Xxiv международная медико-биологическая конференция молодых исследователей Фундаментальная наука и клиническая

ВЛИЯНИЕ МОЛЕКУЛЯРНОГО КРАУДИНГА 
НА ЭСТЕРАЗНУЮ АКТИВНОСТЬ АЛЬБУМИНА
Воронина П.А., асп., м.н.с., Шмурак В.И., н.с.
Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова,
Санкт-Петербург, Россия
Научный руководитель: Гончаров Н.В., д.б.н.
Сывороточный альбумин (СА) в значительной степени опреде-
ляет фармако- и токсикокинетику лекарственных препаратов и ток-
сических веществ, транспортируя их к тканям-мишеням или местам 
биотрансформации. Накапливаются данные о псевдо- и истинно 
эстеразной активности СА по отношению к ряду фармпрепаратов. 
Однако нередко при тестировании связывающей и ферментативной 
активности СА не учитывается тот факт, что в плазме биохимиче-
ские процессы протекают в условиях молекулярного краудинга —
в среде, содержащей высокие концентрации макромолекул (до
90 мг/мл). 
Цель представленной работы
— в эксперименте 
in vitro
изучить влияние молекулярного краудинга на связывающую и фер-
ментативную активность бычьего СА (БСА) по отношению к мо-
дельному субстрату n-нитрофенилацетату (НФА). 
Условия молекулярного краудинга моделировали добавлением 
декстрана (DEX; 25, 50, 75 и 100 мг/мл). Гидролитическую актив-
ность БСА (15 и 600 мкМ) определяли спектрофотометрически
(405 нм) по накоплению продукта реакции п-нитрофенола. Извест-
но, что взаимодействие СА с НФА имеет двухфазный характер: пер-
вую (предстационарную) фазу обеспечивают два процесса в двух 
сайтах: моноацетилирование белка в сайте Садлоу II и «истинный» 
гидролиз в сайте Садлоу I. Вторая (стационарная) стадия обуслов-
лена активностью только сайта Садлоу I. В данной работе для оцен-
ки кинетики сайта Садлоу II рассчитывали скорость в диапазоне
0-90 секунд, сайта Садлоу I — в диапазоне 90-600 секунд. 
Согласно полученным данным, плотная среда повышает псев-
доэстеразную, но подавляет истинно эстеразную активность БСА.
В случае предстационарной фазы с увеличением концентрации DEX 
повышается сродство сайта Садлоу II БСА к НФА, но снижается ка-

---

ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ
761
жущаяся максимальная скорость реакции Vmax, что, по-видимому, 
является следствием «оккупации» сайтов Садлоу II из-за повышен-
ного сродства. В случае стационарной фазы до определенной кон-
центрации декстрана (50 мг/мл) сродство сайта истинно Садлоу I 
БСА к НФА растет, а Vmax снижается. При концентрации DEX > 
50 мг/мл наблюдается значимое уменьшение сродства при незна-
чительном увеличении значения Vmax. Для выяснения того, на-
сколько изменение сродства в сайте Садлоу I является кажущейся 
величиной, требуется проведение дополнительных экспериментов. 
Повышение псевдоэстеразной активности СА в условиях краудинга 
следует учитывать при разработке и тестирования фармпрепаратов, 
взаимодействующих с альбумином.
Работа выполнена в рамках государственного задания 
 
№ AAAA-А18-118012290142-9. 

---

762
ФАРМАКОЛОГИЯ, ФАРМАКОГНОЗИЯ, ФАРМАЦЕВТИКА, ТОКСИКОЛОГИЯ