Laboratoriya mashg‘ulotlari

Askorbin kislotasi  (Vitamin C), nikotinamid (Vitamin PP), piridoksin gidroxlorid 

(Vitamin B

6

), tiamin xlorid (Vitamin B

1

), riboflavin (Vitamin B

2

). 

 

2  g  (aniq  tortma)  kukun  holatigacha  maydalangan  drajelarni  hajmi  50  ml  o‘lchov 

kolbasiga  solinadi,  5  ml  suv  va  10  ml  10%  kaliy  ishqor  eritmasidan  qo‘shiladi,  10  daqiqa 

davomida  chayqatiladi  va  eirtma  hajmini  belgigacha  to‘ldiriladi,  aralashtiriladi  va  ―ko‘k 

belbog‖  qog‘ozli  filtri  orqali  filtrlanadi.  5  ml  filtratni  25  ml  hajmili  o‘lchov  kolbasiga 

solinadi, eritma hajmini suv bilan to‘ldiriladi va aralashtiriladi (tekshirilayotgan eritma). 

5  mkl  tekshirilayotgan  eritmadan  va  standart  eritma  namunasidan  ―Milixrom  A-02‖ 

suyuq xromatogrammasida aniqlash diapazon bilan ta‘minlangan  spektrofotometrda 90 dan 

360 nm gacha bo‘lgan to‘lqin uzunligida quyidagi sharoitlarda xromatografiya o‘tqaziladi: 

- Zarrachasi  5  mkm  o‘lchamli  yoki  analogi  bo‘lgan    Prontosil  C

18

  sorbenti  bilan 

to‘ldirilgan, zanglamaydigan (2×75) mm li po‘lat kolonka; 

- Harakatlanuvchi faza: elyuent A-0,4M litiy perxlorat (rn=3,0), elyuent B-atsetonitril.  

- elyuent gradiyent rejimida olib boriladi; gradiyent: 8 daqiqa. 

- elyuent oqimining tezligi 0,1 ml/daq; 

- to‘lqin uzunligining o‘xshashligi  210 nm; 

- kalonkaning harorati 35°C; 

- xromatogrammaning registratsiya vaqti 25 daqiqa; 

- askorbin  kislotaning  nisbatan  ushlab  turish  vaqti  –  1;  nikotinamid  –  1,9,  pirodoksin 

gidroxlorid - 3,9, tiamin xlorid – 4,3; riboflavin – 9,8. 

Bitta  draje  tarkibidagi  askorbin  kislota(X)  miqdorini  grammlarda  formula  orqali 

hisoblanadi: 

25

100

50

25

50

10

1

0

1





















a

S

m

a

S

X

st

, 

Bitta  draje  tarkibidagi  nikotinamid,  pirodoksin  gidroxlorid,tiamin  xlorid,riboflavin  (X) 

miqdorlarini grammlarda formula orqali hisoblanadi: 

5

100

50

25

50

5

1

0

0

1





















a

S

m

a

S

X

 

S

1

  –  tekshirilayotgan  eritmaning  xromatogrammasida  aniqlanayotgan  vitamin 

cho‘qqisining yuzasi; 

S

0

 

–  standart  eritma  namunasining  xromatogrammasidagi  aniqlanayotgan 

vitamincho‘qqisining yuzasi; 

a

1

 – dori moddasining grammlardagi massasi; 

a

0

 - standart eritma namunasidagi aniqlanayotgan vitaminning grammlardagi massasi; 

m – drajening o‘rtacha massasi grammlarda. 

Bitta draje tarkibida bo‘lishi kerak: 

Askorbin kislotasi (Vitamin C)-  0,063 dan 0,077 g gacha; 

Nikotinamid (Vitamin PP) - 0,00135 dan 0,00165 g gacha; 

Piridoksin gidroxlorid (Vitamin B

6

) - 0,0018 dan 0,0022 g gacha; 

Tiamin xlorid (Vitamin B

1

) - 0,0018 dan 0,0022 g gacha; 

Riboflavin (Vitamin B

2

) 

- 0,0018 dan 0,0022 g gacha. 

Tahlil  natijalari  yaroqli  ekanligini  tekshirish  uchun,  ―Xromatogramma  tizimining 

yaroqligini tekshirish‖bo‘yicha test talablari o‘tkaziladi.