Mavzu: ifa, Immunobiot,pzr, radioimmum reaksiyalarning yuqumli



Download 0,49 Mb.
Pdf ko'rish
bet1/3
Sana25.06.2021
Hajmi0,49 Mb.
#101226
  1   2   3


 

Mikrobiologiya, Virusologiya va Immunologiya 

fanidan  

 

 



 

 

 



Mavzu: IFA, Immunobiot,PZR, radioimmum reaksiyalarning yuqumli 

kasalliklar tashxisida qo’llanilishi, qo’yish texnikasi. 

Bajaruvchi: 220-A guruh talabasi Ko’charov Karomatullo 

 

 



 

 

Toshkent-2020 




 

IFA ko'p jihatlari bilan KIAga o'shash ketadi. Biroq undan qo'shimcha 

reagentlar AG vaAT. Immun kompleks hosil qilgandan so'ng ushbu 

sistemaga fermentlar bilan boyitilgan substrakt qo'shiladi, bunda muhit 

sargish yo sargish-yashil rangga kiradi. Oxirgi  yillarda IFA ning turli 

modifikatsiyalari ishlab chiqildi. Klining immunologic amaliyotda 

ko'proq IFA ning qattiq fazali “Sendvich” usulidan foydalaniladi.  IFA 

ning bu sulini bevosita va bilvosita usullari ishlab chiqilgan.  

 



Fermentlarga bog'liq immunosorbent tahlil (IFA) immunokimyoviy 

tahlil turlaridan biridir. Bu antigen (AG) ning immunitet kompleksi hosil 

bo'lishi bilan mos keladigan antikor (AT) bilan yuqori darajada o'ziga 

xos immunologik reaktsiyasiga asoslangan. Bunday holda, tarkibiy 

qismlardan biri ferment bilan konjuge qilinadi. Fermentning xromogen 

substrat bilan reaktsiyasi natijasida rangli mahsulot hosil bo'ladi, uning 

miqdori spektrofotometrik usulda aniqlanishi mumkin.  

IFAning har qanday versiyasida 3 ta majburiy bosqich mavjud: 

1.Sinov birikmasini ma'lum bir antikor tomonidan aniqlash bosqichi; 

2.Immun kompleksi yoki erkin bog'lanish joylari bilan konjugatning 

bog'lanishini shakllantirish bosqichi; 

3.Ferment yorlig'ini qayd etilgan signalga aylantirish bosqichi. 

Reaksiya quyidagilarni o'z ichiga oladi: 

Qattiq faza; 

AG va AT; 

Konjugat (ferment bilan belgilangan antigen yoki antikor); 

Ferment markeri; 

Substrat; 

Reaktivni to'xtating (ko'pincha sulfat kislota ishlatiladi). 

IFAning qattiq fazasi sifatida turli xil materiallardan foydalanish 

mumkin: polistirol, polivinilxlorid, polipropilen va boshqalar. 

Probirkaning devorlari, 96 quduq va boshqa plitalar, munchoqlar, 

munchoqlar, shuningdek nitroseluloza va boshqa oqsillarni faol ravishda 

so'rib oladigan membranalar qattiq faza bo'lib xizmat qilishi mumkin. 

IFAda ishlatiladigan AG va AT yuqori darajada tozalangan va juda faol 

bo'lishi kerak. AH yuqori antigenlik, optimal zichlik va antigenik 

determinantlar soniga ega bo'lishi kerak. 

IFAning sezgirligi ishlatiladigan antikorlarning kontsentratsiyasiga, 

faolligiga va o'ziga xosligiga bog'liq. Amaldagi antikorlar turli xil (IgG 



yoki IgM) va subklasslar (IgG1, IgG2) bo'lgan poli- yoki monoklonal 

bo'lishi mumkin. 

Monoklonal antikorlardan foydalanish bilan usulning sezgirligi va o'ziga 

xosligi oshadi. Bunday holda, namunalarda past konsentratsiyali AG 

(AT) ni aniqlash mumkin bo'ladi.

  

Substratni tanlash birinchi navbatda yorliq sifatida ishlatiladigan 



ferment bilan belgilanadi, chunki "ferment-substrat" reaktsiyasi juda 

o'ziga xosdir. 

HRP uchun 3,3 ', 5,5'-tetrametilbenzidin (TMB xromogen) substrat 

sifatida ishlatiladi. Rangli reaktsiya paydo bo'ladi, uning intensivligi 

tahlil qilinadigan moddalar miqdoriga bog'liq; 

ALP uchun substrat 4-nitrofenil fosfat; 

b-D-galaktozidaza glyukoza va galaktoza hosil qilish uchun laktoza 

gidrolizini katalizlaydi. 

IFAning tasnifi 

 

IFA usullarini tasnifi bir necha yondashuvlarga asoslangan: 



 

1 - IFAning birinchi bosqichida mavjud bo'lgan reaktivlarning turlari 

bo'yicha: 

 

Birinchi bosqichda raqobatdosh IFAda tizim ferment bilan etiketlangan 



va o'ziga xos bog'lanish joylari uchun raqobatlashadigan tahlil qilingan 

birikmani ham, uning analogini ham o'z ichiga oladi; 

Raqobatbardosh bo'lmagan usullar birinchi bosqichda faqat tahlil 

qilingan birikmaning va o'ziga xos biriktiruvchi joylarning mavjudligi 

bilan tavsiflanadi. 

2 - sinov moddasini aniqlash printsipiga muvofiq: 




Moddaning konsentratsiyasini to'g'ridan-to'g'ri aniqlash (AG yoki AT). 

Tekshirilayotgan moddaga antikorlar ishlatiladi, ular ma'lum bir yorliq 

bilan birlashtirilgan. Bunday holda, yorliq shakllangan o'ziga xos AG-

AT kompleksida bo'ladi. Analitikning konsentratsiyasi qayd etilgan 

signalga to'g'ri proportsional bo'ladi; 

Moddaning konsentratsiyasini bilvosita aniqlash - bog'lanish joylarining 

umumiy soni va qolgan erkin bog'lanish joylari orasidagi farq bilan. 

Bunday holda, analitik kontsentratsiyasi oshadi va qayd etilgan signal 

kamayadi, shuning uchun bu holda qayd etilgan signal kattaligiga teskari 

bog'liqlik kuzatilishi mumkin. 

3 - natijalar turi bo'yicha: 

Miqdoriy; 

Yarim miqdoriy; 

Sifat. 


 


Download 0,49 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
  1   2   3




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©hozir.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling

kiriting | ro'yxatdan o'tish
    Bosh sahifa
юртда тантана
Боғда битган
Бугун юртда
Эшитганлар жилманглар
Эшитмадим деманглар
битган бодомлар
Yangiariq tumani
qitish marakazi
Raqamli texnologiyalar
ilishida muhokamadan
tasdiqqa tavsiya
tavsiya etilgan
iqtisodiyot kafedrasi
steiermarkischen landesregierung
asarlaringizni yuboring
o'zingizning asarlaringizni
Iltimos faqat
faqat o'zingizning
steierm rkischen
landesregierung fachabteilung
rkischen landesregierung
hamshira loyihasi
loyihasi mavsum
faolyatining oqibatlari
asosiy adabiyotlar
fakulteti ahborot
ahborot havfsizligi
havfsizligi kafedrasi
fanidan bo’yicha
fakulteti iqtisodiyot
boshqaruv fakulteti
chiqarishda boshqaruv
ishlab chiqarishda
iqtisodiyot fakultet
multiservis tarmoqlari
fanidan asosiy
Uzbek fanidan
mavzulari potok
asosidagi multiservis
'aliyyil a'ziym
billahil 'aliyyil
illaa billahil
quvvata illaa
falah' deganida
Kompyuter savodxonligi
bo’yicha mustaqil
'alal falah'
Hayya 'alal
'alas soloh
Hayya 'alas
mavsum boyicha


yuklab olish