Ion almashinuvi kromatografiyasi. Ochilish tarixi

Kromatografik jarayon
.
Modda va sorbentning ion o'zaro
ta'siri.
Sorbent granulalari miqdori bo'yicha
sobit ionogen guruhlar teng ravishda taqsimlanadi. Kuchli ion almashinuvida barcha
ionogen guruhlar ionlashtiriladi va elektr zaryadini ko'taradi va zaif
ionlarda bu guruhlarning faqat aniq (pHga bog'liq) qismini belgilaydi.
Biroq, har bir vaqtning o'zida kuchli almashtirgichda ham
, barcha ionlangan guruhlar moddaning ionlari va molekulalari bilan elektr 
shovqinlari uchun mavjud emas
. Granulalar ichidagi harakatlanuvchi faza eritmasida
ushbu guruhlarning elektr zaryadlarini "blokirovka qiluvchi" kontrionlar mavjud. 
Ular
-protonlar, gidroksil yoki ion almashinuvining boshqa boshlang'ich kontrionlari-
Nika. Bufer va tuz ionlari ularga qo'shiladi, bu odatda bu
maqsad uchun eluentga kiritiladi. 
Qarama-qarshi va ionning o'zaro tortishish ta'siri ostida yaqinlashganda, ion jufti 
hosil bo'ladi. Uning tashqarisida elektr maydoni yo'qoladi, chunki ikkita bitta 
maydon mavjud
5
qarama-qarshi belgining satrlari. Bu ionogen guruh tomonidan zaryadning 
"bloklanishi" atamasining ma'nosi
.
Har bir birlik blokirovkalash harakati uzoq davom etmaydi –
suv molekulalarining termal zarbalari ostida engil konturlar ajralib
chiqadi, bu esa değiştirici bo'lmagan harakatlanuvchi ionlarning zaryadlarini ochib 
beradi. Ammo tez orada boshqa cont-

---

Rions o'z o'rnini egallaydi.

---

Elüentdagi tuz (yoki bufer) konsentratsiyasi qanchalik yuqori
bo'lsa, ion almashinuvining har biri bir vaqtning o'zida ochiq qoladi
. Endi biz asta-sekin kromatografaemyh moddalar molekulalari granulalar ichiga 
yoyilgan bir rasm to'ldiradi
. Bizni qiziqtirgan
biologik molekulalar tsvitterionlar( aminokislotalar) yoki amfolitlardir
(oqsillar, NK). Zwitterionlar ikkita zaryadga ega – ijobiy va salbiy
. Izoelektrik nuqtada, har bir zwitterion molekulasining ulushi
o'rtacha bir musbat (aminogroup) va bitta ot-
retsent ( karboksil) zaryadga to'g'ri keladi. Bu o'rtacha. Aslida,
neytral tsvitterionlar bilan bir qatorda, har qanday vaqtda har ikkala zaryadni ham 
ko'tarib,
eritmada pH = pi bilan birga, statistik jihatdan bir xil
son ijobiy va salbiy ionlangan ionlar bo'ladi
, bu erda ikki ion guruhlaridan biri bu vaqtda ionlashtirilmagan bo'ladi. PH > >
py bilan barcha molekulalarning kombinatsiyasida salbiy zaryadlarning soni
ijobiy sondan oshib ketadi,ammo eritmada
ikkala belgining zaryadini yoki hatto ijobiy zaryadlangan ko'plab molekulalar 
mavjud bo'ladi. Turli
xil zaryadlangan ionlar sonining
o'zaro bog'liqligi salbiy zaryadga ega bo'lgan mole-kul foydasiga o'zgaradi va pH 
qiymati qanchalik baland bo'lsa.
Shunga o'xshash dalillar pH ishi uchun keltirilishi mumkin
Asosan, amfolitlarda, masalan, oqsillarda xuddi shunday holat yuzaga
keladi. Faqatgina farq shundaki, qarshi-
noto'g'ri belgining ikkita to'lovi o'rniga makromolekulyar umumiy elektr zaryadlari
ko'plab ijobiy ayblovlar va ko'plab salbiy
ta'sirlar bilan belgilanadi. Birinchidan, pH = pi va boshqa pH qiymatlari kabi
6

---

amfolitlar molekulalarining katta populyatsiyasi odatda neytral
va jami ijobiy va salbiy zaryadlangan molekulalardir,
ikkinchidan, amfoli molekulasining umumiy elektr zaryadidan qat'i nazar
, uning yuzasida deyarli har ikkala belgining zaryadlangan guruhlari mavjud
.
Bularning barchasidan
kelib chiqadiki, modda molekulasi va ion almashinuvi o'rtasida elektrostatik aloqa 
paydo bo'lishi uchun quyidagi
uchta voqeaning tasodifiyligi bo'lishi kerak. 
Değiştiricinin zarracha ichida uning issiqlik diffuziya davomida
, amfolit molekulasi sorbent va molekulalar yuqori ustida raznomenno zaryadlangan 
ionlari samarali turli ayblovlar jalb marjonlarni kuch ta'sir bo'lgan masofaga 
yaqinlashgan edi, shunday qilib, bir mavzu yoki gözeneklerin devoriga yaqinlashish 
kerak
. Shu nuqtada, har ikkala yaqin ionlar
ham unutilmas kontrionlar bo'lishi kerak. Bunday tasodif ehtimoli
katta bo'lmasa-da, lekin
har bir moddaning molekulasini bir vaqtning o'zida ishlatadigan almashtirgich 
yuzasi bilan to'qnashuvlar soni juda katta
bo'lsa-da, deyarli har bir molekula uchun o'rtacha vaqt oralig'ida
narsa kamida bir marta amalga oshiriladi va oka molekulasi değiştiricinin
matritsasi bilan bog'liq. Uning oldinga harakatlanishi oldindan
kesiladi, garchi suv molekulalarining termal zarbalari ostida
, uning fiksaj nuqtasi atrofida chayqaladi.
Matritsadan biologik makromolekulani "yirtib tashlash
" oson bo'lmaydi, birinchi navbatda, katta massa inertsiyani keltirib chiqaradi-
uning xatti-harakati, ikkinchidan,

---

ko'plab suv molekulalarining makromolekulyarlari yuzasiga ko'p tomonlama zarba 
impulslari tenglashadi-bir
-biriga osib qo'yiladi. Shunga qaramay
, bu momentumlarning ta'siri molekulani ilgari yaqinlashgan
ionlar orasidagi marjonlarni jalb qilish muhim rol o'ynashni to'xtatadigan masofani 
olib tashlash uchun etarlicha katta bo'ladi
va
molekula matritsadan uzilib qoladi. Agar tegishli konsollarning kontsentratsiyasi-
7
ionlarning atrofidagi rionlar kichik va har ikkala ionlar bir muncha vaqtdan
beri o'zlarining bepul to'lovlarini saqlab qolishadi, ya'ni
brownian harakati tufayli moddaning molekulasiga uzoq bo'lmagan Shaya yana
matritsa ionlari bilan yaqinlashadi.
Agar kontrionlarning kontsentratsiyasi katta bo'lsa va ular darhol
oldindan o'zaro ta'sir qiluvchi ionlardan birini to'sib qo'ysa, u holda oyna 
moddasining molekulasi
matritsaning ma'lum bir nuqtasidan chiqib ketadi va
uning diffuzion harakatini davom ettiradi, shuning uchun qulay shart-sharoitlar mos
kelmaguncha, uni almashtirgichning granulasi ichidagi yangi nuqtada tuzatmaydi va
elüent oqimi bilan o'chirilmaydi.