Laboratoriya mashg‘ulotlari

Drajelarning o‟rtacha massasi va massaning birxilligi. Drajelarning o‘rtacha massasi 

0,95 dan 1,05 g gacha (1,0±5%) bo‘lishi kerak. Drajelarning o‘rtacha massasidan chetlanish 

±10% oshmasligi kerak.Aniqlanish DF IX, 2jild, 154 bet ga mos kelishi kerak. 

Talk.3% ko‘p bo‘lmasin. (DF IX, 2jild, 154 bet). 

Parchalanishi. 30 min kam bo‘lmasin.(DF IX, 2jild, 154 bet). 

Mikrobiologik  tozaligi.  Aniqlanish  DF  IX,  2  jild,  193  bet  va  №3  O‘zgartirish  (3A 

kategoriya) ga mos kelishi kerak. 

Miqdoriy tahlil. Retinol palmitat.YuSSX usuli bo‘yicha aniqlanish o‘tkaziladi. 

1  g  (aniq  tortma)  kukun  holatigacha  maydalangan  drajelarni  hajmi  50  ml  o‘lchov 

kolbasiga  solinadi,  25  ml  2-propanol  quyiladi,  bir  nechta  butiloksitoluol  krisstallaridan 

qo‘shiladi va 20 daqiqaga davomida qorong‘u joyda aralashtiriladi. Eritma hajmini 2-propanol 

bilan  belgigacha  to‘ldiriladi,  aralashtiriladi  va  5  daqiqa  davomida  7000  ayl/daqiqasiga 

sentrofugalanadi. (tekshirilayotgan eritma). 

4  mkl  tekshirilayotgan  eritmadan  va  standart  eritma  namunasini  ―Milixrom  A-02‖ 

suyuq  xromatogrammasida  aniqlanish  diapazoni  bilan  ta‘minlangan    spektrofotometrda  90 

dan  360  nm  gacha  bo‘lgan  to‘lqin  uzunligida  quyidagi  sharoitlarda  xromatografiya 

o‘tqaziladi: 

---

195 

 

- Zarrachasi  5  mkm  o‘lchamli  yoki  analogi  bo‘lgan    Prontosil  C

18

  sorbenti  bilan 

to‘ldirilgan,zanglamaydigan (2×75) mm li po‘latkolonka; 

- Harakatlanuvchi  faza:  1:1  nisbatda  olingan    2-propanol  (TU  6-09-402-87)  va 

atsetonitril (TU 6-09-14-2167-84) aralashmasi. Izokratik rejimda olib boriladi; 

- elyuent oqimining tezligi 0,1 ml/daq; 

- to‘lqin uzunligining o‘xshashligi  326 nm; 

- kalonkaning harorati 40°C; 

- xromatogrammaningregistratsiya vaqti 9 daqiqa. 

Bitta  draje  tarkibidagi  retinol  palmitat  (X)  miqdorini  grammlarda  formula  orqali 

hisoblanadi: 

25

100

50

1

1

0

0

1

















a

S

m

a

S

X

, 

S

1

–tekshirilayotgan  eritmaning  xromatogrammasida  retinol  palmitat  cho‘qqisining 

yuzasi; 

S

0

 – standart eritma namunasining xromatogrammasidagi retinol palmitat cho‘qqisining 

yuzasi; 

a

1

 – dori moddasining grammlardagi massasi; 

a

0

 - standart eritma namunasidagi retinol palmitatning grammlardagi massasi; 

m – drajening o‘rtacha massasi grammlarda. 

Tarkibi  S

36

N

60

O

2

  (retinol  palmitat)  0,0234dan  0,00316g  (4250  dan  5750  TB)  gacha 

bo‘ladi, bunda bitta drajening tarkibidagi o‘rtacha massasini hisobga olish kerak. 

Tahlil  natijalari  yaroqli  ekanligini  tekshirish  uchun,  ―Xromatogramma  tizimining 

yaroqligini tekshirish‖bo‘yicha test talablari o‘tkaziladi. 

1.  Ko‘rsatma.  Standart  etima  namunasini  tayyorlash.  0,14  g  (aniq  tortma)  retinol 

palmitat (MH 42-8695-01) 100% modda hisobida, 100 ml hajmli o‘lchov kolbasiga solinadi, 

50 ml 2-propanolda (TU 6-09-402-87) eritiladi, eritma hajmini shu erituvchi orqali belgigacha 

to‘ldiriladi, aralashtiriladi va 20 daqiqa qorong‘u joyda qoldiriladi. 

1  ml  hosil  bo‘lgan  eritmai  hajmi  25  ml  bo‘lgan  o‘lchov  kolbasiga  solinadi,  eritma 

hajmini  2-propanol  bilan  belgigacha  to‘ldiriladi,  aralashtiriladi  va  5  daqiqa  davomida  7000 

ayl/daqiqasiga sentrofugalanadi. (Standart eritma namunasi). 

Eritmani yangi tayyorlangan holda ishlatiladi. 

2.  Xromatogramma tizimining yaroqligini tekshirish. 

Standart eritma namunasining xromatogrammasida miqdoriy tahlil asosida o‘tkaziladi. 

Xromatogramma yaroqli hisoblanadi, agar quyidagi sharoitlar bajarilsa: 

1.Retinol  palmitat  cho‘qqisini  kolonka  xromatogrammasining  samaradorligini    (N) 

formula orqali topiladi: 

2

2

1

2

Re

54

,

5

W

t

N

t





, 

Bu erda:  

t

1

 – retinol palmitat cho‘qqisini ushlab qolish vaqti, daqiqalarda; 

W

1/2

 – balandligiing yarmi cho‘qqining eniga nisbati, daqiqalarda. 

2.Assimetrik retinol palmitat cho‘qqisini (T) formula orqali topiladi: 

a

W

T





2

05

,

0

, 

Bu yerda:  

W

0,05

 –retinol palmitat cho‘qqisini eni balandlik asosida 5% i daqiqalarda; 

a  –  cho‘qqi  frontidan  masofa,  5%  balandlikdan  olingan  asosdan  balandlikgacha, 

maksimumgacha tushirilgan cho‘qqidaqiqalarda. 

---

196