mm bo'lgan kyuvetta uchun chizilgan kalibrlash to'g'ri chiziq bo'ylab glyukoza miqdorini aniqlash mumkin emas. Avval tenglama bo'yicha kyuveta chetining bu uzunligi uchun olingan eritmaning optik zichligi qiymatini hisoblash kerak.
bu erda D5 - faset uzunligi 5 mm bo'lgan kyuveta yordamida olingan eritmaning optik zichligi; Dx - faset uzunligi mm bo'lgan kyuvetada olingan eritmaning optik zichligi.
Belgilangan usul pentozalar va pentozanlar bo'lmagan glyukoza qoldiqlari bo'lgan eritmalar uchun qo'llaniladi.
Nazorat savollari:
Fotokolorimetrik usul haqida tushuncha.
Fotokolorimetrik tahlil usulining afzalliklari.
Fotokolorimetrik suyuqlik.
Foydalanilgan adabiyotlar:
1. http://www.lex.uz
2. http://www.ziyonet.uz
3. http://www.gov.uz
Do'stlaringiz bilan baham: |
